Спосіб прогнозування дисбіотичних порушень
Номер патенту: 43741
Опубліковано: 25.08.2009
Автори: Єгорова Світлана Юріївна, Кудрявцева Валентина Євгенівна, Гаркава Катерина Григорівна, Челкан Віра Володимирівна, Тропко Людмила Віталіївна
Формула / Реферат
Спосіб диференціації дисбіотичних порушень, який включає дослідження поглинальної активності нейтрофільних гранулоцитів в реакції фагоцитозу зі стандартною тест-культурою Escherichia coli, який відрізняється тим, що додатково проводять дослідження з виділеним у конкретного хворого штамом Escherichia coli, причому диференціацію дисбіотичних порушень проводять за величиною коефіцієнта функціонального стану нейтрофілів (Кф), який визначають за формулою: Кф=ФЧс/ФЧк, де: ФЧс - фагоцитарне число в реакції фагоцитозу зі стандартною тест-культурою Escherichia coli, ФЧк - фагоцитарне число в реакції фагоцитозу з клінічним штамом Escherichia coli, висіяним у конкретного хворого, причому значення Кф від 1 до 2 свідчить про збережені резерви функціонального стану нейтрофілів і легкий ступінь дисбіотичних порушень, значення Кф від 2 до 4 свідчить про зниження функціональних резервів фагоцитуючих клітин і, відповідно, середній ступінь дисбіотичних порушень, а значення Кф вище 4 свідчить про виснаження функціональних резервів фагоцитуючих клітин, тяжкий ступінь дисбіотичних порушень, ризик поглиблення дисбіозу.
Текст
Спосіб диференціації дисбіотичних порушень, який включає дослідження поглинальної активності нейтрофільних гранулоцитів в реакції фагоцитозу зі стандартною тест-культурою Escherichia coli, який відрізняється тим, що додатково проводять дослідження з виділеним у конкретного хворого штамом Escherichia coli, причому диференціацію 3 43741 нейтрофілів, як здатності організму протистояти розвитку ускладнень, пов'язаних з порушеннями стану мікрофлори товстої кишки. Заявлений спосіб та прототип мають загальні ознаки: дослідження поглинальної активності нейтрофілів периферичної крові методом фагоцитозу. Новим у способі, що заявляється є застосування сукупності наступних ознак: - використання у якості об'єкту фагоцитозу стандартної тест-культури Е. соlі і клінічного штаму Е. соlі, висіяного від конкретного хворого, - визначення коефіцієнту функціонального стану нейтрофілів. Таке сполучення ознак не виявлено в відомій літературі, прямо не витікає з відомого рівня техніки. Це сполучення загальних та відмінних ознак в заявленому способі дозволяє вирішити поставлене завдання та покращити результати діагностики та прогнозування перебігу хвороби. Заявлений спосіб здійснюється наступним чином: В стерильну пробірку з 0,5мл гепарину (Richter G.) у розведенні 1:10, вносили 5мл венозної крові. Кров ретельно змішували та центрифугували 10 хвилин при 1000об/хв. Плазму разом із шаром лейкоцитів переносили до пробірки, додаючи 5мл середовища 199. Лейкоцити відмивали центрифугуванням 10 хвилин при 1000об/хв. Супернатант видаляли, а лейкоцити, які знаходяться в осаді, ресуспендували в середовищі 199 двічі, кожного разу повторюючи процедуру "м'якого" центрифугування. Після останнього центрифугування піпеткою відсмоктували супернатант і частину рідини з клітинами, залишивши у центрифужній пробірці 0,2мл (10×109кл/мл) клітинної суміші в середовищі 199. В якості об'єкту фагоцитозу використовували живу добову тест-культуру Escherichia coli і живу добову культуру Е. coli, висіяну від конкретного хворого з вмісту товстої кишки. З косого агару з добової культури стерильним ізотонічним розчином натрію хлориду змивали колонії мікробів. Використовуючи стандарт оптичної мутності, розводили мікробну суміш до концентрації 1 млрд. мікробних клітин в 1мл; 0,3мл цієї суміші вносили в пробірку, яка вміщує 0,2мл лейкоцитів в середовищі 199. Інкубували 60 хвилин при 37°С. По закінченню вказаного часу в пробірку додавали 5мл ізотонічного розчину натрію