Способи лікування патологічних станів, пов’язаних з волоссям

Реферат: Винахід стосується способів лікування порушень, пов'язаних з волоссям, стимулювання росту волосся, що включають введення композиції, яка містить сполуку, яка є модулятором PPAR рецепторів, де вказана сполука, представлена формулою І: O R4 O O R5 X R3 N R2 O R1 ,I UA 105037 C2 (12) UA 105037 C2 в якій X являє собою (СН2)n, де n дорівнює 1; R1 вибирають з групи, що складається з С1-С6 алкілу; R2 являє собою водень; R3 являє собою водень; R4 являє собою водень; R5 являє собою метил або етил; або фармацевтично прийнятні солі, або відповідні N-оксиди, та наповнювач. UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Ця заявка претендує на пріоритет EP09425056.0, заявленої 16 лютого 2009 р.; U.S.S.N. 61/179062, заявленої 18 травня 2009 р., і U.S.S.N. 61/287461, заявленої 17 грудня 2009 р., кожна з яких включена у всій повноті за допомогою посилання. Рівень техніки винаходу Рецептори, що активуються проліфератором пероксисом (PPAR), є членами суперсімейства ядерних гормональних рецепторів, які є ліганд-активованими факторами транскрипції, що регулюють експресію генів. Деякі PPAR грають роль в регулюванні клітинної диференціації, розвитку і метаболізмі вищих організмів. Було встановлено три типи PPAR: альфа, що експресується в печінці, нирках, серці і інших тканинах і органах, бета/дельта, що експресується, наприклад, в головному мозку, і гамма, що експресується в три форми: гамма1, гамма2 і гамма3. PPARγ рецептори були пов'язані зі стимуляцією диференціації кератиноцитів і виступали як потенційна мішень ліків при лікуванні ряду хворобливих станів, що включають шкірні захворювання, такі як псоріаз і атопічний дерматит. Крім того, експресія PPAR була виявлена у волосяних фолікулах, і може брати участь в рості волосся. Випадання волосся є загальною проблемою, яка може бути наслідком хвороби, функціонального захворювання або спадкової схильності. У деяких випадках випадання волосся може локалізуватися на тілі (наприклад, чоловіче облисіння), або може відбуватися по всьому тілу. Алопеція - це медичний термін, що вказує на відсутність або випадання волосся, і може виникнути у піддослідних, що проходять лікування від раку або інших хвороб, які потребують лікування цитотоксичними препаратами. Депігментація волосся - це також загальна проблема, і, як правило, вона є результатом процесу старіння. У якийсь момент в процесі старіння стовбурові клітини в основі волосяного фолікула, що відповідають за вироблення меланоцитів (клітини, які виробляють і зберігають пігмент), виробляють менше пігменту, доти, доки у волосся не наступає дефіцит пігменту. Відповідно, потрібні ефективні засоби, такі як PPAR модулятори, які можуть бути корисні при лікуванні таких волосяних порушень. Суть винаходу Це розкриття суті винаходу, як правило, стосується способів лікування, поліпшення або істотного запобігання порушенням, пов'язаним з волоссям, або патологічним станам, наприклад, передбаченого в даному винаході способу лікування або поліпшення патологічного стану, пов'язаного з волоссям, у піддослідного, який потребує цього, що включає введення піддослідному ефективної кількості композиції, що містить сполуку, представлену формулою I: , в якій Х являє собою C1-C3 алкілен (наприклад, (СН)n, в якому n становить 1 або 2), в деяких випадках заміщений одним, двома або трьома замісниками, вибраними з галогену або гідроксилу; R1 вибирають з групи, що складається з C1-C6 алкілу, C3-C6 циклоалкілу, С2-C6 алкенілу і С2C6 алкінілу (наприклад, R1 може бути метилом); R2 вибирають з групи, що складається з водню і С1-C6 алкілу; R3 вибирають незалежно при кожному виникненні з групи, що складається з водню, C 1-C6 алкокси, C1-C6 алкілу, ціано, C3-C6 циклоалкілу, галогену, гідроксилу, і нітро; R4 вибирають з групи, що складається з водню і C1-C6 алкілу; R5 являє собою водень або C1-C6 алкіл (наприклад, етил або метил); або фармацевтично прийнятні солі або відповідні N-оксиди; в яких композиція в деяких випадках додатково включає 1 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 в себе носій. Типовою сполукою є N-ацетил-(R)-(-)-3-(4-амінофеніл)-2-метоксипропіонова кислота. Наприклад, в даному винаході пропонуються способи лікування або поліпшення патологічних станів, пов'язаних з волоссям, такі як депігментація волосся, обмежений ріст волосся або коротке волосся, випадання волосся, вітіліго або алопеція (наприклад, анагенова алопеція, телогенова алопеція або вогнищева алопеція). Також пропонується спосіб стимулювання росту волосся, що включає введення піддослідному, який потребує цього, ефективної кількості композиції (наприклад, фармацевтично і/або косметично прийнятної композиції), що містить сполуки, описані в даному винаході, такі як сполуки, представлені вище формулою I. Такі композиції можуть бути, наприклад, введені місцево, причому композиція фармацевтично або косметично прийнятна. У деяких варіантах здійснення даного винаходу описана композиція може додатково містити агент, стимулюючий волосся. Крім того, передбачені в даному винаході композиції включають сполуки, представлені формулою I або II і, наприклад, фармацевтично прийнятний наповнювач. Також передбачене в даному винаході – це сполуки, представлені формулами I і II для використання в терапії і/або для виготовлення лікарського засобу для лікування або поліпшення втрати волосся або депігментації волосся. Короткий опис креслень На фігурі 1 показана стимуляція подовження волосяного стрижня при різних концентраціях N-ацетил E2. На фігурі 2 представлена стимуляція пігментації людського волосяного фолікула з різними концентраціями N-ацетил E2 з використанням гістоморфометрії Фонтана-Массон. На фігурі 3 представлена гістохімія Фонтана-Массон волосяного фолікула з N-ацетил E2. На фігурі 4 представлена Ki67/Tunel (термінальне дезоксиуридинове мічення кінців) імуногістоморфометрія фолікула, що спостерігається з N-ацетил E2. На фігурі 5 показана експресія K15 у волосяних фолікулах, оброблених сполукою А. На фігурі 6 показано регулювання клітин K19 у волосяних фолікулах, оброблених сполукою А. На фігурі 7 представлені наслідки дії розкритої сполуки на кератиноцити людини. На фігурі 8 показане інгібування ФНП-альфа (фактора некрозу пухлини) пероксидом водню Н2О2 і розкритою сполукою. На фігурі 9 представлене інгібування м-РНК експресії ІЛ-6 (інтерлейкіну 6), індукованої присутністю гамма-інтерферона. На фігурі 10 показане інгібування розкритою сполукою активації ядерного фактора каппа-В (NF-kB). На фігурі 11 представлене інгібування розкритою сполукою експресії білка інтерлейкіну-6, індукованої наявністю ліпополісахариду (ЛПС). На фігурі 12 показаний вплив розкритої сполуки на людські себоцити. На фігурі 13 представлена здатність розкритої сполуки до інгібування себогенезу, індукованого подразником ліпідного типу. На фігурі 14 приведені результати аналізу жирних кислот (А) і аналізу сквалену (В) інгібування себогенезу. На фігурі 15 показана обробка лінолевою кислотою і тестостероном з ліпідогенним подразником. Докладний опис винаходу Характерні риси і інші деталі розкриття суті винаходу далі будуть описані більш конкретно. Перед подальшим описом даного винаходу, нижче зібрані деякі терміни, що використовуються в описі винаходу, прикладах і прикладеній формулі винаходу. Ці визначення потрібно розглядати в зв'язку з частиною розкриття суті винаходу, що залишилася, і розуміти, як розуміє кваліфікований фахівець в даній галузі. Якщо не вказане інше, всі технічні і наукові терміни, що використовуються тут, мають те ж значення, як вони звичайно розуміються середніми фахівцями в даній галузі. Визначення "Лікування" включає в себе будь-яку дію, наприклад, зменшення, ослаблення, модулювання або усунення, що приводить до поліпшення патологічного стану, захворювання, порушення і тому подібного. Термін "алкеніл", що використовується в даному винаході, стосується ненасиченого лінійного або розгалуженого вуглеводню, що має, принаймні, один вуглець-вуглецевий подвійний зв'язок, такого