Спосіб діагностики гнійного холангіту

Спосіб діагностики гнійного холангіту шляхом дослідження біологічного субстрату, який відрізняється тим, що методом газової хромато Спосіб, що заявляється, відноситься до медицини, а точніше до хірургії і такого її розділу, як хірургія черевної порожнини, власне хірургії печінки і призначений для покращення результатів операцій на печінкових протоках. Відомо, що діагностика гнійного холангіту (ГХ) при жовчнокам'яній хворобі (ЖКХ) залишається важливою проблемою біліарної хірургії через незадовільні результати лікування хворих, високу післяопераційну летальність (4,7 - 21%), значне зростання кількості стертих та безжовтушних форм, діагностика яких з використанням існуючих методів викликає великі труднощі Існують різні способи діагностики гнійного холанг..у: клінічні, лабораторні. Інструментальні. Найбільш інформативні з них - інтраопераційні Інструментальні методи прицільна контактна ендоскопічна електротермометрія жовчних протоків та фіброхолангіоскопія [1,2]. Обмеження при використанні викликані їх виключним інтраопераційним застосуванням, що не дає можливості спостерігати за перебігом хвороби в післяопераційному періоді. Найближчим аналогрм-прототипом способу, що заявляється, є спосіб визначення у внутріпротоковій жовчі кількості фармазанпозитивних нейтрофільних гранулоцитів. Для цього інтраопераційно отримують жовч І виділяють з неї нейтрофіли, проводять реакцію їх зависі з нітросинім тетразолієм, визначають кількість фармазанпозитивних клітин і при наявності їх 2% і більше, діагностують гнійний холангіт [3]. Спосіб-прототип має наступні недоліки: він не забезпечує високу ефективність виявлення графії визначають склад жирних кислот ліпідів сироватки крові та індекс їх співвідношення за формулою: де Сго з - ейкозотрієнова кислота, %; С204- арахідонова кислота, %; Сів г- лінопева кислота, %, і при підвищенні показника до 1 і більше діагностують гнійний холангіт. гнійного холангіту; відноситься до інтраопераційних методів, що не дозволяє контролювати процес одужання після операції*. Задача, що вирішується, полягає у забезпеченні діагностики гнійного холангіту до оперативного втручання, більш повний та якісний контроль за перебігом захворювання в післяопераційному періоді. Технічним результатом нового способу буде зменшення частоти інтраопераційних ускладнень при хірургічному лікуванні хворих гнійним холангітом шляхом вибору оптимального об'єму оперативного втручання та зменшення післяопераційних ускладнень шляхом корекції проводимого лікування з урахуванням клінічних та лабораторних даних. Поставлена задача, згідно винаходу, досягається тим, що методом газової хроматографії визначають склад жирних кислот ліпідів сироватки крові та індекс їх співвідношення за формулою: Є» з + С И 4 де Сгоз - ейкозотрієнова к-та (в %), Сго4 - арахідонова к-та (в %); Сівг - лінолева к-та (в %), і при підвищенні показника до 1 і більше, діагностують гнійний холангіт. Запропонований спосіб здійснюється наступним чином: сироватку крові в об'ємі 1-1,5 мл вміщують у пробірку з притертою пробкою ємкістю 1015 мл, додають 5-7 мл хлороформно-метанольно'г суміші (у відношенні 2:1) І тримають ЗО хвилин в холодильнику при 4 в С, потім відбирають піпеткою Г о> со О) 39741 Пастера нижній хлороформний шар Для повноти реакції етап екстракції хлороформно-метанольною сумішшю повторюють двічі. Об'єднані хлороформні екстракти концентрують випарюванням до висихання а потом» азоту при температурі 4 5 Х на водяній бані. До сухого осаду ліпідів сироватки крові або жовчі додають 5 мл 1 % H2SO4 в метанолі та переносять розчин у скляну ампулу ємкістю 10 мл, після запаювання проводять гідроліз І метилування в термостаті при температурі 85"С протягом 20 хвилин. Екстракцію метилованих жирних кислот (ЖК) ліпідів сироватки крові здійснюють двічі гексан-ефірною сумішшю (у співвідношенні 1:1) в об'ємі 5 мл (для розмежування фаз додають 1 мл дистильованої води), відбирають піпеткою Пастера верхній шар Об'єднані екстракти випарюють до висихання в потоці азоту при температурі 45"С на водяній бані! Сухий осад розчиняють в 40-50 мкл чистого гексану та вводять у випарювэч хроматографа в об'ємі 5 мкл. Газохроматографічний аналіз спектру жирних кислот ліпідів сироватки крові здійснюється на газовому хроматографі серії "Цвет-500" з полум'яно-Іонізаційним детектором в Ізотермічному режимі за таких умов: використовують скляну колонку (розміром 2 м х 0,3 см), заповнену фазою 5% ПЕГС (поліетиленгліколю сукцинату) на хроматоні N-AW-HMDS (зернистість 0,125 - 0,160 мм), температура колонки +187°С, температура випарювача +250°С, витрати азоту та водню - 35 мл/хв, повітря - 200 мл/хв, швидкість діаграмної стрічки - 240 мм/год, чутливість шкали 10А"7, об'єм проби, яка вводиться, • 5 мкл, тривалість аналізу - 20 хв. Кількісна оцінка спектру жирних кислот ліпідів сироват ки крові проводиться методом нормування площ з визначенням частки кислот у відсотках Похибка визначення ± 10%. Кров для аналізу спектру жирних кислот ліпідів сироватки крові набирали перед оперативним втручанням з кубітальної вени. Контрольну групу склали б хворих з калькульозним холециститом без ускладнень, прооперованих в плановому порядку. В якості показника норми використали дані, отримані у 10 практично здорових осіб тієї ж вікової групи. Результати газохроматографічного аналізу спектру жирних кислот ліпідів сироватки крові приведені в таблиці. В період з серпня 1999 до грудня 2000р. у хірургічному відділенні Центральної міської клінічної лікарні за запропонованим способом гнійний холангіт перед операцією діагностовано у 7 хворих (2 - чоловічої статі, 5 - жіночої), у всіх діагноз був верифікований під час операції. Таким чином, запропонований спосіб забезпечує більш повну та якісну діагностику гнійного холангіту, є точним та швидким. Література. 1 Иншаков Л Н , Зиневич В.П., Кузьмин Крутецкий М И. Наш опыт диагностической и лечебной холедохоскопии // Вести, хирургии им. И.И. Грекова. -1991. - № 7-8 - С. 88-91. 2. Мамчич В И., Примов Э А. Способ интраоперационной диагностики холангита // Клін. хірургія. -1993. - №4. - С 60-61. 3. Патент РФ № 2008675. МКИ G 01 N 33/53. Способ диагностики гнойного холангита / А.А. Шалимов, В П. Чернышов, А.А. Стасенко и др. - Заявлено 08.10.90, опубл. 28.02.94. - Бюл. Na 4. Склад (в %) жирних кислот ліпідів сироватки крові Жирні кислоти Сі8 2 (лінолева) Сгоз (ейкозотрієнова) Сго4 (арахідонова) Норма (п • 10) Контроль (п в 8) Гнійний холангіт (п = Т) 16,0 ±1,8 0,3 ±0,01 2,8 ± 0 , 3 ' 23,3 ±1,1 0,3 ± 0,08 13,1 ±0,8 17,7 ±1,5 7,7 ±0.6 37,9 ±2,7 ** V •• - „ Тираж 50 екз. Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна, 88000, м. Ужгород, вуп. Гагаріна, 101 (03122)3-72-89 (03122)2-57-03