Спосіб одержання рослин тютюну з підвищеним рівнем посухостійкості методом клітинної селекції

Спосіб одержання рослин тютюну з підвищеним рівнем посухостійкості методом клітинної селекції, який призначений відбирати стійкі клітинні лінії на селективному культуральному середовищі, а в подальшому регенерувати рослини із відібраних ліній, який відрізняється тим, що культуральне середовище створюють додаванням іонів важкого металу кадмію (Cd2+) у концентраціях, летальних для клітинних культур дикого типу. (19) (21) u200812986 (22) 07.11.2008 (24) 25.03.2009 (46) 25.03.2009, Бюл.№ 6, 2009 р. (72) СЕРГЄЄВА ЛАРИСА ЄВГЕНІВНА, UA, ПОРЕЦЬКА ОЛЕНА ІГОРІВНА, UA, ТИЩЕНКО ОЛЕНА МИКОЛАЇВНА, UA (73) ІНСТИТУТ ФІЗІОЛОГІЇ РОСЛИН І ГЕНЕТИКИ НАН УКРАЇНИ, UA 3 40174 культивувати на цьому стресовому фоні. Такі клони (клітинні лінії) - визначали як Cd-стійкі. Cd-стійкі лінії (стійкість підтверджувалась постійним приростом біомаси калусу при його вирощуванні на стресовому фоні протягом чотирьох місяців) переносили на середовище з манітом. На новому селективному середовищі, яке містило 0,8М маніту, одержані клітинні лінії зберігали нормальну проліферацію та ріст. Така концентрація осмотика є летальною для клітинних культур тютюну [2]. Виділені на селективних середовищах з іонами кадмію стійкі клітинні лінії тютюну культивувались в умовах альтернативної дії двох стресових факторів. Після ряду пасирувань (впродовж 6 місяців) стійкі до водного стресу клітинні лінії тютюну переносили на живильне середовище для регенерації для отримання рослин. Одержані регенеранти культивували in vitro на середовищі МурашигеСкуга без регуляторів росту. Укорінені рослини переносили в ґрунт для вивчення їх характеристик. Посухостійкість рослин досліджували при їх вирощуванні у вегетаційних посудинах на відкритому повітрі за умов повної відсутності зволоження впродовж п’яти діб. На фотографії представлені звичайна рослина тютюну (вихідна форма, контроль) (Фіг.1) та рослина регенерант, одержана із Cd-стійкої клітинної лінії (Фіг.2) після дії триденної посухи. При подальшому зневодненні рослини Комп’ютерна верстка М. Ломалова 4 контролю починали необоротно жовтіти, у рослин регенерантів зменшувався тургор листків, який поновлювався після зволоження. Література: 1. Сергеева Л.Е. Изучение клеточных линий табака, устойчивых к солевому и водному стрессам, и регенерантов из них// Автореф. дисс.... канд. биол. наук. - Киев, 1991. - 20с. 2. Сергеева Л.Е. Изменения культуры клеток под действием стресса.// Киев: "Логос". - 2001. 100с. 3. Сергеева Л.Е., Михальская С.И. Культура клеток подсолнечника -экспериментальная система для изучения действия ионов кадмия// Физиология и биохимия культ, растений. - 2005. - 38, 6. С. 519-523. 4. Dracup M. Why does in vitro cell selection not improve the salt tolerance of plants?// Genetic aspects of plant mineral nutrition P.J. Rndall et al. Amsterdam: Kluwer Acad. Pub. - P.137-142. 5. Dracup M., Gibbs J., Greenway B. Melibiose, a suitable, non-permeating osmoticum for suspensioncultured tobacco cells// J. Exp. Botany. - 1986. - 37, 180. - P. 1079-1089. 6. Handa A.K., Bressan R.A., Handa S., Hasegawa P. V. Clonal variation for tolerance to polyethylene glycol-induced water stress in cultured tomato cells // Plant Physiol. - 1983. - 73, 3. - P.645654. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601