як лінійна або розгалужена група 2-12, 2-10 або 2-6-вуглецевих атомів, 2 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 що називається в даному винаході С2-C12алкеніл, С2-C10алкеніл і С2-C6алкеніл, відповідно. Типові алкенільні групи включають, але не обмежуються, вініл, аліл, бутеніл, пентеніл, гексеніл, бутадієніл, пентадієніл, гексадієніл, 2-етилгексеніл, 2-пропіл-2-бутеніл, 4-(2-метил-3-бутен)пентеніл і т. д. Термін "алкокси", що використовується в даному винаході, стосується алкільної групи, приєднаної до кисню (-О-алкіл-). Типові алкоксигрупи включають, але не обмежуються цим, групи з алкільною, алкенільною або алкінільною групою 1-12, 1-8, або 1-6 атомів вуглецю, що називаються в даному винаході C1-C12алкокси, C1-C8алкокси і С1-C6алкокси, відповідно. Типові алкоксигрупи включають, але не обмежуються, метокси, етокси і т. д. Крім того, типові "алкенокси" групи включають, але не обмежуються вінілокси, алілокси, бутенокси і т. д.) Термін "алкіл", що використовується в даному винаході, стосується насиченого лінійного або розгалуженого вуглеводню, такого як лінійна або розгалужена група 1-12, 1-10 або 1-6 атомів вуглецю, згадана в даному винаході як C1-C12алкіл, C1-C10алкіл і С1-C6алкіл, відповідно. Типові алкільні групи включають, але не обмежуються, метил, етил, пропіл, ізопропіл, 2-метил-1пропіл, 2-метил-2-пропіл, 2-метил-1-бутил, 3-метил-1-бутил, 2-метил-3-бутил, 2,2-диметил-1пропіл, 2-метил-1-пентил, 3-метил-1-пентил, 4-метил-1-пентил, 2-метил-2-пентил, 3-метил-2пентил, 4-метил-2-пентил, 2,2-диметил-1-бутил, 3,3-диметил-1-бутил, 2-етил-1-бутил, бутил, ізобутил, т-бутил, пентил, ізопентил, неопентил, гексил, гептил, октил і т. д. В деяких варіантах здійснення, алкіл стосується С1-C6алкіл. У деяких варіантах здійснення, циклоалкіл стосується С3-C6циклоалкіл. Алкільні, алкенільні і алкінільні групи, в деяких варіантах здійснення можуть за бажанням замінюватися або перериватися, принаймні, однією групою, вибраною з алканоїлу, алкокси, алкілу, алкенілу, алкінілу, амідо, амідино, аміно, арилу, арилалкілу, азидо, карбамату, карбонату, карбокси, ціано, циклоалкілу, складного ефіру, простого ефіру, формілу, галогену, галогеналкілу, гетероарилу, гетероциклілу, гідроксилу, іміно, кетону, нітро, фосфату, фосфонату, фосфінату, сульфату, сульфіду, сульфонамідо, сульфонілу і тіокарбонілу. Термін "алкініл", що використовується в даному винаході, стосується ненасиченого лінійного або розгалуженого вуглеводню, що має, принаймні, один вуглець-вуглецевий потрійний зв'язок, такому як лінійна або розгалужена група 2-12, 2-8, або 2-6 вуглецевих атома, що називається в даному винаході С2-C12алкініл, С2-C8алкініл і С2-C6алкініл, відповідно. Типові алкінільні групи включають, але не обмежуються, етиніл, пропініл, бутиніл, пентиніл, гексиніл, метилпропініл, 4метил-1-бутиніл, 4-пропіл-2-пентиніл і 4-бутил-2-гексиніл і т. д. Термін "амід" або "амідо", що використовується в даному винаході, стосується радикала форми -RаC(O)N(Rb)-, -RаC(O)N(Rb)Rc- або -C(О)NRbRc, в якому Rа, Rb і Rc кожний незалежно вибраний з алкокси, алкілу, алкенілу, алкінілу, аміду, аміно, арилу, арилалкілу, карбамату, циклоалкілу, складного ефіру, простого ефіру, формілу, галогену, галогеналкілу, гетероарилу, гетероциклілу, водню, гідроксилу, кетону і нітро. Амід може бути приєднаний до іншої групи через вуглець, азот, Rb, Rc або Rа. Амід також може бути циклічним, наприклад, R b і Rc, Rа і Rb або Rа і Rc можуть бути сполучені в формі від 3-и до 12-членного кільця, такого як від 3-и до 10членного кільця або від 5-ти до 6-членного кільця. Термін "карбоксамідо" стосується структури -C(О)NRbRc. Термін "амідино", що використовується в даному винаході, стосується радикала форми C(=NR)NR'R'', де R, R' і R" можуть кожний незалежно бути вибрані з алкілу, алкенілу, алкінілу, аміду, арилу, арилалкілу, ціано, циклоалкілу, галогеналкілу, гетероарилу, гетероциклілу, гідроксилу, кетону і нітро. Термін "амін" або "аміно", що використовується в даному винаході, стосується радикала форми NRdRe-, -N(R)Re- або ReN(Rd)Rf-, де Rd, Re, Rf незалежно вибирають з алкокси, алкілу, алкенілу, алкінілу, аміду, аміно, арилу, арилалкілу, карбамату, циклоалкілу, складного ефіру, простого ефіру, формілу, галогену, галогеналкілу, гетероарилу, гетероциклілу, водню, гідроксилу, кетону і нітро. Аміно може бути прикріплена до материнської молекулярної групи через азот, Rd, Re або Rf. Аміногрупа також може бути циклічною, наприклад, будь-які два з Rd, Re або Rf можуть бути сполучені між собою або з N в формі від 3-и до 12-членного кільця, наприклад, морфоліно або піперидиніл. Термін аміно також включає в себе відповідні четвертинні солі амонію будь-якої аміногрупи, наприклад, -[N(Rd)(Re)(Rf)]+. Типові аміногрупи включають аміноалкільні групи, в яких, принаймні, один з Rd, Re або Rf є алкільною групою. Термін "арил", що використовується в даному винаході, стосується моно-, бі- або іншої мульти-карбоциклічної, ароматичної кільцевої системи. У деяких варіантах здійснення, арил стосується моноциклічного і/або біциклічного, 5-6-членного кільця. Ароматичне кільце може бути заміщене на одну або декілька позицій кільця замісниками, вибраними з алканоїлу, алкокси, алкілу, алкенілу, алкінілу, амідо, амідино, аміно, арилу, арилалкілу, азидо, карбамату, 3 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 карбонату, карбокси, ціано, циклоалкілу, складного ефіру, простого ефіру, формілу, галогену, галогеналкілу, гетероарилу, гетероциклілу, гідроксилу, іміно, кетону, нітро, фосфату, фосфонату, фосфінату, сульфату, сульфіду, сульфонамідо, сульфонілу і тіокарбонілу. Термін "арил" включає також поліциклічні кільцеві системи з двома або більш циклічними кільцями, в яких два або більше атомів вуглецю є загальними для двох сполучених кілець (кільця являють собою "конденсовані кільця"), в яких хоча б одне з кілець ароматичне, наприклад, інші циклічні кільця можуть бути циклоалкілами, циклолкенілами, циклоалкінілами і/або арилами. Типові арильні групивключають, але не обмежуються, феніл, толіл, антраценіл, флуореніл, інденіл, азуленіл і нафтил, а також бензо-конденсовані карбоциклічні фрагменти, такі як 5,6,7,8тетрагідронафтил. Термін "арилалкіл", що використовується в даному винаході, стосується арильної групи, що має, принаймні, один алкільний замісник, наприклад, -арил-алкіл-. Типові арилалкільні групи включають, але не обмежуються, арилалкіли, що мають моноциклічні ароматичні системи, в яких кільце складається з 6 атомів вуглецю. Наприклад, "фенілалкіл" включає в себе фенілС4алкіл, бензил, 1-фенілетил, 2-фенілетил і т. д. Термін "карбоніл", що використовується в даному винаході, стосується радикала -C(О)-. Термін "карбоксамідо", що використовується в даному винаході, стосується радикала C(О)NRR', де R і R' можуть бути однаковими або різними. R і R' можуть бути вибрані з, наприклад, алкілу, арилу, арилалкілу, циклоалкілу, формілу, галогеналкілу, гетероарилу і гетероциклілу. Термін "карбокси", що використовується в даному винаході, стосується радикала -СООН або його відповідних солей, наприклад, -COONa і т. д. Термін "ціано", що використовується в даному винаході, стосується радикала -CN. Термін "циклоалкокси", що використовується в даному винаході, стосується циклоалкільної групи, приєднаної до кисню. Термін "циклоалкіл", що використовується в даному винаході, стосується одновалентної насиченої або ненасиченої циклічної, біциклічної або біциклічної місточкової вуглеводневої групи з 3-12, 3-8, 4-8, або 4-6 атомів вуглецю, згаданої в даному винаході, наприклад, як "C48циклоалкіл ", отриманої з циклоалкану. Типові циклоалкільні групи включають, але не обмежуються, циклогексани, циклогексени, циклопентани, циклопентени, циклобутани і циклопропани. Циклоалкільні групи можуть бути заміщені на алканоїл, алкокси, алкіл, алкеніл, алкініл, амідо, амідино, аміно, арил, арилалкіл, азидо, карбамат, карбонат, карбокси, ціано, циклоалкіл, простий ефір, складний ефір, форміл, галоген, галогеналкіл, гетероарил, гетероцикліл, гідроксил, іміно, кетон, нітро, фосфат, фосфонат, фосфінат, сульфат, сульфід, сульфонамідо, сульфоніл і тіокарбоніл. Циклоалкільні групи можуть бути зчленовані з іншими циклоалкільними, арильними або гетероциклічними групами. У деяких варіантах здійснення, циклоалкіл стосується С3-С6 алкілу. Терміни "гало" або "галоген" або "гал", що використовуються в даному винаході, стосуються F, Cl, Br або I. Термін "галогеналкіл", що використовується в даному винаході, стосується алкільної групи, заміщеної одним або декількома атомами галогену. Термін "нітро", що використовується в даному винаході, стосується радикала -NO2. Термін "феніл", що використовується в даному винаході, стосується 6-членного карбоциклічного ароматичного кільця. Фенільні групи також можуть бути зчленовані з циклогексановим або циклопентановим кільцем. Феніл може бути заміщений одним або декількома замісниками, що включають алканоїл, алкокси, алкіл, алкеніл, алкініл, амідо, амідино, аміно, арил, арилалкіл, азидо, карбамат, карбонат, карбокси, ціано, циклоалкіл, простий ефір, складний ефір, форміл, галоген, галогеналкіл, гетероарил, гетероцикліл, гідроксил, іміно, кетон, нітро, фосфат, фосфонат, фосфінат, сульфат, сульфід, сульфонамідо, сульфоніл і тіокарбоніл. Термін "фосфат", що використовується в даному винаході, стосується радикала OP(О)(ORaa)2 або його аніонів. Термін "фосфонат" стосується радикала -P(О)(ORaa)2 або його аніонів. Термін "фосфінат" стосується радикала -PRaa(О)(ORaa) або його аніону, де кожний Raa може бути вибраний з, наприклад, алкілу, алкенілу, алкінілу, арилу, арилалкілу, циклоалкілу, водню, галогеналкілу, гетероарилу, і гетероциклілу. Термін "фармацевтично прийнятний носій" або "фармацевтично прийнятний наповнювач", що використовується в даному винаході, стосується будь-якого або всіх розчинників, диспергенту, покриттів, ізотонічних і затримуючих поглинання засобів, і тому подібне, які сумісні з фармацевтичним введенням. Використання такого середовища і засобів для фармацевтично 4 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 активних речовин добре відоме в даній галузі. Композиції можуть також містити інші активні сполуки, що забезпечують допоміжні, додаткові або поліпшені терапевтичні функції. Термін "фармацевтична композиція", що використовується в даному винаході, стосується композиції, що включає, принаймні, одну сполуку, як описано в даному винаході, утворену разом з одним або декількома фармацевтично прийнятними носіями. "Особа", "пацієнт" або "піддослідний" використовуються як синоніми і включають в себе будь-яку тварину, включаючи ссавців, переважно мишей, щурів, інших гризунів, кроликів, собак, кішок, свиней, велику рогату худобу, овець, коней або приматів і, найбільш переважно, людину. Сполуки винаходу можуть бути введені ссавцем, таким як людина, але можуть бути і інші ссавці, такі як тварина, що потребує ветеринарного лікування, наприклад, домашні тварини (наприклад, собаки, кішки і т. п.), тварини з ферми (наприклад, корови, вівці, свині, коні і т. п.) і лабораторні тварини (наприклад, щурі, миші, морські свинки і т. п.). Ссавець, якого лікують способами винаходу, це ссавець, у якого бажана модуляція PPAR і/або рецепторів епідермального фактора росту. "Модуляція" включає в себе антагонізм (наприклад, інгібування), агонізм, частковий антагонізм і/або частковий агонізм. У даному описі винаходу термін "терапевтично ефективна кількість" означає кількість розкритої сполуки, яка буде викликати біологічну або медичну відповідь тканини, системи, тварини або людини, якої домагається дослідник, ветеринар, медичний лікар або інший клінічний лікар. Сполуки винаходу вводяться в терапевтично ефективних кількостях для лікування захворювання. Крім того, терапевтично ефективна кількість сполуки - це кількість, необхідна для досягнення бажаного терапевтичного і/або профілактичного ефекту, наприклад, кількість, яка приведе до запобігання або посилення вияви симптомів, пов'язаних з хворобою, що стосується PPAR і/або рецепторів EGF епідермального фактора росту. Термін "фармацевтично прийнятна сіль (солі)", що використовується в даному винаході, стосується солей кислотних або основних груп, які можуть бути присутнім в сполуках, що використовуються в даних композиціях. Сполуки, включені в дані композиції, які мають основну природу, здатні утворювати самі різноманітні солі з різними неорганічними і органічними кислотами. Кислоти, які можуть бути використані для отримання фармацевтично прийнятних кислотно-адитивних солей таких основних сполук, являють собою кислоти, які утворюють нетоксичні кислотно-адитивні солі, тобто солі, що містять фармакологічно прийнятні аніони, в тому числі, але не обмежуючись ними, солі: малат, оксалат, хлорид, бромід, йодид, нітрат, сульфат, бісульфат, фосфат, кислий фосфат, ізонікотинат, ацетат, лактат, саліцилат, цитрат, тартрат, олеат, танат, пантотенат, бітартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкуронат, сахарат, форміат, бензоат, глутамат, метансульфонат, етансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат і памоат (тобто 1,1'-метилен-біс-(2-гідрокси-3-нафтоат)). Сполуки, які входять в дані композиції, що містять аміногрупу, в доповнення до вищезгаданих кислот можуть утворювати фармацевтично прийнятні солі з різними амінокислотами. Сполуки, які входять в дані композиції, що мають кислотну природу, здатні до утворення основних солей з різними фармакологічно прийнятними катіонами. Приклади таких солей включають солі лужних металів або лужноземельних металів і, зокрема, солі кальцію, магнію, натрію, літію, цинку, калію і заліза. Розкриті сполуки можуть містити один або декілька хіральних центрів і/або подвійних зв'язків і, отже, існують у вигляді стереоізомерів, таких як геометричні ізомери, енантіомери або діастереомери. Термін "стереоізомери" при використанні в даному винаході включає в себе всі геометричні ізомери, енантіомери або діастереомери. Ці сполуки можуть бути визначені символами "R" або "S", залежно від конфігурації замісників навколо стереогенного атома вуглецю. Даний винахід охоплює різні стереоізомери цих сполук і їх сумішей. Стереоізомери включають енантіомери і діастереомери. Суміші енантіомерів або діастереомерів можуть бути позначені "(±)" в номенклатурі, але фахівцям в даній галузі буде зрозуміло, що структура може означати хіральний центр в неявному вигляді. Індивідуальні стереоізомери сполук даного винаходу можуть бути отримані синтетичним шляхом з комерційно доступних вихідних матеріалів, які містять асиметричні або стереогенні центри, або при підготовці рацемічних сумішей з подальшими способами розділення, добре відомими фахівцям в даній галузі. Ці способи розділення характерні: (1) прикріпленням суміші енантіомерів до хірального допоміжного елемента, відділенням отриманої суміші діастереомерів перекристалізацією або хроматографією і звільненням оптично чистого продукту від допоміжного елемента, (2) утворенням солі з використанням оптично активного розділяючого агента, або (3) прямим розділенням суміші оптичних енантіомерів на хіральних хроматографічних колонках. Стереоізомерні суміші також можуть бути розділені на стереоізомерні компоненти добре відомими способами, такими як газова хроматографія з 5 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 хіральною фазою, високоефективна рідинна хроматографія з хіральною фазою, кристалізація сполук у вигляді хірального сольового комплексу або кристалізація сполуки в хіральному розчиннику. Стереоізомери можуть також бути отримані з стереомерно чистих проміжних сполук, реагентів і каталізаторів шляхом добре відомих способів асиметричного синтезу. Геометричні ізомери можуть бути присутніми і в сполуках даного винаходу. Символ означає зв'язок, який може бути простим, подвійним або потрійним зв'язком, як описано в даному винаході. Даний винахід включає в себе різні геометричні ізомери і їх суміші, отримані в результаті угрупування замісників навколо вуглець-вуглецевого подвійного зв'язку або угрупування замісників навколо карбоциклічного кільця. Замісники навколо вуглець-вуглецевого подвійного зв'язку позначаються як "Z" або "E" конфігурація, в якій терміни "Z" і "Е" використовуються відповідно до стандартів ІЮПАК. Якщо не вказане інше, описані структури з подвійними зв'язками охоплюють як "E", так і "Z" ізомери. Замісники навколо вуглець-вуглецевого подвійного зв'язку також можуть бути віднесені до "цис" або "транс", де "цис" означає, що замісники знаходяться по одну сторону від подвійного зв'язку, а "транс" означає, що замісники знаходяться на протилежних сторонах від подвійного зв'язку. Розташування замісників навколо карбоциклічного кільця позначають як "цис" або "транс". Термін "цис" означає, що замісники знаходяться по одну сторону від площини кільця, а термін "транс" означає, що замісники розташовуються по різні сторони від площини кільця. Суміші сполук, в яких замісники розташовані як по одній, так і по різних сторонах від площини кільця, позначаються "цис/транс". Сполуки, розкриті в даному винаході, можуть існувати в сольватованих і несольватованих формах з фармацевтично прийнятними розчинниками, такими як вода, етанол і т. п., і передбачають, що винахід охоплюють як сольватовані, так і несольватовані форми. У одному з варіантів здійснення сполука є аморфною. У одному з варіантів здійснення сполука поліморфна. У іншому варіанті здійснення сполука знаходиться в кристалічній формі. Винахід також охоплює ізотопно мічені сполуки винаходу, які ідентичні сполукам, перерахованим в даному винаході, крім того, один або декілька атомів замінені на атом, що має атомну масу або масове число, відмінне від атомної маси або масового числа, знайденого, як правило, в природі. Приклади ізотопів, які можуть входити до складу сполук винаходу, 2 3 включають ізотопи водню, вуглецю, азоту, кисню, фосфору, фтору і хлору, наприклад, Н, Н, 13 14 15 18 17 31 32 35 18 36 С, С, N, О, О, P, P, S, F і Cl, відповідно. 3 14 Деякі ізотопно мічені розкриті сполуки (наприклад, сполуки, мічені Н і С) корисні при 3 кількісному аналізі розподілу в тканинах сполуки і/або субстрат. Ізотопи тритій (тобто, H) і 14 вуглець-14 (тобто, С) особливо переважні при їх простоті підготовки і виявлення. Крім того, 2 заміщення важкими ізотопами, такими як дейтерій (тобто, H), може дати певні терапевтичні переваги, отримані в результаті більшої метаболічної стабільності (наприклад, підвищений in vivo (в природних умовах) період напіврозпаду або зменшене необхідне дозування) і, отже, може бути переважніше при деяких обставинах. Ізотопно мічені сполуки винаходу, як правило, можуть бути отримані наступними методиками, аналогічними розкритим методикам в, наприклад, Прикладах в даному винаході, заміщенням ізотопно мічених реагентів на неізотопно мічені реагенти. Термін "проліки" стосується сполук, які трансформуються in vivo (в природних умовах) для отримання розкритої сполуки або фармацевтично прийнятної солі, гідрату або сольвату сполуки. Трансформація може відбуватися за допомогою різних механізмів, наприклад, шляхом гідролізу в крові. Наприклад, якщо сполука винаходу або її фармацевтично прийнятна сіль, гідрат або сольват сполуки містить функціональну групу карбонової кислоти, проліки можуть складатися з складного ефіру, утвореного заміною атома водню кислотної групи на групу, таку як (С1-С8)алкіл, (С2-С12)алканоїлоксиметил, 1-(алканоїлоксі)етил, що мають від 4 до 9 атомів вуглецю, 1-метил-1-(алканоїлоксі)-етил, що має від 5 до 10 атомів вуглецю, алкоксикарбонілоксиметил, що має від 3 до 6 атомів вуглецю, 1-(алкоксикарбонілоксі)етил, що має від 4 до 7 атомів вуглецю, 1-метил-1-(алкоксикарбонілоксі)етил, що має від 5 до 8 атомів вуглецю, N-(алкоксикарбоніл)амінометил, що має від 3 до 9 атомів вуглецю, 1-(N(алкоксикарбоніл)аміно)етил, що має від 4 до 10 атомів вуглецю, 3-фталідил, 4-кротонолактоніл, гамма-бутиролактон-4-іл, ді-N, N-(C1-С2)алкіламіно(С2-C3)алкіл (такий як β-диметиламіноетил), карбамоїл-(C1-С2)алкіл, N, N-ді(C1-С2)алкілкарбамоїл-(C1-С2)алкіл і піперидино-, піролідино або морфоліно(С2-C3)алкіл. Аналогічним чином, якщо сполука винаходу містить спиртову функціональну групу, проліки можуть бути утворені заміщенням атома водню спиртової групи на групу, таку як (C 1C6)алканоїлоксиметил, 1-((C1-C6)алканоїлоксі)етил, 1-метил-1-((C1-C6)алканоїлоксі)етил(C1C6)алкоксикарбонілоксиметил, N-(C1-C6)алкоксикарбоніламінометил, сукциноїл, (C1-C6)алканоїл, 6 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 α-аміно(C1-C4)алканоїл, арилацил і α-аміноацил, або α-аміноацил-α-аміноацил, де кожну αаміноацильну групу незалежно вибирають з природних L-амінокислот, Р(О)(OH)2, -P(О)(О(С1C6)алкіл)2 або глікозилу (радикал, отриманий в результаті видалення гідроксильної групи напівацетальной форми вуглеводів). Якщо сполука винаходу включає в себе функціональну аміногрупу, проліки можуть бути утворені заміщенням атома водню в аміногрупі на групу, таку як R-карбоніл, RО-карбоніл, NRR'карбоніл, де R і R', кожний незалежно (С1-C10)алкіл, (C3-C7)циклоалкіл, бензил, або R-карбоніл являє собою природний α-аміноацил або природний α-аміноацил-природний α1 1 2 3 аміноацил, -C(OH)С(О)OY , в якому Y являє собою Н, (С1-C6)алкіл або бензил, -C(OY )Y , в 2 3 якому Y являє собою (С1-C4)алкіл і Y являє собою (С1-C6)алкіл, карбоксі(С1-C6)алкіл, аміно(С14 5 4 C4)алкіл або моно-N- або ді-N, N-(С1-C6)алкіліміноалкіл, -C(Y )Y , в якому Y являє собою Н або 5 метил і Y являє собою моно-N- або ді-N, N-(С1-C6)алкіламіно, морфоліно, піперидин-1-іл або піролідин-1-іл. Сполуки Розкриття суті винаходу забезпечують, принаймні частково, сполуки, представлені формулою I, як показано нижче. Крім того, передбачене в даному винаході - це композиції, які включають сполуки, представлені формулою I і, наприклад, фармацевтично або косметично прийнятний носій або наповнювач. , в якій Х являє собою C1-C3алкілен, необов'язково заміщений одним, двома або трьома замісниками, вибраними з галогену або гідроксилу; R1 вибирають з групи, що складається з C1-C6алкілу, C3-C6циклоалкілу, С2-C6алкенілу, і С2C6алкінілу; R2 вибирають з групи, що складається з водню і C1-C6алкілу; R3 вибирають незалежно, при кожному його виникненні, з групи, що складається з водню, C1-C6лкокси, C1-C6алілу, ціано, C3-C6циклоалкілу, галогену, гідроксилу, і нітро; R4 вибирають з групи, що складається з водню і C1-C6алкілу; R5 являє собою C1-C6алкіл, або фармацевтично прийнятні солі або їх N-оксиди. У одному з варіантів здійснення, R1 може бути C1-C6алкілом, таким як метил. У одному з варіантів здійснення R2 може бути воднем. У іншому варіанті здійснення, R3 може бути вибраний з групи, що складається з водню, C1-C6алкілу, галогену і гідроксилу. У іншому варіанті здійснення, R3 може бути воднем. У одному з варіантів здійснення, R 4 і R5 кожний може бути C1C6алкілом. У іншому варіанті здійснення, R4 може бути воднем, а R5 може бути метилом. У одному з варіантів здійснення, X може бути (СН)n, де n дорівнює 1 або 2, наприклад, 1. У іншому варіанті здійснення, -NR2-COR1 може бути в мета-положенні відносно X, як показано в формулі III. 7 UA 105037 C2 . У іншому варіанті здійснення, -NR2-COR1 може бути в пара-положенні відносно X, як показано в формулі IV. 5 10 15 , Розкриття суті винаходу забезпечує, принаймні частково, сполуки, представлені формулою II, як показано нижче. Крім того, передбачене в даному винаході - це композиції, які включають сполуки, представлені формулою II і, наприклад, фармацевтично прийнятний носій. , в якій R1 вибирають з групи, що складається з C1-C6алкілу, C3-C6циклоалкілу, C3-C6алкенілу і С2-C6алкінілу; R2 вибирають з групи, що складається з водню і C1-C6алкілу; R3 вибирають незалежно, при кожному його виникненні, з групи, що складається з водню, C1-C6алкокси, C1-C6алкілу, ціано, C3-C6циклоалкілу, галогену, гідроксилу, і нітро; R5 являє собою водень або C1-C6алкіл, або фармацевтично прийнятні солі або їх N-оксиди. Також передбачені сполуки формули V, як показано нижче, а також композиції, які включають сполуки, представлені формулою V і, наприклад, фармацевтично прийнятний носій. 8 UA 105037 C2 5 10 , в якій R1 вибирають з групи, що складається з C1-C6алкілу, C3-C6циклоалкілу, С2-C6алкенілу, і С2-C6алкінілу; R3 вибирають незалежно, при кожному його виникненні, з групи, що складається з водню, C1-C6алкокси, C1-C6алкілу, ціано, C3-C6циклолкілу, галогену, гідроксилу, і нітро; R4 вибирають з групи, що складається з водню і C1-C6алкілу; R5 являє собою водень або C1-C6алкіл, і А являє собою конденсований п'яти- або шестичленний гетероцикл, або фармацевтично прийнятні солі або їх N-оксиди. У одному з варіантів здійснення, R1 може бути С1-C6алкілом, таким як метил. У іншому варіанті здійснення, R1 і R3 кожний може бути С1-C6алкілом, таким як метил. У одному з варіантів здійснення, R2 може бути воднем. У деяких варіантах здійснення сполуки можуть бути представлені або 15 20 , В яких р дорівнює 1 або 2; R1 вибирається з групи, що складається з С 1-C6алкілу, С3-C6циклоалкілу, С2-C6алкенілу, і С2C6алкінілу; R4 і R8 кожний незалежно вибирають з групи, що складається з водню і C 1-C6алкілу; або фармацевтично прийнятних солей або їх N-оксидів. Передбачувані сполуки і фармацевтичні композиції, що включають щонайменше одну сполуку, можуть бути вибрані з групи, що складається з: N-ацетил-(R)-(-)-3-(4-амінофеніл)-2метоксипропіонової кислоти (Сполука А), N-ацетил-(S)-(-)-3-(4-амінофеніл)-2метоксипропіонової кислоти (Сполука В), рацемічних N-ацетил-(S)-(-)-3-(4-амінофеніл)-2метоксипропіонової кислоти (Сполука АВ); 9 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 4-ацетаміно-N-гідрокси-2-метоксибензаміду; 1-ацетил-6-метокси-1,2,3,4-тетрагідрохіноліну5-карбонової кислоти, 5-ацетамідо-2-гідроксибензойної кислоти (наприклад, ацетильованої 5аміносаліцилової кислоти) або фармацевтично прийнятних солей або їх N-оксидів. Дане розкриття суті винаходу також забезпечує фармацевтичні композиції, що містять сполуки, як описано в даному винаході, утворені спільно з одним або декількома фармацевтично або косметично прийнятними носіями. Ці препарати включають препарати, придатні для перорального, ректального, місцевого, букального і парентерального (наприклад, підшкірного, внутрішньом'язового, внутрішньошкірного або внутрішньовенного) введення або для місцевого застосування, наприклад, як косметичний засіб. Хоча вибір найбільш прийнятної форми введення в кожному конкретному випадку буде залежати від ступеня і тяжкості стану, що лікується, і від характеру конкретної використовуваної сполуки. Терапевтичне застосування Розкриття суті винаходу далі передбачає, в деяких варіантах здійснення, способи модуляції активності одного або декількох PPAR і/або рецепторів епідермального фактора росту, що включають вплив на вищезазначений рецептор сполукою винаходу. Наприклад, передбачене в даному винаході являє собою способи лікування хвороб, пов'язаних з експресією або активністю одного або декількох PPAR і/або рецепторів епідермального фактора росту у пацієнта, що включають введення пацієнту терапевтично ефективної кількості сполуки винаходу. Розкриття суті винаходу спрямоване, принаймні, частково на лікування або ослаблення волосяних порушень за допомогою, наприклад, розкритої сполуки. Наприклад, в даному винаході забезпечуються способи стимулювання росту волосся, в яких пацієнту, що потребує цього, вводять розкриту сполуку (або, наприклад, композицію, яка включає розкриту сполуку), наприклад, місцево. У деяких варіантах здійснення забезпечується спосіб лікування або ослаблення втрати волосся або депігментації волосся у пацієнта, який страждає на це (або передбачає це), не бажає втрати волосся або не бажає депігментації, що включає введення ефективної кількості композиції, яка містить розкриту сполуку. Передбачувані способи включають способи, які сповільнюють утворення сивого волосся або істотно ослаблюють випадання волосся в порівнянні з, наприклад, випаданням волосся або депігментацією, не передбачених при лікуванні. Також в даному винаході розглядаються способи лікування вітіліго, вогнищевої алопеції, андрогенної алопеції і/або телогенового виділення. 10 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Наприклад, у пацієнтів з акне може збільшитися безперервне утворення шкірного сала, а застосування інгібітору утворення шкірного сала, такого як розкритого в даному винаході, може бути корисним при лікуванні акне, себореї або алопеції. У іншому прикладі, хронічне запалення волосяних фолікулів (кератиноцитів) може бути ознакою, наприклад, андрогенної алопеції. Інгібітор такого запалення, такий як розкритий в даному винаході, може бути корисний, наприклад, при лікуванні випадання волосся. Сполуки винаходу можуть бути введені піддослідним (тваринам і/або людям), що потребують такого лікування в дозуванні, яке забезпечить оптимальну фармацевтичну ефективність. Потрібно мати на увазі, що дозування, необхідне для використання в будь-якому конкретному застосуванні, буде варіюватися від піддослідного до піддослідного, і не тільки залежно від певної сполуки або вибраної композиції, але і від маршруту введення, природи патологічного стану піддослідного, що підлягає лікуванню, віку і патологічного стану пацієнта, супутнього медикаментозного лікування або спеціальних дієт, призначених потім пацієнту, і від інших факторів, які будуть зрозумілі фахівцям в даній галузі, враховуючи, зрештою, відповідне дозування, призначене по розсуду лікуючого лікаря. Для лікування клінічних патологічних станів захворювань, згаданих вище, сполуки даного винаходу можна вводити перорально, місцево, парентерально, шляхом інгаляції спрею або ректально в дозованій лікарській формі, що містить звичайні нетоксичні фармацевтично прийнятні носії, ад'юванти і транспортні засоби. Термін парентерально, що використовується в даному винаході, включає підшкірні ін'єкції, внутрішньовенні, внутрішньом'язові, інтрастернальну ін'єкцію або методику вливання. Як правило, терапевтично ефективна кількість активного компонента буде знаходитися в інтервалі від близько 0,1 мг/кг до приблизно 100 мг/кг, в деяких випадках від близько 1 мг/кг до приблизно 100 мг/кг, в деяких випадках від близько 1 мг/кг до 10 мг/кг. Введена кількість буде залежати від таких змінних, як тип і ступінь захворювання або вказівки лікуватися, загальний стан здоров'я конкретного пацієнта, відносна біологічна ефективність сполук, лікарська форма сполук, наявність і види наповнювачів в лікарській формі, і маршрути введення. Початкова введена доза вводитися може бути збільшена до меж вище верхнього рівня для того, щоб швидко досягнути бажаного рівня в крові або рівні в тканині, або початкова доза може бути меншою, ніж оптимальна, а добова доза може бути поступово збільшена протягом курсу лікування залежно від конкретної ситуації. Людська доза може бути оптимізована, наприклад, при звичайному вивченні збільшення дози на Фазі I, призначеній для роботи від 0,5 мг/кг до 20 мг/кг. Частота дозування може варіюватися залежно від факторів, таких як спосіб введення, кількості дози і хворобливого стану пацієнта, що підлягає лікуванню. Типові частоти дозування складають один раз на день, раз на тиждень і раз на два тижні. Передбачувана лікарська форма або композиція містять розкриті сполуки і, як правило, можуть також включати фармацевтично прийнятний носій або наповнювач. У деяких варіантах здійснення, передбачувані композиції можуть також включати інші агенти, наприклад речовини, стимулюючі волосся, такі як ProcapilTM, латанопрост, міноксидил, фінастерид, дутастерид і/або спіронолактон. Крім того, передбачуване в даному винаході - це розкриті способи, які можуть, в деяких варіантах здійснення, далі включати введення одного або декількох агентів, стимулюючих волосся, таких, як описані вище. Передбачувані композиції можна вводити різними способами, залежно від їх використання за призначенням, як це добре відоме фахівцям в даній галузі. Наприклад, якщо композиції даного винаходу повинні бути введені перорально, вони можуть бути утворені у вигляді таблеток, капсул, гранул, порошків або сиропів. Крім того, лікарські форми даного винаходу можуть бути введені парентерально у вигляді ін'єкцій (внутрішньовенно, внутрішньом'язово або підшкірно), препаратів краплинного вливання, або у вигляді клізм, або свічок. При нанесенні на очну слизову оболонку композиції даного винаходу можуть бути отримані у вигляді очних крапель або мазі для очей. Ці лікарські форми можуть бути отримані звичайними засобами, і, при бажанні, композиції можуть бути змішані з будь-якою звичайною добавкою, такою як наповнювач, зв'язувальна речовина, розпушувач, змащувальна речовина, коригуючий речовину, солюбілізуючий агент, суспензійний допоміжний засіб, емульгуюча речовина або покриваючий засіб. У лікарських формах даного винаходу можуть бути присутніми як утворювальні засоби зволожуючі речовини, емульгуючі речовини і змащувальні речовини, такі як лаурилсульфат натрію і стеарат магнію, а також барвники, роздільвальні засоби, покриваючі засоби, підсолоджувачі, смакові і ароматизуючі засоби, консерванти і антиоксиданти. Заявлені композиції можуть бути придатні для перорального, назального, місцевого (в тому числі букального і сублінгвального), ректального, вагінального, аерозольного і/або парентерального введення. Композиції можуть бути зручно представлені у вигляді стандартної 11 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 лікарської форми і можуть бути отримані будь-якими способами, добре відомими фахівцям в галузі фармацевтики. Кількість композиції, що може бути пов'язана з матеріалом носія для виробництва однієї дози, варіюється залежно від піддослідного, що підлягає лікуванню, і конкретного способу введення. Способи приготування цих лікарських форм включають стадію поєднання композиції даного винаходу з носієм і, можливо, одним або декількома допоміжними інгредієнтами. Загалом, лікарські форми готуються однаково і ретельно, суміщаючи агенти з рідкими носіями або тонко подрібненими твердими носіями, або з обома, а потім, за необхідності, формуючи виріб. Композиції, придатні для перорального введення можуть бути в формі капсули, пілюлі, таблетки, пастилки (з використанням ароматизованої основи, як правило, сахарози і акації або трагаканту), порошків, гранул або у вигляді розчину або суспензії у водній або неводній рідині, або, у вигляді рідкої емульсії масло у воді або вода в маслі, або, у вигляді еліксиру або сиропу, або, у вигляді пастилки (з використанням інертної основи, такої як желатин і гліцерин, або сахароза і акація), кожна з яких містить задану кількість заявленої композиції як активний інгредієнт. Композиції даного винаходу можуть бути також введені у вигляді болюсу, електуарію, або пасти. У твердих лікарських формах для перорального введення (капсули, таблетки, пілюлі, таблетки, покриті оболонкою, драже, порошки, гранули і т. п.), заявлену композицію змішують з одним або декількома фармацевтично прийнятними носіями такими, як цитрат натрію або дикальційфосфат, і/або з будь-яким з наступних: (1) наповнювачами або розріджувачами такими, як крохмаль, лактоза, сахароза, глюкоза, маніт, і/або кремнієва кислота, (2) зв'язувальними речовинами такими, як наприклад, карбоксиметилцелюлоза, альгінати, желатин, полівінілпіролідон, сахароза і/або акація, (3) зволожувачами такими, як гліцерин; (4) розпушувачами такими, як агар-агар, карбонат кальцію, картопляний або маніоковий крохмаль, альгінова кислота, деякі силікати, і карбонат натрію; (5) уповільнювачами схоплювання розчину такими, як парафін; (6) прискорювачами вбирання такими, як сполуки четвертинного амонію; (7) зволожуючими агентами такими, як наприклад, ацетиловий спирт і моностеарат гліцерину; (8) абсорбентами такими, як каолінова і бентонітова глина; (9) змащувальними речовинами такими, як тальк, стеарат кальцію, магнію стеарат, твердих поліетиленгліколі, лаурилсульфат натрію і їх сумішами; і (10) барвниками. У разі використання капсул, таблеток і пілюль композиції можуть також містити буферні речовини. Тверді композиції подібного типу можуть бути також використані як наповнювачі в м'яких і твердих капсулах, заповнених желатином, використовуючи такі наповнювачі, як лактоза або молочний цукор, а також високомолекулярні поліетиленгліколі і т. п. Рідкі лікарські форми для перорального введення включають фармацевтично прийнятні емульсії, мікроемульсії, розчини, суспензії, сиропи і еліксири. У доповнення до заявленої композиції рідкі лікарські форми можуть містити інертні розріджувачі, що звичайно використовуються в мистецтві такі, як наприклад, вода або інші розчинники, солюбілізуючі агенти і емульгатори такі, як етиловий спирт, ізопропіловий спирт, етиловий карбонат, етилацетат, бензиловий спирт, бензил бензоат, пропіленгліколь, 1,3-бутиленгліколь, олії (зокрема, бавовняна, арахісова, кукурудзяна, олія зародків пшениці, оливкова, рицинова і кунжутна олії), гліцерин, тетрагідрофуриловий спирт, поліетиленгліколі і, складні ефіри жирних кислот сорбітану, циклодекстринів і їх сумішей. Суспензії, в доповнення до заявленої композиції, можуть містити суспендуючі речовини, як, наприклад, етоксильовані ізостеарилові спирти, складні ефіри поліоксіетиленового сорбіту і сорбітану, целюлозу мікрокристалічну, метагідроксид алюмінію, бентоніт, агар-агар і трагакант, і їх суміші. Лікарські форми для трансдермального або місцевого введення заявленої композиції включають порошки, аерозолі, мазі, пасти, креми, лосьйони, гелі, розчини, пластирі і інгалятори. Активний компонент може бути змішаний в стерильних умовах з фармацевтично прийнятним носієм і з якими-небудь консервантами, буферними розчинами або розпилювальними речовинами, які можуть бути потрібними. Мазі, пасти, креми і гелі можуть містити в доповнення до заявленої композиції, наповнювачі такі як тварин і рослинні жири, олії, воски, парафіни, крохмаль, трагакант, похідні целюлоза, поліетиленгліколі, силікони, бентонити, кремнієва кислота, тальк і оксид цинку або їх суміші. Порошки і аерозолі можуть містити, в доповнення до заявленої композиції, наповнювачі, такі як лактоза, тальк, кремнієва кислота, гідроксид алюмінію, силікати кальцію і поліамідний порошок або суміші цих речовин. Спрей може додатково містити звичайні розпилювальні речовини, такі як хлорфторвуглеводні і леткі незаміщені вуглеводні, такі як бутан і пропан. 12 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Композиції і сполуки даного винаходу можна альтернативно вводити аерозолем. Це досягається шляхом приготування водного аерозолю, ліпосомального препарату або твердих частинок, що містить сполуку. Може бути використана неводна (наприклад, фторований розпилювальний засіб) суспензія. Також можуть бути використані ультразвукові розпилювачі, оскільки вони мінімізують схильність агента до зсуву, який може привести до руйнування сполук, що містяться в заявленій композиції. Як правило, водний аерозоль отримують шляхом утворення водного розчину або суспензії заявленої композиції разом із звичайними фармацевтично прийнятними носіями і стабілізаторами. Носії і стабілізатори змінюються залежно від вимог конкретної заявленої композиції, але, як правило, включають неіоногенні поверхнево-активні речовини (Твіни, Плюроніки або поліетиленгліколь), нетоксичні білки як сироватковий альбуміни, складні ефіри сорбітану, олеїнова кислота, лецитин, амінокислоти, такі як гліцин, буферні розчини, солі, цукри або цукрові спирти. Аерозолі, як правило, готують з ізотонічних розчинів. Фармацевтичні композиції даного винаходу, придатні для парентерального введення, включають в себе заявлену композицію з одним або декількома фармацевтично прийнятними стерильними ізотонічними водними або неводними розчинами, колоїдними розчинами, суспензіями або емульсіями, або стерильними порошками, які можуть бути відновлені в стерильні ін'єкційні розчини або колоїдні розчини безпосередньо перед використанням, які можуть містити антиоксиданти, буферні розчини, бактеріостатичні агенти, розчинені речовини, які доводять лікарську форму до ізотонічного стану з кров'ю передбачуваного одержувача, або суспендуючих, або загущувальних засобів. Приклади прийнятних водних і неводних носіїв, які можуть бути використані в фармацевтичних