Інгібітор тимідинкіназної активності вірусу герпесу

Застосування 3-(І\І-бензил)амінокарбоніл-1метилпіридиній йодиду або 4-(ІЧ-бензил)аміно карбоніл-1-метилпіридиній йодиду як шпбітора тимідинкіназної активності вірусу герпесу Винахід належить до області медицини і біологи, конкретно-вірусологм і молекулярної біологи, і може бути використаний для створення антивірусних препаратів і для наукових досліджень ВІДОМІ ДВІ родини ХІМІЧНИХ препаратів - селективні інгібітори тимідинкіназної (ТК) активності вірусу герпесу, які можуть бути використані при лікуванні активації герпетичної інфекції До першої родини належать аналоги N -(m-tnfluromethylphenyl) guamm (mCFsPG), які гальмують репродукцію вірусу завдяки взаємодії гідрофобних електронегативних мета-структур До другої родини належать нуклеозиди, які не є субстратними аналогами N phenyl-2'-deoxyguanosine (PhdG), з лужною, пдроксилужною і "ацикло-глікозильною" групами у 9 позиції, у МІСЦІ гліколірування групи PhdG, залишаються значні варіабельні можливості проти ТК вирусу герпесу [1] готовлення препаратів на підставі піридинкарбонових кислот Для цього використовують ІС-3 - аналог нікотинової кислоти (і-метил-З-(М-бензил) карбамідопириніт йодид та ІС-9 - бензиламід ІЗОНІКОТИНОВОІ кислоти - 1-метилі-(І\І-бензил) - амізон Відомо, ЩО амізон застосовується як ненаркотичний аналгетик, протизапальний препарат з штерфероніндуктивною дією, а препарат ІС-3 має антитоксичну дію Застосування цих препаратів як інгібіторів ТК-активності вірусу герпесу в літературі не згадується Завдання винаходу - знайти такий засіб такого засобу, який гальмував би ТК-активність вірусу герпесу Приклад 1 - Визначення гальмівної дії препаратів ІС-3 та ІС-9 на ТК-активність Готуємо розчини препаратів ІС-3 та ІС-9 в розведеннях 0, 1,5, 10, 20, 40мкг/мл и проводимо тестування на ТК-активність in vitro ТК-активність визначали за модифікованим методом [3] До складу реакційної суміші входили 22,5Сі/цмоль 14 С-тимідину, 0,64цмоль АТФ,0,8цмоль МдСЬ, 0,1цмоль дитютрептолу, 43цмоль трис-НСІ, рН8,0 та ферментний препарат тимідинкінази або лізат заражених вірусом герпесу клітин від 2 до 40|jkl Джерело кінази - клітини мозку мишей в суміші 0.25М сахарози, 0,01 М МдСІ2 , 0,01 М трис - НСІ, рН7,4, 0.004М Na- сукцинату руйнували гомогенізацію, а над осадову рідину використовували як джерело кінази Порції з кіндзою суспензією інкубували при 37°С Кожен зразок наносили на розді Інгібітори ТК-активності вірусу герпесу енантіомери Racemic (±)-9-{[(Z)-2(hydroxymethyl)cyclohexyl]-methyl}guanine[l_653,180] ефективно гальмують спонтанну активацію латентної герпесвірусної інфекції в експерименті на тваринах Така ж активність притаманна ПОХІДНИМІ тимідину - 5'етилтимідин, Ro 32-1520, Ro-33-13, високоселективні інгібітори вірусної, але не клітинної ТК-активності [2] Запропоновані препарати ПОХІДНІ піридинкарбонових кислот, специфічна дія яких направлена на шпбіцію ТК-активності вірусу герпесу, на підставі яких можуть бути створені ефективні противірусні препарати проти вірусів групи герпесу Поставлені завдання вирішуються шляхом ви О о о (О З 62004 4 ляючий ДЕАЕ-фільтр Один з фільтрів піддавали тестували на сцинцилляційному лічильнику Веск14 ДВІЧІ етанольний екстракції, в той час як другий man LS-8000 Процент перетвореного Сзалишали необробленим Фільтри висушували і тримідину розраховували за формулою КІЛЬКІСТЬ імп/хв -(обробленого етанолом фільтра) КІЛЬКІСТЬ імп/хв -(не обробленого етанолом фільтра) + 100 Перерахунок фосфорильного тимідину в мм /год проводили враховуючи первинну КІЛЬКІСТЬ внесеного нуклеозидмонофосфату Результати проведених досліджень наведено в таблиці Таблиця Інгібуюча дія препаратів ІС-Зта ІС-9 на ТК-активність % тимідинкіназної активності Концентрація (мкг/мл) 1 5 10 20 40 100 65 60 51 ЗО 15 100 77 61 44 8 8 Назва препарату 0 ІС-3-(1 -метил-3-(І\І-бензил) карбамідопириніт йодит ІС-9-бензиламід-ізонікотинокмслоти-1 -метил-4-(І\І-бензил) Із наведених вище даних видно, що ТКактивність вірусу герпесу найефективніше гальмувалась препаратом ІС-9 (амізон) - до 8 % залишкової активності в дозі 20 мкг/мл и достатньо активно - ІС-3 -15% залишкової активності в дозі 40 мкг/мл Література 1 G Wright, HXu, G Maga, J Gambmo et al Inhibitors of Herpes Simplex VirusThimidme Kinases Комп'ютерна верстка С Волобуев Antiviral Research, 20S (1), 1993, P 181 2 D J Von Langen, J D Karkas, R Bostedor et al Herpes Thymidine Kmase Inhibitors Resolution and Enantioselective Synthesis of L-653,180 and Watersoluble Producns Antiviral Research, 26, N 3, 1985, P151 3 F Furlong A rapid assay for nucleotidt kinases using I4C and H nucleotides Ann Biochem , 1986, N5, P 515-522 Підписано до друку 06 10 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна