Асоційована вакцина інтрадермального застосування проти тешенської хвороби та псевдосказу свиней

Передбачуваний винахід належить до галузі ветеринарної біотехнології, зокрема до засобів профілактики хвороб Тешена і Ауєскі. Для профілактики хвороб Тешена (XT) та Ауєскі (ХА) використовують живі та інактивовані вакцини. Живі вакцини проти XT готують, наприклад, з культурального ентеровірусу штаму ”Перечинський-471” [1], а проти ХА з культурального герпесвірусу свиней штаму ”БУК-628” [2], які є непатогеними для свиней, створюють у свиней імунітет відповідно проти XT та ХА, їх можна застосовувати для інтрадермального введення. Проте, в сучасних епізоотичних умовах ці препарати не ефективні, бо штам ”Переченський-471” імунологічне не відповідає актуальним епізоотичним варіантам збудника, а для профілактики ХА в Євросоюзі та в Україні заборонено використовувати не марковані вірус-вакцини. Інактивовані препарати раніше готували з тканин центральної нервової системи хворих свиней [3], або і використанням культуральної віральної суспензії з додаванням різних ад'ювантів [4]. Відомі сучасні вакцинні препарати з використанням інактивованих вірусів XT [5] та ХА [6]. Проте, по-перше, вони є моновакцинами, а подруге, - не придатні для інтрадермального щеплення. Крім того, при одноразовому застосуванні через вади рецептури та способи використання вони не дозволяють захищати свинопоголів'я від XT та ХА на весь період відгодівлі. Відома бівалентна вакцина проти хвороби Тешена інактивована культуральна олійна [7], що може слугувати прототипом передбачуваного винаходу. При її виготовленні використовують епізоотичне актуальний штам ”Навля-96” збудника XT і штам ”Закарпатський”, який є актуальним лише на дуже обмеженій території нозоареалу XT. Ці віруси вирощують в одношаровій культурі перещеплюваних клітин тестикул свині (ПТП). Вірусутримуючі культуральні суспензії двох антигенне різних штамів вірусу XT - ”Закарпатський” та ”Навля-96” з вихідною активністю не нижче 107,0 ТЦД50/мл інактивують теотропіном (кінцева концентрація 0,06-0,08%) та емульгують у олійному ад'юванті, в складі якого є емульгатор для вакцин 139 (кінцева концентрація 0,5-4%). Вакцина є емульсією типу ”вода-в-олії” з кінематичною в'язкістю від 6-15спз до 56-96спз, що залежить від співвідношення олійного ад'юванту та інактивованої вірусної сировини. Позитивний ефект зазначеного вакцинного препарату досягається наступним співвідношенням компонентів, мас. %: Суспензія інактивованого вірусу ” Закарпатський ” 12,5-35,0 Суспензія інактивованого віруса ” Навля-96” 12,5-35,0 Теотропін 0,06-0,08 Олія вакцинна синтетична (типу Маrсоl 52 або МЦ) 33,3-50,0 Емульгатор 139 (ТУ 6-02-0111213942-99) 0,5-4,0 Відома також вакцина інактивована проти хвороби Ауєскі [6], для приготування якої застосовується культуральна суспензія інактивованого збудника, а в якості ад'юванту - біла сажа (аеросил) або гидроокис алюмінію. Але прототипні способи та препарати мають низку недоліків. Дані препарати не розраховані на внутрішньошкірне введення за допомогою безголкових ін'єкторів, як за діапазоном в'язкості вакцинної емульсії, так і щодо дози вакцинного препарату; крім того, їх специфічність поширюється лише на одне захворювання, що обмежує його споживчу цінність. Проблема складається в тому, що вакцинну емульсію з в'язкістю більш ніж 60спз, як і адсорбований на аеросилі або гідроокису алюмінію вакциний препарат неможливо ввести внутрішньошкірно за допомогою стандартного безтолкового ін'єктору (марки ”Шмель”, ”Овод”, ”БИ-7” та інші). Використання останнього, як відомо, у декілька разів збільшує продуктивність праці при вакцинації, знижує собівартість протиепізоотичних заходів, збільшує їх надійність і, головне, виключає ятрогенне поширення збудників різних інфекційних хвороб при масовій імунізації свиней. Інша проблема полягає в тому, що у відомих вакцинних препаратів питома концентрація протективних антигенів не дозволяє використовувати прототипні вакцини у дозах менш, як 1,0-2,0см3. Але такий об'єм вакцини неможливо ввести внутришньошкірно стандартним безтолковим ін'єктором. Усі відомі вакцинні препарати є моноспецифічними, тобто застосовуються лише для тешенської хвороби (ентеровірусного енцефаломіеліта свиней), або хвороби Ауєскі. Тому для їх застосування в епізоотичному вогнищі необхідно проводити точну диференційну діагностику цих захворювань, а в загрозливих зонах застосовувати ці вакцини роздільно. Це збільшує собівартість протиепізоотичних заходів та розтягує термін їх проведення. Завданням передбачуваного винаходу є створення високорентабельного асоційованого вакцинного препарату проти хвороб Тешена та Ауєскі для масового щеплення свиней, який би забезпечував при внутрішньошкірному застосування за допомогою стандартних безтолкових ін'єкторів їх імунологічний захист проти найбільш важливих наразі збудників нейроінфекцій. Додатковою метою є підвищення рентабельності вакцинного препарату, як на етапі його виробництва, так й на етапі його застосування. Вказана задача досягається тим, що асоційована вакцина інтрадермального застосування проти Вешенської хвороби та псевдо сказу свиней, включаючи ін активовану за інфекційністю віральну суспензію змішану з олійним ад’ювантом, згідно винаходу, містить концентровані в 20-25 разів антигени збудників хвороб Тешена та Ауєскі, уротропін, та рівну кількість ад’юванту з синтетичних олії та емульгатору в наступних співвідношеннях мас. %: Суміш суспензій інактивованих вірусів хвороб Ауєскі і Тешена 33,3-50,0 Уротропін 0,5-1,0 Олія вакцинна синтетична (типу 33,3-50,0 Маrсоl 52 або МЦ) Емульгатор типу 139 за ТУ 6-02011-1213942-99 2,0-3,0 Суттєвою відмінністю передбачуваного винаходу є використання концентрованого препарату віральної сировини збудників хвороби Ауєскі та хвороби Тешена. Другою суттєвою ознакою винаходу є застосування у якості інактіванту уротропіну згідно заявки на винахід №2002097491 від 01.11.02 [8]. При цьому уротропін використовується в концентрації, що дозволяє надійно інактивувати інфекційну активність вірусів хвороб Ауєскі та Тешена і одночасно не погіршити їх антігенну активність. Третьою відмінністю передбачуваного винаходу є застосування емульгатору 139 (ТУ 6-02-011-1213942-99) у об'ємі 2,0-3,0% від загального об'єму цільового продукту; при цьому співвідношення об'ємів антігенвміщуючої сировини:ад'ювант=1:1. Зменшення кількісного вмісту емульгатору (