Спосіб прогнозування ризику розвитку раку шлунка у осіб, інфікованих h.pylori

1. Спосіб прогнозування ризику розвитку раку шлунка у осіб, інфікованих Н.руlоrі, який відрізняється тим, що підвищення ризику констатують при наявності тенденції до зниження (на 33 % та більше) кількості лейкоцитів, лімфоцитів субпопуляцій CD3, CD4, CD8 та CD16, секреторного показника SIgA, показників реакції бласттрасформації лімфоцитів РБТЛ та НСТ-тесту при одночасному збільшенні (на 33 % та більше) рівнів сироваткових імуноглобулінів IgG, IgA та циркулюючих імунних комплексів ЦІК. 2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що імунологічне дослідження проводять щонайменше двократно, а за умови відмінності отриманих значень на величину, що складає більше ніж 30 % від значення цього параметру в нормі, щонайменше трикратно. Корисна модель належить до гастроентерології та онкології і стосується способу прогнозування ризику розвитку раку шлунку в певній категорії пацієнтів, а саме в осіб, інфікованих Helicobacter pylori (далі HP). Чисельні клінічні, експериментальні та епідеміологічні дані, отримані в останні десятиріччя свідчать про наявність зв'язку між колонізацією HP слизової оболонки шлунку та ініціацією канцерогенезу. Зокрема доведено, що існує жорстка кореляція між інфікованістю на HP та захворюваністю на рак шлунку [1, 2, 3]. Показано, що ерадикаційна терапія, у певних випадках здатна гальмувати прогресування передракових станів (атрофії, метаплазії та дисплазії епітелію слизової оболонки шлунку) [4, 5, 6]. Встановлені закономірності патогенезу цієї інфекції дозволяють віднести HP до канцерогенів [7, 8, 9]. Зокрема виявлено, що інфікування HP призводить до надмірної активації процесів клітинної проліферації в генеративній зоні слизової оболонки стінки шлунку (відсоток клітин, що знаходяться в S-фазі клітинного циклу зростає з 33 до 79%). За таких умов знижується ефективність внутрішньоклітинних механізмів репарації пошкоджень ДНК та порушується баланс між проліферацією та апоптозом. Оскільки, відпо відно до сучасних уявлень, універсальним механізмом онкогенезу є трансформація хронічного мітогенезу в мутагенез, - HP має класичні ознаки канцерогену (на сьогодні це єдиний бактеріальний агент, що має такий статус). Попри все наведене вище, HP є лише одним з можливих промоутерів злоякісної трансформації: онкопатологія виникає лише у 1-3% HP інфікованих, а 20-30% випадків захворювання на рак шлунку взагалі не пов'язано з цією інфекцією. Тим не менш, розповсюдженість HP (загальний рівень інфікованості людської популяції перевищує 50% [10]) робить врахування онкогенного потенціалу цієї інфекції актуальною медичною проблемою. Відомий спосіб прогнозування раку шлунку за зростанням сироваткового рівня пухлиноасоційованого інгібітора трипсину (ТАТІ - tumourassociated trypsin inhibitor, 6-kDa), що свідчить про активацію механізмів пригнічення тканинної деградації [11]. Цей спосіб, як і більшість відомих способів прогнозування ризику розвитку раку, що основані на детекції маркерів, які експресуються в пухлинній тканині [9, 12, 13], дозволяють прогнозувати скоріше виявлення вже існуючого онкопроцесу, ніж ризик його виникнення. (19) UA (11) 13903 (13) U (21) u200510705 (22) 14.11.2005 (24) 17.04.2006 (46) 17.04.2006, Бюл. № 4, 2006 р. (72) Чернявський Віталій Ілліч, Бірюкова Світлана Василівна, Крестецька Світлана Леонідівна, Мартинов Артур Вікторович, Смілянська Майя Володимирівна, Біляєвська Світлана Юліївна, Перемот Світлана Дмитрівна, Драч Максим Іванович, Клімов Олег Іванович (73) Чернявський Віталій Ілліч, Бірюкова Світлана Василівна, Крестецька Світлана Леонідівна, Мартинов Артур Вікторович, Смілянська Майя Володимирівна, Біляєвська Світлана Юліївна, Перемот Світлана Дмитрівна, Драч Максим Іванович, Клімов Олег Іванович, ІНСТИТУТ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА ІМУНОЛОГІЇ ІМ. І.