Асоційована вакцина проти інфекційного ринотрахеїту та вірусної діареї

Асоційована вакцина проти інфекційного ринотрахеїту та вірусної' діареї, що містить віруси ІРТ та ВД, інактиватор та ад'ювант, яка відрізняється тим, що використовують суміш суспензій інактивованих вірусів штам "IPT-LG" та штам "ВД-М", а як ад'ювант використовують масло вакцинне синтетичне (типу МагсоІ 52 або МИ), як інактиватор - уротропін та ще додають емульгатор 139, при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: суміш суспензій інактивованих вірусів штам "IPT-LG" та штам "ВДМ" 33,3-50,0 уротропін 0,5-0,1 масло вакцинне синтетичне (типу МагсоІ 52 або МИ) . 33,3-50,0 емульгатор 139 2,0-3,0. Корисна модель належить до галузі ветеринарної біотехнології, зокрема, до засобів профілактики хвороб інфекційного ринотрахеїту (ІРТ) та вірусної діареї (ВД). Для профілактики хвороб ІРТ та ВД використовують живі та інактивовані вакцини. Відомі сучасні вакцинні препарати з використанням інактавованих вірусів [Патент RU №2059415 от 11.12.1992, кл. А61К39/265 "Инактивированная вакцина против ИРТ КРС"], [Заявка №93056756 от 21.12.1993, кл. А61К39/265 "Способ изготовления инактивированной культуральной вакцины против ИРТ КРС"], але вони не придатні для щеплення дрібними дозами (0,1-0,2мл). Крім того, при одноразовому застосуванні, через вади рецептури та способи використання, вони не дозволяють захищати телят від ІРТ та ВД на весь період відгодівлі. Відома також вакцина "Бівалентнаінактивована-концентрат вакцина проти Інфекційного ринотрахеїту" Заявка №20040705252 від 01.07 2004, кл. А61К39/00, це рішення може бути прототипом. Недоліком цього рішення є те, що вакцина, не розрахована на введення препарату за допомогою безтолкових інжекторів, як за діапазоном в'язкості вакцинної емульсії, так і щодо дози вакцинного препарату Вакцинну емульсію з в'язкістю більш ніж 60см 3 , як і адсорбований на гідроокисі алюмінію вакцинний препарат, неможливо ввести за допомогою стандартного безтолкового ін'єктору (марки "Шмель", "Овод", "БИ-7" та інші). Використання останнього, як відомо, у декілька разів збільшує продуктивність праці при вакцинації, знижує собівартість протиепізоотичних заходів, збільшує "їх надійність і, головне, виключає поширення збудників різних інфекційних хвороб при масовій імунізації телят (ВРХ). У відомих вакцинних препаратів питома концентрація протективних антигенів не дозволяє використовувати вакцини у дозах менш як 1,02,0см3. Але такий об'єм вакцини неможливо ввести внутрішньошкірно стандартним безголковим ін'єктором. В основу корисної моделі поставлена задача розробити асоційовану вакцину проти ІРТ та ВД, що містить компоненти: віруси ІРТ та ВД інактиватор, ад'ювант, шляхом використання суміші суспензій інактивованих вірусів штаму "IPTLG" та штаму "ВД-М", як ад'юванту - масла вакцинного синтетичного (типу МагсоІ 52 або МИ), як інактиватору - уротропіну та ще додавання емульгатору 139, з інтрадермальяим введенням, при слідуючому співвідношенні компонентів, мас о/ . /о. Суміш суспензій інактизованих вірусів штам "IPT-LG" та штам "ВД-М1 33,3-50,0 CM ю 7152 Уротропін 0,5-1,0 Масло вакцинне синтетичне (типу МагсоІ 52 або МИ) 33,3-50,0 Емульгатор 139 2,0-3,0, щоб забезпечити створення асоційованої вакцини проти інфекційного ринотрахеїту та вірусної діареї Суттєвою відмінністю корисної моделі є використання концетрованого препарату сировини збудників хвороби ІРТ та хвороби ВД, та введення препарату інтрадермально. За даними параметрами рішення, що заявляється, відповідає критерію "суттєві ознаки". Приклад 1. 2-х добову культуру клітин НТ або ТТр у 1,5 літрових матрасах заражали вірусом ІРТ штам "ІРТ LG" з множинністю 0,1 ТЦДаз/клітина та інкубували при 37°С протягом 24-30 годин до проявлення ознак цитопатичної дії вірусу. Культуральну рідину зливали і в матраци додавали 7-10см3 води дистильованої стерильної (осматичний шок для руйнування клітин моношару і звільнення вірусних антигенів, одночасно їх 25 разове концентрували за об'ємом). Потім матраци заморожували при - 20°С. Після розморожування вміст матраців зливали в ємкість відповідного обсягу, відбирали зразок для визначення Інфекційної активності, додавали до кожних Юдм 3 сировини, з активністю не менш 10т'° ТЦД5о/мг, 50г. уротропіну, розчиняючи його шляхом ретельного перемішування та Інкубувапи при 37°С 48 годин. Приклад 2. Аналогічно готували вірусовміщуючу сировину хвороби ВД штам "BD-M". Вірусовміщуючу Комп'ютерна верстка А. Рябко сировину концентрували у 25 разів та інактивували уротропіном, як зазначено вище. Змішували в стерильному реакторі по 20дм концентрованих вірусовміщуючих суспензій штамів "IRT-LG" та " BD-M", додавали ад'ювант стерилізований автоклавуванням протягом однієї години при 1,5атм., який складається з 38л масла вакцинного синтетичного МИ, та 2л емульгатору 139 Перемішували протягом 24 годин при 200об/хв., змішували у реакторі, пропускаючи вакцинну суміш через колоїдний млин та фасували в ампули чи флакони по 10-25 внутрішньошкірних доз (об'єм однієї дози - 0,4мп3). Серологічне дослідження проб сироваток крові телят імунізованих одноразово, вказує на наявність віруснейтралізуючих антитіл у титрах 1:64 - 1:128 до вірусу хвороби ІРТ та до вірусу хвороби ВД через 2 місяці після щеплення, тоді як титри сироваток крові цих же телят до щеплення щодо вірусу ІРТ, не перевищують 1:2, а до вірусу ВД-1:4 Отримані результати лабораторних та клінічних дослідів свідчать, що асоційована вакцина інтрадермального застосування проти ІРТ та ВД ВРХ заявленого складу, дозволяє при застосуванні один раз на рік досягати 100%-го захисту щепленого поголів'я ВРХ протягом усього циклу вирощування тварин. Вакцина забезпечує імунологічний захист тварин проти найбільш важливих на теперішній час збудників інфекцій, а також підвищення рентабельності вакцинного препарату, як на етапі його виробництва, так і на етапі його застосування. Підписне Тираж 28 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності', вул. Глазунова, 1, м. Київ - 4 2 , 01601