Бівалентна інактивована концентрат-вакцина проти інфекційного ринотрахеїту та вірусної діареї великої рогатої худоби

Вакцина проти респіраторних вірусних захворювань, що містить компонент вірусу ІРТ, ад'ювант та інактиватор, яка відрізняється тим, що використовують штам "Молдавський" вірусу ІРТ, додають компонент вірусу діареї штам "ВК-1", використовують як ад'ювант масло ISA-70, а як інактиватор використовують формалін. Корисна модель, що передбачається, відноситься до ветеринарної медицини, зокрема вірусології, і може бути використана у виробництві вакцин на підприємствах біологічної промисловості, і призначена для боротьби й профілактики інфекційного ринотрахеїту та вірусної діареї великої рогатої'худоби (ВРХ). Збудники цих хвороб відіграють провідну роль в етіології респіраторних, шлунково-кишкових та генітальних захворювань ВРХ Вони спричиняють значні економічні збитки внаслідок загибелі, зниження продуктивності та приросту живої маси, порушення відтворю вальної функції у телиць, корів та бугаїв, бракування хворих тварин та витрат на організацію І здійснення ветеринарносанітарних заходів щодо локалізації та ліквідації цих захворювань Вірус Інфекційного ринотрахеїту (ІРТ) вражає респіраторну, генітальну і нервову системи, слизові оболонки та очне яблуко тварин. Вірус діареї (ВД) викликає пневмоентерити телят, аборти в корів у першій половині тільності, внутрішньоутробну інфекцію, що призводить до народження телят із вродженою виродливістю, слаборозвинених, які згодом будуть постійним джерелом інфекції. Для профілактики інфекційного ринотрахеїту і вірусної діареї відома бівалентна культуральна вірусвакцина проти инфекційного ринотрахеїту і вірусної діареї" великої рогатої худоби (Белявская Т.В Бивалентная вакцина прошв инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота: дис. канд. вет. наук. 16.00.03. - Минск, 1998. - 132 с.) Є вакцина "Тривзк (ВИЭВ)" для профілактики інфекційного ринотрахеїту, парагриппу-3 і вірусної діареї - хвороби слизових великої рогатої худоби (Патент RU №2111011, от 11.12.1996, кл. А61К39/295, А61К39/15). Відома також жива вакцина проти вірусної діареї - хвороби слизових великої рогатої худоби (AC SU №1538304). Недоліки цих вакцин полягають у тому, що вони виготовлені Із атенуйованих штамів вірусів (РТ та ВД, що може призводити до їхньої персистенції в організмі щеплених тварин, виникнення симптомів ураження респіраторного та шлункового тракту, абортів у тільних корів та створювати загрозу подальшого розповсюдження цих хвороб. Відомі також інактивовані вакцини для профілактики інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби (А.с SU №1566531, А.с SU №9803 07А), і вакцина інактивована проти вірусної діареї великої рогатої худоби (Вирусные болезни животных. В.Н. Сюрин, А Я Самуйленко, Б.В. Соловьев, Н.В Фомина - М.: ВНИТИБП, 1998) Ці вакцини інактивовані, але вони моновалентні і забезпечують утворення імунітету в тварин тільки до однієї інфекції, що потребує почергового проведення імунізації проти кожної інфекції окремо, подвійних трудовитрат і часу на формування імунітету проти двох інфекцій. Існує інактивована вакцина проти ІРТ - ("Способ изготовления инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота" Патент RU №2090210, от 20.09.1997, кл. А61К39/265, C12N5/06, ВНИИВВМ, СО см со 4626 г. Владимир) - це рішення є прототипом. Ця вакцина використовується для профілактики респіраторних захворювань (ІРТ), але неможливо використовувати проти вірусної діареї Відмінні особливості корисної моделі від прототипу: 1. Містить інший штам вірусу ІРТ (виділений в лабораторії вірусології ІЕКВМ). 2. Вакцина інактивовона концентрована проти ІРТ і ВД ВРХ містить додатково компонент вірусу діареї для захисту тварин від цієї хвороби З Вірус ІРТ накопичують у перещеплюваній культурі клітин нирки вівці (ПО-2), а не нирки теляти (МДБК) 4. Як ад'ювант - масло французької фірми Seppic ISA-70, на відміну від масла виробництва ВНДІЗЖ(м. Владімір) 5. Ад'ювант знаходиться у співвідношенні 7:3, на відміну від 1:1 у прототипі. 6. Як інактиватор використовується формалін, а не теотропін, що знижує собівартість вакцини. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити вакцину проти респіраторних вірусних захворювань, що містить компонент вірусу ІРТ, ад'ювант та Інактиватор, шляхом використання штаму "Молдавський" вірусу ІРТ, додавання компоненту вірусу діареї штам "ВК-1", використання як ад'юванту масла ISA-70, використання як інактиватору формаліну, щоб забезпечити ефективність бівалентної інактивованої концентрат-вакцини проти інфекційного ринотрахеїту та вірусної діареї великої рогатої худоби. Суть корисної моделі полягає в тому, що бівалентна інактивована концентрат-вакцина проти інфекційного ринотрахеїту та діареї великої рогатої худоби містить по 15% антигенів вірусу інфекційного ринотрахеїту штаму "Молдавський" з активністю 10' 9 0 ТЦДБО/СМ3 І вірусу діареї штаму "ВК-1" з інфекційною активністю 10 ТЦДбо/оЛ які концентровані на стадії репродукції в моношарових культурах перещеплюваних клітин нирки вівці (ПО-2) і коронарних судин теляти (КСТ), відповідно, інактивованих 0,05% формальдегідом при температурі 36-38° С впродовж 96-120 годин, та 70% масляно го ад юванта. Приклад 1. Виробничий штам "Молдавський" вірусу ІРТ культивують і накопичують у моношаровій культурі перещеплюваних клітин ПО-2, що вирощена в ролерних посудинах Культуру клітин заражають вірусовміщуючою суспензією з розрахунку 0,5-1 ТЦДбо/клітину, Інкубують при 37,0-37,2" С з щоденним контролем за розвитком цитопатичної дії (ЦПД). При ураженні 80-90% клітин моношару їх заморожують Як антиген для виготовлення вакцини використовують вірусовмішуючу культуральну рідину після дефростації, очистки від клітинного детриту центрифугуванням та перевірки на інфекційну активність. Виробничий штам "ВК-1" вірусу діареї культивують І накопичують у моношаровій культурі перещеплюваних клітин КСТ. Зараження культури клітин, збір і очистка вірусовміщуючої суспензії та виготовлення антигену здійснюють аналогічно, як і для вірусу ІРТ ВІрусовміщуюча біомаса кожного вірусу окремо інактивується 0,05% формальдегідом при 3638"С впродовж 96-120 годин. Після перевірки на повноту інактивації та стерильність беруть по 15% за об'ємом антигену вірусів інфекційного ринотрахеїту і діареї, змішують і додають 70% масла ISA-70, піддають емульгуванню до утворення молочно-рожевого кольору біомаси, фасують у флакони, після чого перевіряють на стерильність, небезпечність для тварин та імуногенну активність. Приклад 2. Випробування імуногенності запропонованої вакцини проти ІРТ та ВД здійснювали на лабораторних тваринах (морських свинках) живою вагою 350-400 грам Першу групу щепили в об'ємі 1 см 3 внутрішньом'язово дворазове з інтервалом 14 діб Другій групі вводили по 1 см 3 плацебо (контроль) Через 7, 21, 35 и 60 діб після першого щеплення у морських свинок відбирали кров, сироватку якої досліджували у реакції нейтралізації на наявність антитіл до вірусів ІРТ і ВД Результати оцінки імуногенності інактивованої вакцини представлені в таблиці. Таблиця Піддослідні групи 7 Діб Перша група (вакциновані) Друга група (контроль) Титри специфічних антитіл, Іорг До вірусу ІРТ До вірусу діареї 21 60 7 21 35 35 60 6,0 7,0 7,8 7,7 9,0 9,5 9,3 11,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 Бівалентна інактивована концентрат-вакцин а проти інфекційного ринотрахеїту та вірусної діареї Комп'ютерна верстка А Крулевский великої рогатої1 худоби є ефективною і призначена для боротьби й профілактики з цими інфекціями. Підписне Тираж 37 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул Урицького, 45, м Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул. Глазунова, 1, м Київ-42, 01601