Спосіб діагностики гнійного холангіту

Изобретение относится к области медицины, а именно иммунологии, и может быть использовано для диагностики гнойного холангита. Известны способы диагностики гнойного холангита путем микроскопического исследования клеточного состава желчи [1]. Недостатком этих способов является низкая точность диагностики. Наиболее близким по технической сущности и принятым за прототип является способ диагностики гнойного холангита путем микроскопического исследования клеточного состава желчи и определения количества формазан-положительных клеток [2]. Недостатком прототипа является также недостаточная точность диагностики, которая составляет до 64%. Задачей изобретения является создание такого способа диагностики гнойного холангита, который за счет дополнительного исследования количественного содержания секреторного иммуноглобулина A (s lg А) обеспечивал бы повышение точности диагностики. Поставленная задача решается тем, что, в способе диагностики гнойного холангита путем микроскопического исследования клеточного состава желчи и определения количества формазанположительных клеток, согласно изобретению дополнительно определяют количество S lg А и при его содержании 0.20 г/л и более устанавливают диагноз гнойный холаигит. Определение количества s Ig А позволяет определить степень воспаления, так как он является основным иммуноглобулином, вырабатываемым локально при воспалительных процессах, что и обеспечивает повышение точности диагностики. Количественный показатель 0,20 г/л был выбран в процессе клинических исследований на 32 больных. При этом было установлено, что у больных гнойным холангитом содержание S lg А в желчи общего желчного протока составляет 0,20 г/л и выше, а при отсутствии гнойного холангита у больных этот уровень был ниже. Способ осуществляется следующим образом. Желчь забирают из общего желчного протока интраоперационно с помощью шприца либо из дренажа в послеоперационном периоде. Центрифугируют полученную желчь при 1000 об/мин в течение 10 мин. Отобранную надосадочную желчь используют в реакции радиальной иммунодиффузии по Манчини(1965). Готовят 2 %-ный агар Dlfco на мединал-вероналовом буфере pH 8,6. Готовят рабочее разведение стандартной сыворотки против секреторного компонента (sC) человека (получаемую в Институте эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва). Вносят разведенную стандартную сыворотку в агар (растопленный и охлажденный до 56°С) в равных объемах по 3 мл и выливают в чашку Петри. После застывания агара с антисывороткой пробойником вырезают лунки диаметром 2 мм на расстоянии 2,5 см друг от друга. В лунки микрошприцем вносят по 2 мкл стандартную эталонную сыворотку цельную, в разведения 1:1,1:2, 1:4, 1:8, 1:16 и 1:32 (на веронал-мединаловом буфере pH 8,56 и 0,12 М) и испытуемые желчи (неразведенные). После раскапывания чашку Петри с агаром помещают во влажную камеру и инкубируют в термостате 24 часа. По окончании инкубации агар промывают физиологическим раствором и красят амидочерным. Диаметр колец преципитации измеряют с точностью до 0,1 мм с помощью штангенциркуля. На полулогарифмической бумаге строят калибровочную кривую, выражающую зависимость между количеством S lg А и диаметром колец преципитации в стандарте. По этой кривой определяют содержание S lg А в испытуемых препаратах желчи, поскольку диаметр колец в этих условиях пропорционален его количеству. При наличии уровней з lg А 0,20 г/л и выше устанавливают диагноз гнойный холангит. Пример 1. Больная С, 31 год (история болезни № 7150) поступила в ИКЭХ 111 печеночное отделение с жалобами на желтуху. Из анамнеза известно, что при холецистэктомии по месту жительства поврежден гепатохоледох, появилась желтуха. Длительность желтухи 1,5 мес. Поставлен диагноз: рубцрвая стриктура общего печеночного протока, холедоходуоде-нальный свищ. Гепатит. Гнойный холангит. Операция гепатикоеюностомия на транспеченочном дренаже по Saypol через левый печеночный проток. С помощью шприца и инъекционной иглы из общего желчного протока взято 1 мл желчи для исследования. При исследовании препарата НСТ-теста обнаружено 59% формазан-положительных клеток. При исследовании желчи в реакции Манчини содержание s lg А выявлено в количестве 0,38 г/л. Установлен диагноз гнойный холангит. Пример 2. Больная Л, 24 года (история болезни № 7774) поступила в III печеночное отделение ИКЭХ с жалобами на боли в правом подреберье, общую слабость, зуд, t = 38°С. Из анамнеза известно, что через две недели после холецистэктомии выполнена релапаротомия, во время операции -повреждение желчных протоков. Поставлен диагноз: рубцовая стриктура холедоха. Механическая желтуха. Гнойный холангит. Операция бигепатикоеюностомия на транспеченочном дренаже по Saypol. С помощью шприца и инъекционной иглы из общего желчного протока взято 1 мл желчи для исследования. При исследовании препарата НСТ-теста нейтрофилов в желчи не обнаружено. При исследовании желчи в реакции Манчини содержание s lg А составило 0,36 г/л. Установлен диагноз гнойный холангит. Пример 3. Больной Д., 51 год (история болезни №316) поступил в III печеночное отделение ИКЭХ с жалобами на боли в правом подреберье, зуд, желтуху. Поставлен диагноз: Хронический калькулеэный холецистит, Холедохолитиаз. Механическая желтуха. Операция: холецистэктомия, дренирование общего желчного протока по Вишневскому-Робсону. С помощью шприца и инъекционной иглы из общего желчного протока взято 1 мл желчи для исследования. При исследовании желчи в реакции Манчини количественное содержание s Ig А составило 0,19 г/л. При исследовании препарата НСТ-теста нейтрофилов не обнаружено. Констатировано отсутствие гнойного холангита. По данному способу произведена диагностика гнойного холангита у 41 % больного, при этом точность диагностики была 70%, в то время как при использовании способа-прототипа -64%. Наиболее характерные примеры исследования представлены в таблице. Таким образом, предложенный способ диагностики гнойного холангита повышает точность диагностики. Способ рекомендован для широкого применения в практике.