Вакцина інактивована проти ротавірусної і коронавірусної інфекцій великої рогатої худоби “рокоген “

УКРАЇНА (19) UA (11)4494 (із) U (51)7А61К39/00 МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ ДЕРЖАВНИЙ ДЕПАРТАМЕНТ ІНТЕЛЕКТУАЛЬНОЇ ВЛАСНОСТІ ОПИС ДО ДЕКЛАРАЦІЙНОГО ПАТЕНТУ НА КОРИСНУ МОДЕЛЬ видається під відповідальність власника патенту (54) ВАКЦИНА ІНАКТИВОВАНА ПРОТИ РОТАВІРУСНОЇ І КОРОНАВІРУСНОЇ ІНФЕКЦІЙ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ "РОКОГЕН " (21)20040503751 •• >: {22)19.05.2004 ' >ч ' * . (24) 17.01.2005 (46) 17.01 2005, Бюл. № 1, 2005 р (72) Стеценко Володимир Іванович, Тризна Лариса Петрівна (73) ІНСТИТУТ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ І КЛІНІЧНОЇ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ Корисна модель, що передбачається, відноситься до вірусології, а саме до виготовлення вакцин на підприємствах біологічної промисловості. Вакцина „Рокоген" призначена для профілактики ротавірусної і коронавірусної' інфекцій молодняка великої рогатої худоби (ВРХ) щеплення тільних корів і нетелів. Основними споживачами вакцини є господарства, де мається велика рогата худоба Для профілактики рота- та коронавірусної інфекцій використовують вакцини: 1. у Франції комбінована вакцина інактивована р-пропілактоном, 2. у Болгарії використовують бівалентну вакцину проти рота- і корона вірусної інфекції телят РО КО-81 з місцевих штамів, адаптованих до культури клітин З в Росії „Вакцина против коронавирусной инфекции крупного рогатого скота и способ профилактики коронавирусной инфекции крупного рогатого скота" А.С. 1628294, 15.10.1990г (Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Соколовой Надежды Львовны «Коронавирусный энтерит телят (лабораторная диагностика и специфическая профилактика», М., 1993). (Сюрін В.Н , 1998, С.43) Існує вакцина проти рота- та коронавірусної інфекцій („Ассоциированная вакцина против рота-, корона-, герпесвирусной и эшерихиозной диареи новорожденных телят" патент RU № 2145236 от 30 04.1999, кл. А61К39/295 ВНИВИ, г Казань) - це рішення є прототипом В ньому використовуються штами, які являються власністю (57) Вакцина інактивована проти ротавірусної і коронавірусної інфекцій великої' рогатої худоби, що містить виробничі штами рота- та коронавірусів, яка відрізняється тим, що як виробничі штами використовують: ротавірус - "235" і коронавірус - "ВС-1", які адаптовані до перещеплювальних культур клітин нирки теляти, трахеї теляти або нирки вівці, що сорбовані на гідроксиді алюмінію та інактивовані формаліном. Росії, що є недоліком. Відмінні особливості від прототипу RU №2145236: 1 використовуються інші штами, в тому числі штам рота вірусу виділений в лабораторії вірусологи' ІЕКВМ. 2 містить в своєму складі захисне середовище (нейтральний гліцерин, якого немає в прототипі), що створює умови збереження антигенної структури вірусу. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити вакцину інактивовану проти ротавірусної і коронавірусної інфекцій ВРХ, що містить виробничі штами рота- та коронавірусів шляхом використання, як виробничих штамів: ротавірусу"235" і коронавірусу-„ВС-1", що адаптовані до перещеплювальних культур клітин нирки теляти (НТ), трахеї теляти (ТрТ), або нирки вівці (НВ), сорбованих на гідроксиді алюмінію та інактивованих формаліном, щоб забезпечити ефективність вакцини „Рокоген" проти ротавірусної і коронавірусної Інфекцій ВРХ Вакцину готують із виробничих штамів ротата коронавірусів, що адаптовані до перещеплювальних культур клітин нирки теляти (НТ), трахеї теляти (ТрТ), або нирки вівці (НВ), сорбовані на гідроксиді алюмінію та інактивовані формаліном Склад вакцини: Ротавірус штам „235" 30% Коронавірус „ВС-1» 30% Гліцерин нейтральний 20% Гель гідроксиду алюмінію (6%) 10% Забуферений розчин нагрію фосфорнокислого 10% Формалін 0,05% 4494 Контроль вакцини проводять за наступними показниками: Приклад 1 Для перевірки якості вакцини проводили вибірку із різних місць кожної серії у кількості що визначена в формулі П - 0.4VN , де П - необхідна для контролю кількість упаковок (об'єм вибірки) N - кількість упаковок у серії Із вибірки відбирали 6 флаконів препарату методом випадкового відбору, 3 з яких використовували для