Спосіб ідентифікації метаболітів біофлавоноїдів вівса посівного в плазмі крові

Спосіб ідентифікації метаболітів біофлавоноїдів вівса посівного в біологічних середовищах організму, що полягає у наступному: 3,0мл крові центрифугують (1500об/хв. протягом 5 хвилин), до 0,01мл сироватки крові додають 4 мл насиченого розчину алюмінію хлориду та визначають спектрофотометрично проти 0,01мл інтактної сироватки з 4мл насиченого розчину алюмінію хлориду при довжині хвилі λ = 280 нм , а концентрацію в отриманому розчині розраховують за формулою D − 107 , С= 0,246 де C - концентрація, D - екстинкція. (19) (21) u200814425 (22) 15.12.2008 (24) 27.04.2009 (46) 27.04.2009, Бюл.№ 8, 2009 р. (72) ЛУК'ЯНЧУК ВІКТОР ДМИТРОВИЧ, UA, ТКАЧЕНКО В'ЯЧЕСЛАВ ГЕОРГІЙОВИЧ, UA, БОНДАР СЕРГІЙ ІВАНОВИЧ, UA, РЕЗНІК ОЛЕКСАНДРА ВОЛОДИМИРІВНА, UA, СІВІРІНА МАРИНА АНАТОЛІЇВНА, UA (73) ЛУК'ЯНЧУК ВІКТОР ДМИТРОВИЧ, UA, ТКАЧЕНКО В'ЯЧЕСЛАВ ГЕОРГІЙОВИЧ, UA, БОНДАР СЕРГІЙ ІВАНОВИЧ, UA, РЕЗНІК ОЛЕКСАНДРА ВОЛОДИМИРІВНА, UA, СІВІРІНА МАРИНА АНАТОЛІЇВНА, UA 3 40916 Вимірюють не раніше ніж через 30хв. Оптичну густину випробуваного розчину на спектрофотометрі за довжини хвилі 401нм в кюветі з товщиною шару 10мм, відносно компенсаційного розчину. Вміст суми флавоноїдів (X) у відсотках, в перерахунку на вітексин розраховують за формулою: D × 1× 50 × 25 × 100 D × 250 X= = 628 × 100 × m × 5 628 × m де D - оптична густина випробуваного розчину; 628 - питомий показник поглинання вітексину за довжини хвилі 401нм; До недоліків цього способу (прототипу) відносяться: 1. Тривалість і складність проведення аналізу. 2. Неможливість визначення біофлавоноїдів та їх метаболітів в біологічному матеріалі. Метою корисної моделі є створення експресного, точного і чутливого способу кількісного визначення флавоноїдів в біологічних середовищах організму. Розроблений спосіб полягає у наступному: 3,0мл крові центрифугують (1500об/хв. Протягом 5 хвилин), до 0,01мл сироватки крові додають 4мл насиченого розчину алюмінію хлориду та визначають спектрофотометрично проти 0,01мл інтактної сироватки з 4мл насиченого розчину алюмінію хлориду, при довжині хвилі λ = 280 нм . Запропонований спосіб відрізняється наступними перевагами: 1 .Швидкість проведення аналізу 2. Малі затрати часу для підготовки проби 3. Проста апаратура, що використовується 4. Дешевизна методу Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко 4 5. Висока надійність способу Розрахунок концентрації метаболітів біофлавоноїдів запропонованим способом проводиться за допомогою калібрувального графіку (креслення). Отримана залежність повною мірою підкоряється закону Бугера-Ламберта-Бера, про це свідчить її лінійність, а також високий коефіцієнт кореляції (0,9943) і низьке значення середньоквадратичного відхилення (0,012). Для зручності обчислень за калібрувальним графіком методом найменших квадратів була розрахована формула: D − 107 С= 0,246 де C - концентрація D - екстинкція. Приклад 1. Експериментальне дослідження запропонованого способу проводили на 10 білих нелінійних щурах обох статей масою 200-250г. Через одну годину після перорального введення біофлавоноїдів в дозах 0,25; 0,40; 0,65; 0,80; 0,95; 1,10; 1,35; 1,50; 1,65; 1,75мг, визначали концентрацію у сироватці крові за допомогою розробленого способу. Концентрацію розраховували за калібрувальним графіком. Похибка складала 3,17%. Таким чином, заявлено новий, експресний, точний і чутливий спосіб кількісного визначення біологічних середовищ організму, який може знайти застосування в хіміко-фармацевтичній промисловості, медицині, фармацевтичному та токсикологічному аналізі. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601