І. МЕЧНИКОВА АМН УКРАЇНИ 3 13903 4 Відомий спосіб ранньої діагностики раку шлунПоставлена задача вирішена наступним чику [14], що базується на детекції підвищеного рівня ном. експресії циклоксігенази (Cyclo-oxygenase-2 (COX1. Виявлені характерні ознаки порушення іму2)) та/або mRNA Cox-2), в зразках тканини слизонного статусу (1C) у хворих на рак шлунку. вої оболонки шлунку. Цей показник має безпосе2. Проведено дослідження змін імунного стареднє відношення до патофізіології процесів запатусу НР-інфікованих осіб, що не страждають на лення, репарації та канцерогенезу. Відповідно до рак шлунку. корисної моделі, виявлення надмірної експресії 3. Визначено основні тенденції розвитку імуСох-2 свідчить про підвищений ризик розвитку нологічних порушень та найбільш інформативні інтестинального типу раку шлунку. Отриманню прогностичні критерії. бажаного технічного результату заважає той факт, Порівняльний аналіз стану імунітету (СІ) у осіб що цей показник підвищується під впливом НРз HP - обумовленими хронічним гастритом, виразінфекції незалежно від наявності передракових ковою хворобою та раком шлунку дозволило вистанів. До недоліків цього методу слід також відявити наступні прогностично цінні параметри: кільнести його інвазивність та рівень доступності в кість лімфоцитів (Л), кількісний та якісний склад умовах вітчизняної системи організації медичного популяції лімфоцитів (CD4 ,CD8, CD16), реакція сервісу. бласттрансформації лімфоцитів у відповідь на Найближчим (за рівнем доступності) аналогом антигенний стимул (РБТЛ), рівні сироваткових імурішення, що заявляється, є спосіб прогнозування ноглобулінів (IgA, IgG), секреторний IgA (SIgA), високого ризику розвитку рака шлунку у осіб, інфірівень циркулюючих імунних комплексів (ЦІК), факованих HP на основі анамнестичних даних стосогоцитарна активність за показником НСТ-тесту вно існування цієї патології в родині. Цей метод (НСТ). Означений перелік параметрів дозволяє враховує можливу наявність генетичної схильності значно скоротити програму імунологічного досліта високу вірогідність інфікованості членів однієї дження та є цілком доступним для здійснення в сім'ї одним штамом, що може мати підвищені паумовах клініко-діагностичної лабораторії лікувальтогенні та канцерогенні властивості. Безумовною ного заклада з мінімальним рівнем забезпечення перевагою цього підходу є і відсутність будь яких обладнанням та реактивами. витрат на прогнозування, але низький рівень об'єДля більш лаконічного викладення основних ктивності та диференційованості підходу знижує тенденцій та діапазонів коливань наведених пройого цінність. Крім того, він не придатний для оцінгностичних критеріїв застосовано формули розлаки ризику розвитку раку шлунку у НР-інфікованих дів імунної системи (ФРІС), в яких знаками „+/-" осіб без обтяженого родинного анамнезу. відображено тенденцію до збільшення/зменшення В основу корисної моделі було поставлено запоказника, цифрами позначено ступінь зміни ведачу: розробити спосіб прогнозування ризику розличини показника у порівнянні із нормою (1-66%). За обраними параметрами об'єктивних критеріїв, що характеризують стан особливості та діапазони змін імунного статусу імунологічної резистентності організму, в якому за НР-інфікованих осіб з відмінним рівнем ризику рахунок визначення найбільш інформативних імухарактеризуються наступними ФІРС: нологічних показників, забезпечити об'єктивність Л1, CD41-, CD81-, IgG1+, JgA2+, SIgA2та достовірність прогнозу. (відповідає низькому рівню ризику розвитку Для пояснення поставленого завдання та раку шлунку) шляхів його розв'язання вважаємо за необхідне Л1-, CD42-, CD82-, IgG2+, IgA2+, SIgA2акцентувати увагу на наступному. Однією з ключо(відповідає підвищеному ризику розвитку раку вих функцій імунної системи, що забезпечує підтшлунку) римку біологічного гомеостазу, є своєчасне виявЛ2-, CD43-, CD83-, CD162-, РБТЛ2-, IgG3+, IgA2+, лення та елімінація дефектних, потенційно SigA3-, ЦІК3+, НСТ 2злоякісних клітин. В організмі клінічно здорової (відповідає надзвичайно високому ризик розлюдини рівень цитогенетичних змін варіює та мовитку раку шлунку). же суттєво зростати під впливом різноманітних