Спосіб лікування експериментальної діабетичної полінейропатії

Винахід відноситься до галузі медицини, а саме до ендокринології, хірургії та неврології, і може бути застосований у практичній охороні здоров'я для лікування такого різновиду пізніх ускладнень цукровою діабету, як периферичної діабетичної полінейропатії. Цукровий діабет - хронічне метаболічне захворювання, яке характеризується зрушенням метаболізму глюкози завдяки абсолютній чи відносній недостатності інсуліну. Відомі способи лікування діабетичної полінейропатії шляхом застосування інсулінотерапії, а також вживання пероральних цукрознижуючих препаратів [1,2], що дозволяє досягти нормоглікемії. Але зниження швидкості проведення нервового імпульсу у пацієнтів з гарними показниками глікемічного контроля не є єдиним фактором розвитку діабетичної полінейропатії. Ось чому досягнення нормоглікемії не завжди надає належного ефекту за умов лікування діабетичної полінейропатії. Найбільш близьким до запропонованого є спосіб лікування діабетичної нолінейропатії через застосування нових лікарських форм вітамінів групи В. які називаються "нейротропними" вітамінами через їх специфічний вплив на функцію нервової системи [3]. Так, препарат Мільгамма добре зарекомендував себе при терапії діабетичної полінейропатії: відмічається його позитивний вплив на вібраційну чутливість, показники електронепроміографії та зменшення виразності больового синдрому. Але негативною стороною застосування даного засобу лікування діабетичної нолінейропатії є можливість розвитку алергічних реакцій у осіб з алергією в анамнезі на препарати вітамінів групи В. В основу винаходу поставлено задачу вдосконалення способу лікування діабетичної полінейропатії за рахунок застосування препаратів, які блокують активність ключового ферменту синтезу окису азоту - NO-синтази, що дозволить підвищити ефективність вказаного ускладнення цукровою діабету та запобігти його прогресуванню й розвитку якнайменше синдрому стопи діабетика. Поставлена задача вирішується тим, що , згідно винаходу, щурам із стрептозотоцин-індукованим цукровим діабетом одноразово внутрішньоочеревинно вводять 50 мг/кг цілостазолу, механізм дії якою полягає у блокуванні активності NO-синтази. Суть винаходу полягає у блокуванні активності ендогенного окису азота за умов цукрового діабету. Відомо, що майже 10 років тому окис азоту (NО) британським журналом "Science" було оголошено "молекулою року. Останнім часом було встановлено, що найпростіша речовина -NO -безперервно синтезується ферментативним шляхом в організмі людини та тварин, виконуючи при цьому функцію одного з універсальних регуляторів метаболізму. Окрім регуляції фізіологічних функцій організму - регуляції тонусу судин в якості адреноблокатора, гальмування агрегації тромбоцитів та їх адгезії на стінках судин, регуляції синаптичної передачі нервовою імпульсу, активації та/або пригнічення активності багатьох білків та ферментів, та ін. - відомого є роль NО у опосередкуванні гострих запальних реакцій. Показана продукція NО активованими макрофагами. Доведено, що цитостатичні та цитотоксичні ефекти макрофагів за умов запалення здійснюються через NО - шляхом активації NO-синтази, котра перетворює аргінін у NО. Синтезований окис азоту за умов гострого запалення сприяє розвитку вазодилятації (частіше всього локальної), локальному ураженню паренхіми органу, який підпадає під запалення, та його послідуючу і шемію. Зазначені ефекти NО сприяють розвитку гострого запальною ураження паренхіми підшлункової залози, - такий ланцюговий процес передує розвитку цукрового діабету. Спосіб здійснюється таким чином. Експериментальні дослідження проводили за умов хронічного експерименту на 35 щура х-самцях лінії Вістар, котрих годували стандартною дієтою. Щурам був забезпечений вільний доступ до їжі та води, їх містили у стандартних умовах із 12-год. зміною світла та темряви. Експериментальний цукровий діабет (ЕЦЦ) моделювали через внутрішньоочеревинне застосування стрептозотоцину (СТЗ; 60мг/кг; 'Serva’ Німеччина; препарат готували у розчині натрієвого цитратного буферу, рН=4.5), котрий індукує селективну загибель b -клітин підшлункової залози. Формування ЕЦЦ перевіряли на 2-у добу після введення СТЗ через визначення вмісту глюкози в крові щурів, отриманій з хвостової вени, за допомогою стріп-смуги ('One Touch', Німеччина). До послідуючих дослідів обиралися лише ті щури, концентрація глюкози в крові котрих перевищувала 15ммоль/л. Щурів досліджували 6 тижнів без лікування, - цей термін є достатнім для формування експериментальної діабетичної периферичної полінейронатії (ЕДИН), - після чого починали лікування. Щурам із ЕДИН внутрішньоочеревинно дозою 50 мг/кг уводили інгібітор NO-синтази цілостазол. Виділяли таки дослідні групи: 1) контрольна група (n=11), щурам котрої вводили розчин натрієвого цитратного буферу (рН=4.5); 2) щури з ЕДПН (n=9), котрих не лікували; 3) щури з ЕДПН, котрим вводили цілостазол дозою 50мг/кг (n=15). У щурів із ЕДПН визначали маси тіла, вміст глюкози в крові та вимірювали швидкість проведення збудження по хвостовому нерву. Усі визначення проводили на 3-ю та 6-у доби кожного тижня лікування (тобто впродовж 7-10 тижнів дослідів). За нормалізацією досліджуваних показників висловлювали про ефективність застосування лікувальних заходів. Завдяки введення інгібітору NO-синтази-цілостазолу - відзначалася нормалізація швидкості проведення збудження по хвостовому нерву щурів. Приклад конкретною застосування способу. У щурів-самців лінії Вісіар експериментальний цукровий діабет відтворювали через введення стрентозотоцину (60мг/кг, в/очер.). На другу добу після введення стрентозотоцину концентрація в крові глюкози зросла втричі стосовно попереднього показника, а також даних контрольних спостережень. Впродовж шести тижней у щурів дослідної групи тривало зниження швидкості проведення збудження по хвостовому нерву. Після введення цілостазолу дозою 50мг/кг досліджуваний показник став статистичне аналогічний такому, що його вимірювали у щурів у контрольних спостереженнях. У порівнянні з прототипом, запропонований спосіб лікування експериментальної діабетичної полінейропатії є легше відтворюваним та надає можливість специфічно лікувати діабетичну полінейропатію через зменшення активності системи ендогенного окису азоту, що, в свою чергу, враховуючи його патогенетичне значення за умов цукрового діабету, дозволить покращити лікування вказаного контингенту хвори х. Запропонований спосіб лікування діабетичної полінейропатії є надійним та більш ефективним способом лікування діабетичної полінейропатії в експерименті, що є експериментальним підґрунтям перспективної можливості клінічного застосування з лікувальною метою при цукровому діабеті фармакологічних сполук, які блокують активність системи ендогенного окису азоту. Література 1. DCCT Research Group. The effect of intensive treatment of diabetes on the development and progression of long-term complications in insulin-dependent diabetes mellitus //N. Engl. J. Med. -1993. -Vol.329. -P.977-986. 2. UK P5rospective Diabetes Study Group. Intensive blood glucose control with sulphonylureas or insulin compared with conventional treatment and risk of complications in patients with type 2 diabetes // Lancet. -1998. -Vol.253. -P.837853. 3. Гурьева И.В., Мамонтова Е.Ю. Оценка клинической эффективности препарата Мильгамма в терапии диабетической нейропатии // Тез. докл. I Российского диабетологического конгресса. -М., 1988. -С.103.