композиціях винаходу, включають воду, етанол, поліоли (такі як гліцерин, пропіленгліколь, поліетиленгліколь, і тому подібне), і прийнятні суміші з них, рослинні олії, такі як оливкова олія, і ін'єкційні органічні складні ефіри, такі як етилолеат і циклодекстрини. Належна текучість може бути забезпечена, наприклад, використанням покриваючих матеріалів, таких як лецитин, шляхом підтримування необхідного розміру частинок у випадку колоїдних розчинів, а також за рахунок використання поверхнево-активних речовин. Ефективність лікування заявленими композиціями може бути визначена кваліфікованими фахівцями. При розкритті суті винаходу, в якому композиції описуються, як такі, що мають, включають або містять специфічні компоненти, передбачається, що композиції також складаються в основному з або складаються з перерахованих компонентів. Подібним чином, коли способи описуються як такі, що мають, включають або містять конкретні стадії, ці способи також складаються в основному з або складаються з перерахованих стадій обробки. Якщо не вказане інше, порядок стадій або порядок для виконання певних дій неістотний доти, доки винахід залишається в робочому стані. Більше того, якщо не вказано інше, дві або декілька стадій або дій може проводитися одночасно. Приклади Сполуки, розкриті в даному винаході, можуть бути підготовлені декількома способами, добре відомими фахівцям в галузі органічного синтезу. Більш конкретно, сполуки винаходу можуть бути отримані з використанням реакцій і методик, розкритих в даному винаході. При розкритті синтетичних способів, описаних нижче, потрібно розуміти, що всі пропоновані умови реакції, в тому числі вибір розчинника, атмосфера реакції, температура реакції, тривалість експерименту і процедура обробки, можуть бути стандартними умовами для цієї реакції, якщо не вказане інше. Фахівцям в галузі органічного синтезу зрозуміло, що функціональні групи, які є на різних частинах молекули, повинні бути сумісні з реагентами і пропонованими реакціями. Замісники, не сумісні з умовами реакції, будуть очевидні для фахівця в даній галузі, тому вказані альтернативні способи. Вихідними матеріалами для прикладів є або комерційно доступні, або матеріали, що легко отримуються стандартними способами з відомих речовин. Приклад 1 Отримання N-ацетил-(R)-(-)-3-(4-амінофеніл)-2- метоксипропіонової кислоти (Nацетил E2); Сполука А До (R)-(-)-3-(4-амінофеніл)-2-метоксипропіонової кислоті (40 г) в 0,5 л скляний реактор додають етилацетат (80 г) і ангідрид оцтової кислоти (62,8 г). Суміш перемішують при 90 °C протягом 1 години. Після охолоджування розчинник видаляють вакуумною перегонкою до маслянистого залишку. До цього залишку додають воду (120 г) і етилацетат (120 г). Після перемішування протягом 10 хв при температурі 35 °C шари розділяють і видаляють водний шар. Шар органічного розчинника видаляють вакуумною дистиляцією. Потім додають ацетон (120 г) і нагрівають отриману суміш до повного розчинення. Розчин охолоджують до 0 °C, а осаджений продукт збирає фільтрацією. Тверду речовину промивають ацетоном (20 г), і сушать при температурі 65 °C, отримуючи 26 г вказаної в заголовку сполуки. 13 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Приклад 2 In vitro випробування органної культури волосяного фолікула Для модельного випробування мікропрепарованих орган-культурних фолікул волосся використовують Філпотт систему. Волосяні фолікули і шкірні штампи розділяють на 4 групи (3 волосяних фолікула на ямку), інкубування з випробуваною речовиною "Сполука А" при різних концентраціях протягом 6 днів. У нульовий день проводять вимірювання мікропрепарування довжини волосся. На 1-й день середовище змінюється, і додають сполуку А (з вимірюванням довжини волосся). На 3-й день середовище змінюється, і додають сполуку А (з вимірюванням довжини волосся). На 6-й день вимірюють довжину волосся і роблять висновок. На фігурі 1 показано, що сполука А стимулює подовження волосяного стрижня при низькій дозі сполуки А. Використання гістоморфометрії Фонтана-Массон/фарбування меланіну при виготовленні зрізів із заморожених клітин, на фігурі 2 показана стимуляція сполукою А пігментації людського волосяного фолікула. На фігурі 3 представлена гістохімія Фонтана-Массон волосяного фолікула при використанні сполуки А. Також проводять Ki-67/Tunel фарбування волосяних фолікул за допомогою флуоресцентного фарбування. Фігура 4 показує Ki67/Tunel імуногістоморфометрію фолікула і вказує на те, що високі дози сполуки А стимулюють як проліферацію, так і апоптоз кератиноцитів людської матриці волосся. При низьких дозах сполуки А існує значне підвищення експресії K15 в слабкому волосяному фолікулу в той час як оброблена шкіра не показує ніякої вимірної експресії (див. фігуру 5). Фігура 6 свідчить про значне підвищення експресії клітин K19 в слабкому волосяному фолікулу при низькій концентрації, в той час як концентрація, збільшена в 10 разів, показує падіння регуляції (Фігура 6). Шкіра не показує ніякої вимірної експресії. Приклад 3 Кератиноцити Щоб оцінити можливу токсичну або цитостатичну дію речовин при дослідженні, проводять спектрофотометричне випробування (МТТ). Людські первинні кератиноцити, виділені з біопсії шкіри, висівають в ямку 24-ямкового планшета у прийнятному середовищі з додаванням антибіотиків, кальцію і специфічних факторів росту. При злитті близько 70 %, на клітини впливають сполукою А при різних концентраціях (0,1-1-2 мМ) протягом 24 і 48 год. у прийнятному середовищі з додаванням антибіотиків, кальцію, але без факторів росту. Цю умову культивування створюють для всіх подальших експериментів. У кінці обробки роблять тест МТТ. Результати показані на фігурі 7. Сполука А при всіх використаних концентраціях не показала ніякої дії на клітинну життєздатність. Приклад 4 ФНО-альфа Аналіз інгібування сполуки А мРНК індукції протизапального цитокіну ФНО-альфа пероксидом водню Н2О2 проводять в реальному масштабі часу ПЛР-РВ. Кератиноцити висівають в чашки 6 см/Ø. При злитті 80 % клітини обробляють перекисом водню Н2О2 (300 мкM) в присутності сполуки А при трьох концентраціях (0,1-0,1-0,5 мМ) протягом 6 год. У кінці обробки клітини лізують в буфері для лізису і ізолюють і піддають подальшій ретротранскрипції РНК. Сполука А, як виявляється, здатна пригнічувати експресію мРНК ФНО-α, індуковану пероксидом водню Н2О2 при двох високих дозах (0,1 мМ; 0,5 мМ). Вища доза демонструє повне інгібування протизапальних цитокінів з ефектом, схожим з троглітазоном (Тг). (Фігура 8) Приклад 5 Інгібування мРНК експресії ІЛ-6, індукованої наявністю γ-інтерферону. Аналіз інгібування сполукою А мРНК індукції протизапального цитокіну ІЛ-6 γ-інтерфероном проводять в реальному масштабі часу ПЛР-РВ. Кератиноцити висівають в чашки 6 см/Ø. При злитті 80 % клітини обробляють γ-інтерфероном (30 нг/мл) в присутності сполуки А при трьох концентраціях (0,01-0,1-0,5 мМ) протягом 6 год. У кінці обробки клітини лізують в буфері для лізису і ізолюють і піддають подальшій ретротранскрипції РНК. Результати (як показано на фігурі 9) показують здатність сполуки А інгібувати експресію цитокіну, індуковану наявністю γінтерферону, який, як виявилося, не залежить від дози. Приклад 6 Інгібуюча здатність активації ядерного фактора каппа-В (NF-kB), індукована наявністю пероксиду водню Н2О2. Оцінку інгібування сполукою А активації ядерного фактора каппа-В (NF-kB), індукованої наявністю пероксиду водню Н2О2, роблять за допомогою аналізу в цитофлюориметрії. Кератиноцити висівають в ямки 12-ямкового планшета. При злитті 80 % клітини обробляють пероксидом водню Н2О2 (300 мкМ) в присутності сполуки А при трьох концентраціях (0,01-0,10,5 мМ) протягом 1 год. У кінці обробки клітини поміщають в параформальдегід, пермеабілізують в метанолі, і потім інкубують в присутності специфічного антитіла субодиниці p65. Сполука А показує інгібуючий вплив на активацію і подальшу транслокацію NF-kB залежно від дози (Фігура 10). Приклад 7 Інгібування експресії білка ІЛ-6, індукованої наявністю ліпополісахариду (ЛПС) 14 UA 105037 