Таким чином, до суттєвих ознак способу, що фізичних, хімічних або біотичних факторів. І, якщо заявляється належать: ступінь зменшення загальадекватна реакція імунної системи на спонтанний ної кількості та функціональної активності лейкомутагенез лежить в межах її фізіологічного наванцитів та лімфоцитів субпопуляцій CD3, CD4, CD8, таження, то реакція на індукований (зокрема хроCD16, підвищення рівня сироваткових IgG, IgA та нічною НР-інфекцією), може призвести до функціЦІК, при зниженні SIgA. Підвищення ризику виникональної декомпенсації із відповідними наслідками нення раку шлунку у осіб, інфікованих HP констадля організму. За таких умов вірогідність виниктують за наявності тенденції до зниження кількіснення злоякісного новоутворення шлунку у людиних, якісних та функціональних параметрів, що ни, інфікованої HP визначається, на наш погляд, характеризують стан клітинної ланки імунітету, при головним чином, компенсаторним потенціалом та одночасному виявленні ознак підвищення функціфункціональним станом імунної системи. ональної активності гуморальної ланки імунітету, Проведені дослідження були спрямовані саме за виключенням системи забезпечення синтезу на виявлення інформативних критеріїв оцінки змін SIgA. Зокрема, відповідно до способу, що заявляв стані імунітету, що виникають під впливом хроніється, прогнозування підвищеного ризику здійснючної HP інфекції та визначення ознак функціонається за фактом зниження (на 33% та більше) кільної декомпенсації імунної системі у хворих на лькості лейкоцитів, CD3-,CD4-, CD8- та CD 16рак шлунку, асоційований з цим патогеном. лімфоцитів, SIgA, показників РБТЛ та НСТ, при 5 13903 6 одночасному збільшенні (на 33% та більше) IgG, prospective study of patients with atrophic gastritis. IgA та ЦІК. Aliment Pharmacol Ther 2002; 16: 1449 56. Крім того, до суттєвих ознак рішення, що заяв7. Correa P. Helicobacter pylori and gastric ляється належить кратність обстеження (що змеcarcinogenesis. Am J Surg Pathol 1995; 19: S31-43. ншує вплив випадкових коливань імунологічних 8. Tahara E. Molecular mechanism of human параметрів та підвищує достовірність прогнозу). stomach carcinogenesis implicated in Helicobacter Опит застосування методу свідчить про доцільpylori infection. Exp Toxicol Pathol 1998; 50: 375-8. ність щонайменш двократного дослідження кожно9. Nardone G, Rocco A, Vaira D, et al. го з параметрів, а за умови відмінності отриманих Expression of COX-2, mPGE-synthasel, MDR-1 (Pзначень на величину, що складає більш ніж 30% gp), and Bcl-xL: a molecular pathway ofHelicobacter від значення цього параметру в нормі - доцільне 3pylori-related gastric carcinogenesis. J Pathol 2004; кратне обстеження. 202: 305 12. Перелік посилань: 10. Danesh J. Helicobacter pylori infection and 1. Eslick GD, Lim LL, Byles JE, Xia HH, Talley gastric cancer: systematic review of the NJ. Association of Helicobacter pylori infection with epidemiological studies. Aliment Pharmacol Ther gastric carcinoma: a meta-analysis. Am J 1999; 13: 851-6. Marshall BJ, Warren JR. Gastroenterol 1999; 94:2373-9. Unidentified curved bacilli in the stomach of patients 2. Helicobacter and Cancer Collaborative Group. with gastritis and peptic ulceration. Lancet 1984; 1: Gastric cancer and Helicobacter pylori: a combined 1311-5. analysis of 12 case control studies nested within 11. Patent number: CN1250523 Diagnosis of prospective cohorts. Gut 2001; 49: 347 53. early gastric cancer. Applicant: LOCUS GENEX OY 3. Asaka M, Kudo M, Kato M, Sugiyama Т, (FI) Publication date: 2000-04-12. Takeda H. Review article: Long-term Helicobacter 12. Patent number: W00206327 A METHOD pylori infection -from gastritis to gastric cancer. FOR PROGNOSING CANCER AND THE PROTEINS Aliment Pharmacol Ther1998; 12:9-15. INVOLVED Applicant: UNIV NORTHWESTERN (US); 4. Helicobacter pylori eradication to prevent WANG ZHOU (US); XIAO WUHAN (US) Appl.No: gastric cancer in a high-risk region of China: a W02001US22357 20010717; Publication date: 2002randomized controlled trial.Wong ВС, