Спосіб стимулювання антитілогенезу

1 Спосіб стимулювання антитілогенезу, що включає одноразове введення мишам імуности мулятора одночасно з антигеном, який відрізняється тим, що як імуностимулятор використовують гомогенат селезінки щурів, одержаної за період з 20 до 26 годин після введення їм іприту 2 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що гомогенат селезінки щурів вводять по 0,1 мл на 10 г маси тіла миші 3 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що масляний розчин іприту вводять одноразово підшкірно у дозі 7-15 мг/кг маси тіла щурів Винахід відноситься до галузі медицини, зокрема, до імунологи, а саме, до способів посилення антитілоутворення у імунізованих тварин і може бути використаний в медичній лабораторній практиці для одержання високоспецифічних сироваток, а також препаратів імуноглобулінів Відомий спосіб одержання стимулятора клітин-антитілопродуцентів із кісткового мозку тварин, а саме, свині (Авторське свід № 1005796, 1978г) При використанні цього способу спостерігається незначне посилення антитілоутворення при значній трудомісткості операцій по виділенню клітин кісткового мозку Найбільш близьким по технічній сутності та досягнутому ефекту до запропонованого винаходу є спосіб стимуляції гуморальної імунної ВІДПОВІДІ in vivo за допомогою кістко во-мозкового гомогенату, одержаного від оброблених іпрітом тварин (Авторське свід № 270154, 1988 г) Суттєвість способу полягає в тому, що в організм тварини, зокрема, миші одноразово внутрішньочеревинно вводять кістково-мозковий гомогенат та антиген Зазначений спосіб дозволяє істотно, майже в 2 рази, збільшити КІЛЬКІСТЬ специфічних антитіл у сироватці імунізованих тварин Проте, зазначений вище спосіб має недоліки - недостатню ефективність та складність при роботі з клітинами кісткового мозку (див кн Лимфоциты Методы /Под ред Дж Клауса, М Мир, 1990 - с 48-49) операції, повязані з отриманням імуностимулятора Ця задача вирішується тим, що у відомому способі, що включає одноразове введення мишам імуностимулятора одночасно з антигеном, згідно винаходу як імуностимулятор використовують гомогенат селезінки щурів, одержаної за період з 20 до 26 години після введення їм іприту При цьому гомогенат селезінки щурів вводять по 0,1 мл на 10г маси тіла миші Крім того, масляний розчин іприту вводять одноразово підшкірно у дозі 7 - 15мг/кг маси тіла щурів Операції, пов'язані з виділенням селезінки, прості, загальновідомі і доступні широкому колу експериментаторів Як показали практичні дослідження, гомогенат селезінки, одержаної від щурів менш ніж через 20 годин після обробки їх іпритом - неефективний, а через 26 годин неможливо отримати селезінку внаслідок загибелі тварин від іприту Введення щурам іприту в дозі 7 - 15мг/кг маси тіла відповідає необхідності збереження життєздатності щурів у певний проміжок часу (до 26 годин) при дії використаних летальних доз іприту (Дисс канд биол наук - Киев, КНИИФТ, -127 стр , инв №0187) Доза введення гомогенату селезінки мишам 0,1мл на 10г маси обрана у ВІДПОВІДНОСТІ ДО результатів, одержаних у вище наведеній дисертаційній роботі Завдяки тому, що у пропонованому способі Перед авторами постала задача удосконалити спосіб стимулювання антитілогенезу та полегшити 1 СО о Ю 51037 сывороточном деле Сбтр НИИ вакцин и сыворозгідно винаходу як агент, що посилює антитілоутток МЗ СССР М , 1975, 87 с) Тварин масою 15 ворення, використовують гомогенат селезінки щу17г імунізують антигеном - 40%-вою суспензією (у рів, спостерігається збільшення КІЛЬКОСТІ специфіфізіологічному розчині) тричі відмитих еритроцитів чних антитіл в сироватці крові мишей барана Для цього одноразово вводять внутришСпосіб здійснюють таким чином ньочеревинно 1,0мл зазначеної суспензії Через 1 - введення щурам іприту проводять підшкір- 2 хвилини цим же мишам аналогічно вводять по ним способом у діапазоні доз 7 - 15мг/кг маси тіла 0,2мл одержаного раніше гомогенату селезінки у масляному розчині, через 20 - 26 годин тварин На 7 добу після ін'єкції одержують сироватку крові декапітують та отримують селезінку загальновідомишей загальновідомим у медичній практиці спомим у медичній практиці способом (див Кн Лимсобом У сироватці визначають тітр специфічних фоциты Методы /Под ред Дж Клауса, М Мир, антитіл звичайним способом, використовуючи для 1990 - с 47) Селезінку подрібнюють та старанно цього 1%-ву суспензію нативних еритроцитів барозтирають у ступці, додаючи фізіологічний розрана (Дисс канд биол наук - Киев, КНИИФТ, 127 чин Одержаний гомогенат селезінки фільтрують стр , инв №0187) До гомогенату додають фізіологічний розчин в КІЛЬКОСТІ, необхідній, щоб концентрація білка склаПозитивний ефект запропонованого способу дала бОмг/мл , стимуляції антитілогенезу у мишей за допомогою гомогенату селезінки щурів, оброблених іпритом, - імунізують білих мишей антигеном (еритропідтверджується даними, наведеними в таблиці цитами барана) (Адъюванты в вакцинноТаблиця КІЛЬКІСТЬ антитіл* 1 у сироватці крові мишей, імунізованих еритроцитами барана (п = 7) Відомий спосіб (прототип), М ± т**' 4,52 ± 0,23 Запропонований спосіб, М ± т 6,31 ±0,47 * - тітр специфічних антитіл виражають у -Іодг Т, де Т - найбільше розведення сироватки, при якому спостерігається аглютинація еритроцитів барана **' - М - середнє арифметичне значення всіх показників, отриманих у кожній групі тварин - m - стандартна помилка результату, отриманого для кожної групи тварин Введення білим мишам гомогенату такої селезінки одночасно з антигеном призводить до нового позитивного ефекту - істотному збільшенню КІЛЬКОСТІ специфічних антитіл у сироватці крові - в 1,4 рази ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71