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Аналіз інгібування сполукою А індукції білка ІЛ-6 ЛПС (ліпополісахаридом) роблять з комплектом ELISA (імуноферментний аналіз). Кератиноцити висівають в ямки 24-ямкового планшета. При злитті 80 % клітини обробляють ЛПС (10 мкг/мл) в присутності сполуки А при трьох концентраціях (0,01-0,1-0,5 мМ) протягом 24 год. У кінці обробки супернатант декантують, центрифугують для видалення будь-якого клітинного детриту і витримують при -80 °C до часу проведення аналізу. Кількість ІЛ-6, присутнього в супернатанті, приводять до норми концентрації білка самого зразка. Результати (Фігура 11) показують здатність сполуки А інгібувати залежно від дози експресії білка запальних цитокінів на стадії вивчення. Приклад 8 - Людські себоцити Щоб оцінити можливу токсичну або цитостатичну дію речовин при дослідженні, проводять спектрофотометричне випробування (МТТ). Себоцити висівають в ямки 24-ямкового планшета у прийнятному середовищі з додаванням антибіотиків, кальцію і ЕФР (епідермальний фактор росту). При злитті близько 70 % на клітини впливають сполукою А при різних концентраціях (0,10,5-1-2 мм) протягом 24 і 48 год. У кінці обробки роблять тест МТТ. Сполука А при всіх використаних концентраціях не показала ніякої дії на клітинну життєздатність. (Фігура 12) Приклад 9 Оцінка здатності сполуки до інгібування себогенезу, індукованого подразниками ліпідного типу (Лінолева кислота, Тестостерон) Аналіз інгібування (сполукою А) себогенезу, індукованого обробкою лінолевою кислотою (ЛК) і тестостероном (ТСТ), оцінюють спектрофлуориметрією з використанням нільського червоний як селективного маркера внутрішньоклітинних ліпідів (аналіз нільським червоним). Себоцити висівають в ямки 24-ямкового планшета. На наступний день їх позбавляють сироватки (2 %) і після 24 годин їх подразнюють протягом наступних 24 годин ЛК-тою (10-4 М), ТСТ-ном (20 нМ) в присутності або за відсутності А (1 мМ). У кінці обробки себоцити забарвлюють нільським червоним. Кількісний аналіз роблять за допомогою спектрофлуориметрії, яка дає можливість провести відмінність між нейтральними ліпідами і полярними ліпідами на основі різних довжин хвиль збудження і емісії. Отримані дані показують, що обробка ЛК-тою здатна індукувати синтез ліпідів і що комбінована обробка ЛК + ТСТ ще більше збільшує цей ефект. Наявність сполуки А, як виявилося, здатно знижувати дію ліпідогенного подразника. (Фігура 13). Приклад 10 Оцінка здатності до інгібування себогенезу, індукованого подразниками ліпідного типу (Лінолева кислота, Тестостерон): оцінка жирних кислот і сквалену. Для того щоб оцінити більш детально інгібування себогенезу сполукою А, індукованого ЛКтою і ТСТ-ном, проводять аналізи на ліпідному екстракті себоцитів з використанням газової хроматографії в поєднанні з мас-спектрометрією (ГХ-МС). Себоцити обробляють по схемі, описаній для аналізу нільським червоним. У кінці обробки клітини видаляють, і потім за допомогою органічних розчинників проводять екстракцію ліпідів. Одну частину екстракту використовують для аналізу на склад жирних кислот, в той час як іншу частину використовують для визначення кількості сквалену, ліпідної характеристики шкірного сала. Аналіз жирних кислот показав, що дія ліпідогенного подразника, індукованого обробкою ЛК-тою і ЛК + ТСТ, зменшується при наявності А (Фігура 14А). Ці результати підтверджуються аналізом сквалену. (Фігура 14B) Приклад 11 Оцінка здатності до інгібування себогенезу, індукованого подразниками ліпідного типу (Лінолева кислота, Тестостерон) Аналіз інгібування сполукою А себогенезу, індукованого обробкою лінолевою кислотою (ЛК) і тестостероном (ТСТ), оцінюють спектрофлуориметрією з використанням нільського червоного як селективного маркера внутрішньоклітинних ліпідів (аналіз нільським червоним). Себоцити висівають в ямки 24-ямкового планшета. На наступний день їх позбавляють сироватки (2 %) і після 24 годин їх подразнюють протягом наступних 24 годин ЛК-тою (10-4 М), ТСТ-ном (20 нМ) в присутності або за відсутності сполуки А (1 мМ). У кінці обробки себоцити забарвлюють нільським червоним. Кількісний аналіз роблять за допомогою спектрофлуориметрії, яка дає можливість провести відмінність між нейтральними ліпідами і полярними ліпідами на основі різних довжин хвиль збудження і емісії. Отримані дані (Фігура 15) показують, що обробка ЛК-тою здатна індукувати синтез ліпідів і що комбінована обробка ЛК + ТСТ ще більше збільшує цей ефект. Наявність А, як виявилося, здатна знижувати дію ліпідогенного подразника. Ніяких відмінностей не спостерігається відносно часу обробки А. Посилальний матеріали Всі публікації і патенти, згадані в даному винаході, в тому числі перераховані нижче, включені тим самим як посилання у всій їх повноті, таким чином, щоб кожна індивідуальна публікація або патент були спеціально і індивідуально включені як посилання. У випадку 15 UA 105037 C2 5 10 конфліктної ситуації, дана заявка, що включає будь-які визначення в даному винаході, буде регулювати це. Еквіваленти Оскільки конкретні варіанти здійснення заявленого винаходу були обговорені, вищезазначений опис винаходу носить ілюстративний, а не обмежувальний характер. Багато змін винаходу стануть очевидними для кваліфікованих фахівців в даній галузі після розгляду даного опису винаходу. Повний об'єм винаходу повинен визначатися посиланням на формулу винаходу, разом з їх повним спектром еквівалентів, а також описом винаходу нарівні з такими змінами. Якщо не вказане інше, всі числа, які виражають кількості інгредієнтів, умови реакції і т. д., що використовуються в описі і в формулі винаходу, потрібно розуміти як змінні у всіх випадках терміном "приблизно". Відповідно, якщо не вказано протилежне, числові параметри, викладені в цьому описі винаходу і прикладеній формулі винаходу, є наближеннями, які можуть варіюватися залежно від необхідних властивостей, які прагне отримати даний винахід. 15 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 20 1. Спосіб лікування або ослаблення патологічного стану волосся у піддослідного, який потребує цього, що включає введення піддослідному ефективної кількості композиції, що включає сполуку, представлену формулою І: O R4 O O R5 X R3 N R2 25 30 35 O R1 ,I в якій X являє собою (СН2)n, де n дорівнює 1; R1 вибирають з групи, що складається з С1-С6алкілу; R2 являє собою водень; R3 являє собою водень; R4 являє собою водень; R5 являє собою метил або етил; або фармацевтично прийнятні солі, або відповідні N-оксиди, і наповнювач. 2. Спосіб за п. 1, в якому патологічний стан, пов'язаний з волоссям, являє собою депігментацію волосся, обмежений ріст волосся або коротке волосся, випадання волосся, вітиліго або алопецію. 3. Спосіб за п. 2, в якому алопеція вибирається з групи, що складається з анагенної алопеції, телогенової алопеції або вогнищевої алопеції. 4. Спосіб стимулювання росту волосся, що включає введення піддослідному, який потребує цього, ефективної кількості композиції, що містить сполуку, представлену формулою І: 16 UA 105037 C2 O R4 O O R5 X R3 N R2 5 10 15 O R1 ,I в якій X являє собою (СН2)n, де n дорівнює 1; R1 вибирають з групи, що складається з С1-С6алкілу; R2 являє собою водень; R3 являє собою водень; R4 являє собою водень; R5 являє собою метил або етил; або фармацевтично прийнятні солі, або відповідні N-оксиди, і наповнювач. 5. Спосіб за будь-яким з пп. 1-4, в якому композиція вводиться місцево. 6. Спосіб за будь-яким з пп. 1-5, в якому композиція є фармацевтично або косметично прийнятною. 7. Спосіб за будь-яким з пп. 1-6, в якому композиція додатково містить засіб, стимулюючий волосся. 8. Спосіб за будь-яким з пп. 1-7, що додатково включає введення засобу, стимулюючого волосся. 9. Спосіб за будь-яким з пп. 1-8, в якому R1 являє собою метил. 10. Спосіб за будь-яким з попередніх пунктів, в якому сполука являє собою N-ацетил-(R)-(-)-3-(4амінофеніл)-2-метоксипропіонову кислоту. 20 17 UA 105037 C2 18 UA 105037 C2 19 UA 105037 C2 20 UA 105037 C2 21 UA 105037 C2 22 UA 105037 C2 23 UA 105037 C2 Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 24