Спосіб діагностики вірусних інфекцій великої рогатої худоби
Формула / Реферат
Спосіб діагностики вірусних інфекцій великої рогатої худоби шляхом постановки реакції непрямої гемаглютинації, реакції непрямої бактеріальної аглютинації з досліджуваним матеріалом, який відрізняється тим, що як досліджуваний матеріал використовують носовий, піхвовий секрети і сльозу з одноразовим відбором проб на всмоктувальний матеріал, які готують для дослідження шляхом отримання прозорої рідини і використовують в реакціях для виявлення відсутності або наявності антитіл, за титрами яких встановлюють стадії перебігу захворювання або циркуляцію вірусу в господарстві.
Текст
Спосіб діагностики вірусних інфекцій великої рогатої худоби шляхом постановки реакції' непрямої гемаглютинації, реакції непрямої бактеріальної аглютинації з досліджуваним матеріалом, який відрізняється тим, що як досліджуваний матеріал використовують носовий, піхвовий секрети і сльозу з одноразовим відбором проб на всмоктувальний матеріал, які готують для дослідження шляхом отримання прозорої рідини і використовують в реакціях для виявлення відсутності або наявності антитіл, за титрами яких встановлюють стадії' перебігу захворювання або циркуляцію вірусу в господарстві Корисна модель відноситься до ветеринарної медицини, зокрема до способів діагностики вірусних інфекцій: інфекційного ринотрахеїтупустульозного вульвовапніту великої рогатої худоби. Відомий спосіб діагностики вірусних інфекцій, котрий включає дослідження сечі, яку наносять краплями на предметне скло для проведення реакції флуоресценції (AcSU 1209171 МКИ А61 В 10/00, 1986). Однак, для постановки цієї реакції' необхідно мати спеціальне обладнання і компоненти, що дорого коштують. Відомий також спосіб діагностики, який полягає у визначенні концентрації імуноглобулінів в секреті слизових оболонок в реакції імунодифузії (Ac SU 1050668 МКИ А 61 В 10/00, А 61 К 39/395, 1983). Однак, для проведення цієї реакції необхідні високо очищені компоненти (антисироватки до окремих класів імуноглобулінів, агар фірми "Difco") та спеціальні скляні пластини розміром 9x12, з наступним накресленням графіку, за яким визначають концентрацію імуноглобулінів для діагностування осіб, які хворіють ангіною Найбільш близьким технічним рішенням є спосіб діагностики вірусних інфекцій шляхом постановки реакції непрямої гемаглютинації (РИГА), реакції непрямої бактеріальної аглютинації (РНБА) з сироваткою крові (В, Н. Сюрин, Р В. Белоусова, Н. В Фомина Ветеринарная вирусология. - М Агропромиздат, 1984. - с 323-327, Лабораторные исследования в ветеринарнарии- Вирусные, риккетсиозные и паразитарные болезни: Справочник / Под ред. Б. И Антонова. - М.: Агропромиздат, 1987 - с.6567.) Инфнекционный ринотрахеит-пустулезный вульвовагинит (баланопостит) крупного рогатого скота: диагностика, профилактика, меры борьбы (методические рекомендации). - Харьков, 1990 - с. 14-15. Але дослідний матер/ал - сироватка крові відбиратися повинен висококваліфікованим працівником. Крім того, сироватку можна одержати не раніше ніж через 4-16 годин після взяття проби крові в залежності від пори року та додаткових маніпуляцій. Постановка реакції з використанням сироватки крові відноситься до ретроспективних методів, недолік яких полягає у тому, що пробу крові відбирають два рази від однієї і тієї ж тварини з інтервалом 14-21 день За цей час тварина видужує, а діагноз ставлять за наростанням титрів антитіл у другій пробі в порівнянні з першою. Таким чином, цей спосіб не є експресметодом, а навпаки, трудомістким, з великою затратою часу і, головне, небезпечний в розповсюджені лейкозу В основу корисної' моделі поставлена задача удосконалити спосіб діагностики вірусних інфекцій великої рогатої худоби шляхом заміни досліджуваного матеріалу зі спрощенням відбору проби та скороченням часу для постановки діагнозу. Поставлена задача вирішується тим, що в способі діагностики вірусних інфекцій великої' рогатої худоби шляхом постановки реакції непрямої гемаглютинації (РИГА), реакції непрямої бактеріальної гемаглютинації (РНБА) з досліджуваним матеріалом, згідно корисної моделі, в якості останнього використовують носовий, піхвовий секрети (О 00 4286 та сльозу з одноразовим відбором на усмоктуючий матеріал проб, з яких відділену прозору рідину використовують в реакціях з визначенням відсутності або наявності антитіл, за титрами яких діагностують стадії перебігу захворювання або циркуляцію вірусу в господарстві Використовуючи носовий, піхвовий секрети та сльозу для проведення реакцій РИГА, РНБА, відбір проби здійснюється більш простіше і не потребує високої кваліфікації виконуючого в порівнянні з відбором крові. Відбір проби здійснюють одноразово, що не достатньо при діагностуванні дослідженням крові. В якості всмоктуючого матеріалу використовують поролон, який має більшу сорбційну ємність в порівнянні з марлею та ватою, а з його пор краще видаляється