хлориду, нагрітого до 37°С, перемішували і центрифугували 10 хвилин при 1500об/хв. Супернатант видаляли і робили мазки із лейкоцитарної завісі. Мазки висушували на повітрі, фіксували 10 секунд у метанолі, фарбували за Романовським-Гімза азуреозином. Тривалість фарбування 45-50 хвилин. Визначають фагоцитарне число (ФЧ) - середнє число мікроорганізмів, поглинутих одним фагоцитом (ча Комп’ютерна верстка А. Крулевський 4 стка від ділення загального числа поглинутих бактерій на число нейтрофілів, що вступили до фагоцитозу). Визначають коефіцієнт функціонального стану нейтрофілів (Кф), за формулою: Кф=ФЧс/ФЧк, де ФЧс - фагоцитарне число в реакції фагоцитозу зі стандартною тест-культурою Escherichia coli, ФЧк - фагоцитарне число в реакції фагоцитозу з клінічним штамом Escherichia coli, висіяним у конкретного хворого. Кф від 1 до 2 свідчить про збережені резерви функціонального стану нейтрофілів і легкий ступінь дисбіотичних порушень. Кф від 2 до 4 свідчить про зниження функціональних резервів фагоцитуючих клітин і середній ступінь дисбіотичних порушень. Кф вище 4 свідчить про виснаження функціональних резервів фагоцитуючих клітин, тяжкий ступінь дисбіотичних порушень, ризик поглиблення дисбіозу. Спосіб ілюструється наступними прикладами. Приклад 1. Хворий М.С.В., 55 років, знаходився на лікуванні у відділенні захворювань кишечнику Інституту гастроентерології АМН України. Клінічний діагноз: НВК. Дата дослідження: 6.06.07. ФЧс=9,7; ФЧк=8,4; Кф=1,2 Заключення: збережені резерви функціонального стану нейтрофілів, легкий ступінь дисбіотичних порушень. Прогноз - позитивний. Приклад 2. Хворий Р.В.Н., 38 років, знаходився на лікуванні у відділенні захворювань кишечнику Інституту гастроентерології АМН України. Клінічний діагноз: НВК. Дата дослідження: 21.03.07. ФЧс=10,0; ФЧк=2,5; Кф=4 Заключення: виснаження функціональних резервів нейтрофілів, ризик поглиблення дисбіотичних порушень. Доцільне застосування імунотропних засобів, що впливають на фагоцитоз. Спосіб оцінки функціональних резервів нейтрофілів при дисбіотичних порушеннях використано в лабораторії мікробіології і імунології ДУ "Інститут гастроентерології АМН України" при обстеженні хворих на неспецифічний виразковий коліт. Вищезазначені дані свідчать про те, що заявлений спосіб працездатний, він дозволяє проводити диференціацію важкості дисбіотичних порушень. Спосіб є ефективним та придатним для використання в лікувальних закладах. Підвищення точності способу вирішується завдяки комплексній оцінці функціонального стану нейтрофілів. Здатність поглинати та перетравлювати клінічний штам, що присутній у вмісті товстої кишки при дисбіотичних станах, є інформативним прогностичним параметром стану фагоцитів, і, відповідно, дозволяє оцінити ризик поглиблення дисбіозу, адже зміни мікрофлори являються результатом зниження загальної резистентності макроорганізму. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for prediction of disbiotic distortions
Автори англійськоюYehorova Svitlana Yuriivna, Kudriavtseva Valentyna Yevheniivna, Harkava Kateryna Hryhorivna, Tropko Liudmyla Vitaliivna, Chelkan Vira Volodymyrivna
Назва патенту російськоюСпособ прогнозирования дисбиотических нарушений
Автори російськоюЕгорова Светлана Юрьевна, Кудрявцева Валентина Евгениевна, Гаркава Катерина Григорьевна, Тропко Людмила Витальевна, Челкан Вера Владимировна
МПК / Мітки
МПК: G01N 33/53
Мітки: дисбіотичних, порушень, спосіб, прогнозування
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/2-43741-sposib-prognozuvannya-disbiotichnikh-porushen.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб прогнозування дисбіотичних порушень</a>
Попередній патент: Спосіб приготування запеченої картоплі
Наступний патент: Спосіб проведення процесу одержання алюмінію електролізом
Випадковий патент: Пристрій для обробки поверхні рідкого металу при одержанні зливка