Спосіб моделювання гострого токсичного гепатиту

Спосіб моделювання гострого токсичного гепатиту, який характеризується тим, що щурам протягом 5 днів, 1 раз на день, здійснюють внутрішньочеревинне введення 0,2 % розчину флуканазолу у дозі 3 мг/кг ваги. (19) (21) u201105504 (22) 29.04.2011 (24) 12.09.2011 (46) 12.09.2011, Бюл.№ 17, 2011 р. (72) СЕРВЕЦЬКИЙ КОСТЯНТИН ЛЕОНІДОВИЧ, ГОДОВАН ВЛАДЛЕНА ВОЛОДИМИРІВНА, ЧАБАН ТЕТЯНА ВОЛОДИМИРІВНА, ОЛІЙНИК НІНА МИКОЛАЇВНА, СОЛТИК СЕРГІЙ МИХАЙЛОВИЧ, ТИМЧИШИН ОЛЕГ ЛЬВОВИЧ 3 Курс лікування флуконазолом достатньо тривалий. Так, при кандидозі шкіри він складає 2-6 тижнів, при кандидурії, кандидозному езофагіті, бронхолегеневому кандидозі - 14-30 днів. Найбільш тривалий період застосування препарату при оніхомікозі пальців рук - 3-6 місяців і при ураженні нігтів пальців ніг - 6-12 місяців, до заміщення інфікованого нігтя. Відомо, що лікування флуконазолом може супроводжуватися такими небажаними ефектами з боку травної системи як порушення апетиту, біль в животі, метеоризм, нудота, блювота, діарея, закріп, підвищення активності амінотрансфераз і лужної фосфатази, гіпербілірубінемія, холестаз. Однак, до теперішнього часу нема даних щодо утворення гострого флуконазолового гепатиту. Авторами у доступних джерелах інформації не знайдено даних щодо розробленого способу моделювання гострого токсичного гепатиту спричиненого використанням флуконазолу. В основу корисної моделі поставлена задача розробки способу моделювання гострого гепатиту шляхом використання флуконазолу, за рахунок чого створюються умови, які дозволять, отримати модель гострого токсичного гепатиту, близьку до клінічних ознак токсичного або вірусного характеру гепатиту, що дозволить розробити адекватні, ефективні патогенетичні засоби для лікування хворих на токсичні й вірусні гепатити, які будуть сприяти більш ранньому початку лікування, зменшенню відсотку розвитку хронічних форм і подальшого прогресування хвороби. Поставлена задача вирішується тим, що в способі моделювання гострого гепатиту, відповідно до корисної моделі, щурам протягом 5 днів, 1 раз на день, здійснюють внутрішньочеревинне введення 0,2 % розчину флуканазолу у дозі 3 мг/кг ваги. Причинно-наслідкові зв'язки: Введення флуконазолу: - за рахунок гепатотоксичного ефекту вказаної речовини відбуваються дистрофічні, некротичні і дисциркуляторни зміни в печінці; - усі тварини залишилися живими протягом експерименту, що свідчить про в'ялі зміни, які можна діагностувати тільки за допомогою біохімічного або морфологічного дослідження, і підтверджує розвиток гострого токсичного гепатиту. Опис способу. Експериментальні дослідження були проведені на 60 статевозрілих щурах - самцях масою 180200 грамів, які утримувались у стандартних умовах віварію. Для отримання моделі гострого токсичного гепатиту щурам основної групи (30 щурів) протягом 5 днів, 1 раз на день здійснювали введення 0,2 % розчину флуканазолу у дозі 3 мг/кг ваги. Після введення флуконазолу тварин брали до експе Комп’ютерна верстка І. Скворцова 62815 4 рименту через 24,48 і 120 годин. Об'єктом досліджень була печінка тварин. Були отримані наступні дані. Морфологічне дослідження печінки проведено на 60 (30 - інтактна група, 30 - основна група) щурах. Після забою тварин вилучалася печінка й фіксувалася у 10 % нейтральному формаліні. Після заливки у парафін виготовлялись гістологічні зрізи, які забарвлювалися гематоксиліном і еозином, а також за ван Гізон. PAS - позитивні речовини визначались за допомогою ШІК - реакції за Шабадаш. Жири виявлялись на заморожених зрізах, пофарбованих Суданом III. Результати мікроскопічних досліджень печінки інтактних щурів довели наступне: чітко визначалася часточкова будова, центральні вени помірно повнокровні, від них радіально розходяться печінкові пластинки, які складаються із парно розташованих гепатоцитів, на периферії дольок знаходяться печінкові тріади, що складаються з міжчасточкової артерії, венули і жовчного протока, тріади оточені ніжними волокнами сполучної тканини з одиничними лімфоцитами, гепатоцити полігональної форми з оксифільною дрібнозернистою цитоплазмою, в центральних відділах дольок цитоплазма гепатоцитів світліша, прозора, в периферичних відділах, рядом з тріадами, печінкові клітини мають декілька менші розміри, цитоплазма щільніша, базофільна і зерниста, глибчасті PAS позитивні речовини у вигляді гранул малинового кольору визначаються в цитоплазмі гепатоцитів у всіх відділах часточки, знаходяться перинуклеарно або маргінально, ядра гепатоцитів сферичної форми, переважно однакового розміру, знаходяться в клітинах центрально, синусоїди не розширені, перисинусоїдальні простори не визначаються, ліпіди визначаються в цитоплазмі одиночних гепатоцитів, розташованих у периферичних відділах печінкових дольок, у вигляді пилоподібних дрібних крапельок. Після 5-денного введення флуконазолу відмічається порушення балочної будови печінкової часточки, поліморфізм гепатоцитів і виражене повнокров'я центральних вен, міжбалочних синусоїдів. У гепатоцитах центральних і периферичних відділів часточок зустрічається паренхіматозна гідропічна, місцями балона дистрофія, в окремих ділянках спостерігається дискомплексація печінкових балок у вигляді порушення радіальної будови печінкових пластинок. Таким чином, п'ятиденне введення фуконазолу характеризується вираженими порушеннями гемодинаміки, дистрофічними змінами гепатоцитів і вогнищевими некротичними процесами, що свідчить про гепатотоксичний ефект вказаної речовини і дозволяє отримати модель гострого токсичного гепатиту, близьку до клінічних ознак ураження печінки при токсичному або вірусному характері гепатиту. Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601