Спосіб виділення яєць toxocara cati з фекалій котів

Спосіб виділення яєць Toxocara cati з фекалій котів, що включає застосування центрифужної флотації, який відрізняється тим, що виділення проводять шляхом центрифугування у флотаційному 40% розчині сульфату цинку, після чого отриману суспензію яєць очищують шляхом центрифугування у градієнтах густини 20% та 30% розчинів сахарози. (19) (21) u200910720 (22) 23.10.2009 (24) 26.04.2010 (46) 26.04.2010, Бюл.№ 8, 2010 р. (72) КОВБАСА ДАРИНА ВОЛОДИМИРІВНА, КУЦ НАТАЛІЯ ВАЛЕРІЇВНА, МАЗУРКЕВИЧ АНАТОЛІЙ ЙОСИПОВИЧ (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ БІОРЕСУРСІВ І ПРИРОДОКОРИСТУВАННЯ УКРАЇНИ 3 49255 Toxocara cati застосовують центрифугування їх у градієнтах густини 20% та 30% розчинів сахарози. Густина 40% розчину сульфату цинку ( =1240кг/м3) вища за густину насиченого розчину 3 кухонної солі ( =1180кг/м ). Застосування 40% розчину сульфату цинку збільшує концентрацію яєць гельмінтів у поверхневій плівці при флотації і таким чином сприяє збільшенню кількості виділених яєць Toxocara cati на 40%. Центрифугування отриманої суспензії яєць Toxocara cati у градієнтах густини 20% та 30% розчинів сахарози дозволяє розділити її на шари частинок різної густини і відокремити очищені таким чином яйця Toxocara cati від яєць інших видів гельмінтів, які мають іншу густину. Приклад. 2г фекалій котів із змішаною інвазією гельмінтів Тохосаrа саti та стронгілят суспендова 4 но у воді (1:50). Проведено 7 разове відмивання водою шляхом центрифугування при 1500об/хв протягом 1хв. Осад поділено порівну, одну половину ресуспендовано у 40% розчині натрію хлориду, другу у 40% розчині сульфату цинку. Отриману суспензію відцентрифуговано 5хв. при 1500об/хв. Яйця зібрані з поверхневої плівки в окремі пробірки. Вміст пробірок із суспензією фекалій перемішано та відцентрифуговано, яйця зібрані ще кілька разів (до зникнення яєць у поверхневій плівці). Отримані яйця відмиті водою 8 разів, суспендовані у 10мл води, підраховано кількість яєць та кількість частинок домішок у 0,02мл отриманої суспензії. Із таблиці видно, що застосування в якості флотаційного розчину 40% сульфату цинку дає можливість виділити на 40% більше яєць Тохосаrа саti із 1г фекалій. Таблиця Ефективність виділення з фекалій котів та очищення яєць Тохосаrа саti Вміст домішок частинок фекалій Вміст домішок частинок фекалій Кількість яєць та яєць стронгілідного типу в та яєць стронгілідного типу в Способи, які порівнюють- Тохосаrа саti, отриманій суспензії яєць Тохо- отриманій суспензії яєць Тохося тис, виділених з саrа саti до очищення в градієн- саrа саti після очищення в граді1г фекалій котів ті густини сахарози, частинок на єнті густини сахарози, частинок 1 яйце Тохосаrа саti на 1 яйце Тохосаrа саti Прототип 5,198 16,25 Запропонований спосіб 7,293 17,31 5,63 З метою подальшого очищення яєць після центрифугування у воді надосадову рідину видалили, під осад послідовно підшарували 20% (1081кг/м3) та 30% (1127кг/м3) розчини сахарози. Вміст відцентрифугували протягом 1хв. при 3000об/хв. Після центрифугування добре помітний шар яєць Тохосаrа саti на межі 20% та 30% розчинів сахарози, шар яєць стронгілідного типу над шаром 20% розчину сахарози та домішки частинок Комп’ютерна верстка М. Ломалова фекалій у різних шарах вмісту пробірки. Шар яєць Toxocara cati збирали за допомогою пастерівської піпетки в окрему пробірку, підраховували кількість яєць Toxocara cati та вміст домішок у суспензії. Запропонований спосіб дозволяє підвищити ефективність очищення виділеної із фекалій суспензії яєць Toxocara cati. Запропонований спосіб дозволяє також отримати чисту культуру Toxocara cati від тварин із змішаною інвазією гельмінтів. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601