Молекулярний комплекс, що має протипухлинні властивості

Молекулярний комплекс загального зображення: Bacillus polymyxa 102 х 2 O CH3 HN N Cl O C C Br O HN O N CH3 , (11) UA ються у якості лікарських засобів при лікуванні онкологічних захворювань. Після синтезу похідних урацилу, а особливо, 5-фторурацилу та фторафуру, які продемонстрували високу протипухлинну активність, значно зросла кількість досліджень з цього напрямку. Починаючи з 1981 року в світі щорічно публікують біля 100 наукових робіт та патентів, які стосуються методів синтезу, вивчення будови й хімічних властивостей урацилу та його похідних. За останні роки кількість публікацій на дану тему зросла до 130-150 на рік. Серед них біля половини присвячена 5-фторурацилу та сполукам, які створені на його основі. Стало відомо, що пухлини використовують молекули урацилу активніше, ніж нормальні клітини. Оскільки ван-дер-ваальсові радіуси водню та фтору близькі, можна очікувати, що 5-фторурацил (або його похідне) буде виконувати роль субстрату та/або інгібітору ферментів і буде переважно поглинатися тканинами пухлини. З іншого боку, молекули 5(6)-заміщеного урацилу та його похідних, інших галогеновмісних ге (19) Корисна модель відноситься до медицини, а саме до онкофармакології. Молекулярний комплекс: бактеріальний лектин Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU-1,1’-(2"-бром-2"-хлоретеніл)-біс-(6метилурацил) (далі молекулярний комплекс) має виражену протипухлинну активність, яка досліджена на моделях експериментального пухлинного зросту різного гістогенезу: Лімфосаркомі Пліса, Карциномі Герена, Саркомі 45. Вказана властивість дозволяє передбачити можливість використання отриманого молекулярного комплексу в практичній медицині, а саме, в онкології. Структурні аналоги (молекулярні комплекси бактеріальних пектинів з біциклічними адуктами), які мають протипухлинну активність, не відомі (літературний опис відсутній). Однак, один із складових молекулярного комплексу - біциклічний адукт 1,1’-(2"-бром-2"хлоретеніл)-біс-(6-метилурацил) має молекулу, яка містить у собі два залишки молекул 6метилурацилу та фрагмент молекули фторотану (2-бром-1,1,1-трифтор-2-хлоретан), які застосову 12266 (13) U що має протипухлинні властивості. 3 12266 тероциклів, здатні виконувати роль фтор(галоген)вмісних синтонів в органічному синтезі з метою створення оригінальних біологічноактивних молекул. Введення фтор(галоген)вмісних фармакофорів в гетероциклічну молекулу призводить до підвищення розчинності сполук в ліпідах та робить лікарські засоби ефективнішими у зв'язку із легкістю їх транспорту в організмі [1, 2]. Для створення молекулярного комплексу було відібрано один з найбільш активних продуцентів позаклітинних лектинів: сапрофітна культура Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU. Раніше з культуральної рідини одержано препарати позаклітинних лектинів з високою питомою активністю (1323216845 ГАО), виходом по активності до 97% та ступеню очистки від 20,7 до 28,8 раз. Препарати лектинів уявляють собою глікопротеїни з характерним N-глікозидним типом зв'язку в молекулі, в якій білкова частина зв'язується з вуглеводною через аспарагін [3]. Препарати позаклітинних сіалоспецифічних лектинів сапрофітних культур бацил з високою гемаглютинуючою активністю, вузькою вуглеводною специфічністю та здатністю розпізнають не тільки типи і форми сіалових кислот, але й їх ізомери та зв'язки з субтермінальним вуглеводом, що дозволяє використовувати їх в якості базисних речовин для конструювання медикобіологічних препаратів направленої дії. В основу винаходу поставлено дослідження протипухлинної активності молекулярного комплексу: бактеріальний лектин Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU - 1,1’-(2"-бром-2"-хлоретеніл)-біс-(6метилурацил) на моделях експериментального пухлинного зросту різного гістогенезу: Лімфосаркомі Пліса, Карциномі Герена, Саркомі 45. Молекулярний комплекс: бактеріальний лектин Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU - 1,1'-(2"-бром2"- хлоретеніл)-біс-(6-метилурацил) отримували простим механічним перемішуванням двох компонентів у співвідношенні 1:1. Експерименти проведені на білих нелінійних мишах та щурах з масою тіла 22 2 та 160 20г відповідно. Зазначений молекулярний комплекс, розчинений у фізіологічному розчині, вводився одно 4 разово, підшкірне. Критерієм оціни вважався відсоток гальмування зросту пухлини. Вивчення параметрів гострої токсичності проводилось у дослідах на білих нелінійних мишах. Результати досліду обраховувались у альтернативній формі на 14 добу після введення. Статистична обробка проведена по В.