проба секретів. Виділення прозорої рідини із носового, піхвового секретів і сльози здійснюють відразу після відбору, в той час, як дня одержання сироватки крові шляхом відстою необхідний термін від 4-х до 18-ти годин Відсутність маніпуляцій з кров'ю, особливо в господарствах, які неблагополучні по лейкозу великої рогатої худоби, не призводить до перезараження тварин, але при цьому дає змогу вивчити епізоотичну ситуацію в цих господарствах щодо інфекційного ринотрахеїту (ІРТ) Діагностування проводять за результатами реакцій, представлених в таблиці 1 Таблиця 1 Результати реакцій РИГА і РНБА Реакція РИГА РНБА Виявлення антитіл в титрах 1 16-1 64 12-18 1 32 - 1 256 1 2 - 1 16 Діагноз Гострий перебіг ІРТ присутність на слизових оболонках молозивних антитіл Циркуляція вірусу в господарсіві Гостра інфекція Перехворіння тварин і циркуляція вірусу в господарстві Приклад конкретного використання. Спосіб здійснюють наступним чином. Носовий секрет відбирають з допомогою поролонового тампону, який вводять тварині в один із носових ходів на 4+1,5 хвилин для пропитки всмоктування. Вийнятий тампон вміщують в стерильну пробірку зі стерильним середовищем № 199 (для культивування культур тканин), з додаванням антибіотиків із розрахунку, пеніцилін - 1000 ОД/см3 , стрептоміцин 100 мкг/см3 або антибіотик широкого спектру дії - гентаміцин - 100 мкг/см3. Піхвовий секрет відбирають так само Сльозу відбирають за допомогою смужок стерильного фільтрованого паперу, прикладаючи їх до роговиці ока або під кон'юнктиву третьої повіки. Промочений сльозою папір також вміщують в стерильні пробірки зі стерильним середовищем і антибіотиками. Комп'ютерна верстка М Клюкін Поролонові тампони і папір віджимають за допомогою пінцету і, рідину використовують як матеріал для дослідження Мутні секрети центрифугують, щоб одержати прозору рідину, з якою ставлять реакцію непрямої гемаглютинації (РИГА). Постановку РИГА здійснюють згідно методичних рекомендацій (Вирусные, риккетсиозные и паразитарные болезни: Справочник / Под ред. Б.И. Антонова. - М.: Агропромиздаг, 1987 - с.6567.) з використанням еритроцитарного діагностикуму для серологічної діагностики інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби, виготовленого за ТУ 10-19-372-87 Приволжською бюфабрикою. Облік результатів проводять після отримання чітко виявлених змін в контролях: при осіданні у вигляді чіткого кільця еритроцитарного антигену з негативною сироваткою та розчинником. Попередній облік проводять через 3-4 години, остаточний - через 24 години. Результати оцінюють в залежності від інтенсивності аглютинації. Позитивною вважають реакцію, якщо при аглютинації еритроцитів осадок має вигляд добре вираженої із загнутими або рівними краями "парасольки" Сумнівна реакція - відбулася аглютинація еритроцитів, а осадок має вигляд "парасольки" із слабо вираженим кільцем або чіткого кільця із слабо вираженою "парасолькою". Реакцію непрямої бактеріальної аглютинації (РНБА) також ставлять для визначення антитіл до вірусу ІРТ в сльозі, носовому та піхвовому секретах. Підготовку їх здійснюють так само, як і для РИГА, і в якості носія вірусу ІРТ у діагностичному препараті використовують стабілізовану культуру бактерій Staph. albus. Діагностикум виготовлений за ТУ-46.15 229.97. Постановку РНБА здійснюють за методикою ІЕКВМ' Инфекционный ринотрахеит-пустулезный вульвовагинит (баланопостит) крупного рогатого скота, диагностика, профилактика, меры борьбы (методические рекомендации). - Харьков, 1990 - с. 14-15.) Облік результатів проводять як і при постановці РИГА і при осадках у вигляді добре виражених "парасольок" з рівними краями реакцію вважають позитивною. Діагностують по таблиці 1. Таким чином запропонований спосіб діагностики інфекційного ринотрахеїтупустульозного вульвовагініту за допомогою РИГА та РНБА з використанням носового, піхвового секретів та сльози, як дослідного матеріалу, дозволяє ліквідувати розповсюдження інфекцій через забір крові, зменшити трудомісткість і затрати часу на встановлення діагнозу Підписне Тираж 37 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент Інтелектуальної власності, вул Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Глазунова, 1, м Київ-42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for diagnosing viral infections of the cattle
Назва патенту російськоюСпособ диагностики вирусных инфекций крупного рогатого скота
МПК / Мітки
МПК: A61B 10/02, G01N 33/487
Мітки: інфекцій, рогатої, діагностики, спосіб, худоби, великої, вірусних
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/2-4286-sposib-diagnostiki-virusnikh-infekcijj-veliko-rogato-khudobi.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб діагностики вірусних інфекцій великої рогатої худоби</a>
Попередній патент: Контейнер для збору побутових відходів
Наступний патент: Спосіб кастрації самців нутрій
Випадковий патент: Фурма для глибинної продувки металу