проведення випробування, решту З флакони направляли в архів контролера ВБК для зберігання 18 місяців. Проби, які направляли в архів контролера, опечатували і супроводжували документом встановленої форми, де вказували: найменування препарату, дату виготовлення, номер серії, дату відбору проби, загальну кількість одиниць в упаковці, масу нетто, посаду й підпис особи, яка відбирала пробу, та позначення цих ТУ У, посаду, підпис особи, яка відбирала проби, на архівних зразках ставили штамп „Архів". В разі отримання незадовільних результатів випробувань хоча б по одному з показників, по ньому проводили повторні випробування на подвійній кількості зразків з цієї ж серії і на подвійній кількості тварин Результати повторних випробувань вважали кінцевими і поширювали на всю серію. В разі отримання незадовільних результатів повторних випробувань серію препарату вважали такою, що не відповідає вимогам ТУ У, її бракували і знищували. Приклад 2 Визначали зовнішній вигляд, колір, наявність сторонніх домішок, плісняви, порушення герметичності флаконів проводили візуально в пронизуючому світлі Вакцина являла собою рідину рожевого кольору, без сторонніх домішок і плісняви. Флакони з вакциною були ретельно укупорені, без тріщин Після цього визначали характер осаду перевертанням флаконів догори дном Осад захоплювався рідиною і після збовтування розбивався у гомогенну суміш. Приклад З Визначення контамінації бактериальною і грибковою мікрофлорою проводили згідно ГОСТ 28085-89 "Препарати біологічні. Методи бактеріологічного контролю стерильності". Для дослідження контамінації мікоплазм використовували три флакони з вакциною. Вакцину з кожного флакона об'єднували у одній стерильній ємкості й проводили посів по 0,5см 3 у З пробірки з напіврідким (0,3% агару) та густим (1,3% агару) середовищем Едварда, основою Комп'ютерна верстка Н Лисенко якого є триптичний перевар серцевого м'яза великої рогатої худоби з додаванням 10% дріжджового екстракту, 20% нормальної кінської сироватки (без консерванту) і 100 ОД пеніциліну з розрахунку на 1см3 середовища. Проводили три послідовні пасажі. Посіви витримували при (37-38)°С 7 діб. Вакцина не була контамінована бактеріальною, грибковою мікрофлорою і мікоплазмами. Приклад 4 Визначення нешкідливості. Для досліджень використовували 3 флакони 3 вакциною. їх об'єднували в одному стерильному флаконі, струшували і застосовували для досліджень, Вакцину вводили 10 білим мишам підшкірне по 0,2см . Вакцина не викликала захворювання та загибель мишей за 10 діб спостереження, що підтверджує її нешкідливість. Приклад 5 Визначення імуногенності Вакцину з 3-х флаконів об'єднували в одному стерильному флаконі й вводили внутрішньом'язево в стегно п'яти морським свинкам в дозі 2см 3 . Через 18 діб проводили повторне введення, а через 14 діб від них одержували сироватку крові. Проби сироватки крові в рівному співвідношенні об'єднували у одній ємкості й досліджували в реакції затримки гемаглютинації з 4 ГАО антигенів ротавірусу (штам "235") і коронавірусу (штам ВС-І) за загальноприйнятою методикою. Титр антитіл до ротавірусу й коронавірусу визначали по найбільшому розведенню сироватки, в якому спостерігається повна затримка аглютинації еритроцитів Вакцину вважали такою, що пройшла контроль, якщо в сироватці крові вакцинованих морських свинок, у РЗГА, виявлено антитіла до ротавірусу й коронавірусу в титрах не нижче 1:32. Вакцина з позитивним результатом пройшла МІЖВІДОМЧІ комісійні випробування в двох господарствах: 1, „Заповіт Леніна" Зачепилівського району, Харківської області, 2. д/г „Елітне" Харківського району, Харківської області Крім цього вакцину застосували більше ніж на Ютис голів великої рогатої худоби в різних областях України На основі отриманих даних можна зробити висновок, що вакцина відповідає вимогам ТУ У вакцина стерильна, нешкідлива та імуногенна Використання вакцини „Рокоген" в неблагополучних щодо рота- і корона вірусних інфекцій сприяє утворенню колострального імунітету та забезпечує збереженість телят від 95,7 до 97,6%. Підписне Тираж 37 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул Урицького, 45, м Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Глазунова, 1, м Київ - 42, 01601