Б. Прозоровському та ін. [4], (табл.1). Експерименти показали, що молекулярний комплекс відноситься до середньо-токсичних сполук, ЛД50 її становить 335мг/кг. Оскільки структурних аналогів молекулярного комплексу в літературі не описано, препаратом порівняння став відомий протипухлинний лікарський засіб 5-фторурацил. 5-Фторурацил характеризується наступними значеннями зросту пухлин: - гальмування росту Лімфосаркоми Пліса 55%; - гальмування росту Саркоми 45 - 18,4%; - ЛД50 5-фторурацилу складає 372мг/кг (підшкірно) [4]. Прийнятий критерій значення для досліджуваної речовини з протипухлинною активністю - гальмування зросту пухлини - понад 50% [5], Як показали досліди (табл.2) молекулярний комплекс має виражену здатність гальмувати експериментальний пухлинний ріст, перевищуючи за протипухлинною дією у проведених дослідах препарат порівняння - 5-фторурацил. Виражена протипухлинна активність молекулярного комплексу та високий відсоток первинного вилікування тварин (62,5 %) зареєстровані на Лімфосаркомі Пліса. Таким чином, можна зробити висновок, що молекулярний комплекс має високу протипухлинну активність на деяких штамах пухлинної хвороби, яка значно перевищує протипухлинну активність препарату порівняння 5-фторурацилу на вказаних штамах пухлин, що дозволяє розглядати молекулярний комплекс як фізіологічне активний з перспективою подальшого вивчення за вимогами до потенційних протипухлинних засобів для лікування людини. Ознаки способу Таблиця 1 - Параметри токсичності молекулярного комплексу: бактеріальний лектин Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU - 1,1'-( 2"-бром-2"- хлоретеніл)-біс-(6-метилурацил) загального зображення: O CH3 Bacillus polymyxa 102 х HN N Cl O C Br O HN в порівнянні з 5-фторурацилом: O C N CH3 5 12266 Назва сполуки, препарат порівняння Молекулярний комплекс: бактеріальний лектин Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU - 1,1’-(2"-бром-2"хлоретеніл)-біс-(6-метил-урацил) 5-Фторурацил 6 Спосіб введення ЛД50 (миши,мг/кг) Підшкірно 335 Підшкірно 372 Таблиця 2 - Протипухлинна активність молекулярного комплексу: бактеріальний лектин Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU - 1,1"-(2"-бром-2"-хлоретеніл)-біс-(6-метилурацил) (далі молекулярний комплекс) на Лімфосаркомі Пліса, загального зображення: O CH3 Bacillus polymyxa 102 х HN N Cl O C C Br O HN N CH3 O Середня Назва речовиДоза, мг/кг вага пухлин, ни контроль, г Середня вага пухлин, дослід, г молекулярний комплекс 1,8±0,09 24 13,9±1,93 Таким чином, відповідність молекулярного комплексу, який заявляється, вимогам до сполук з вираженою протипухлинною активністю, що перевищує активність 5-фторурацилу (препарату порівняння), дозволяє розглядати молекулярний комплекс як фізіологічне активний та перспективний для поглибленого вивчення його специфічної активності з метою розробки лікарського засобу для лікування онкологічних захворювань людини. Завданням винаходу є дослідження протипухлинної активності молекулярного комплексу: бактеріальний лектин Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU-1,1’-(2"-бром-2"-хлоретеніл)-біс-(6метилурацил) на моделях експериментального пухлинного зросту різного гістогенезу: Лімфосаркомі Пліса, Карциномі Герена, Саркоми 45. Вивчення протипухлинної активності молекулярного комплексу: бактеріальний лектин Bacillus polymyxa 102 (1+2) KGU - 1,1'-(2"-бром-2"хлоретеніл)-біс-(6-метилурацил) проводилося у відділі онкофармакології Інституту фармакології та токсикології АМН України. Комп’ютерна верстка А. Попік Гальмування Індекс ефективросту пухлин, % ності 62,5 Селезінковий коефіцієнт 2,67 0,71 Література: 1. Соединения фтора. Синтез и применение. / Под ред. Н. Исикава. - М.: Мир, 1990. - Гл.5. С.183-265. 2. Ягупольский Л.М. // Ароматические и гетероциклические соединения с фторсодержащими заместителями. - Киев: Наукова думка, 1988. С.90-105. 3. Welchinskaya Helena V., Kuzmenko Ivan I., Kudryavtseva Irine G.,Sharykina Nadezda I., Kovalenko Emma A., Podgorsky V.S. // Intern. J. ofBiolog. Macromol. - 1999. - 26. - P.243-248. 4. Прозоровський В.Б., Прозоровський В.П., Демченко В.М. Експрес метод визначення середньої ефективності дози та її помилки. // Фармакол. та токсикол. - 1978. - Т.41, №4. - С.407-509. 5. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США (под ред. З.П.Софьиной, А.Б.Сыркина (СССР); А.Голдина, А.Кляйна (США). - М.: Медицина, 1979. - 296с. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601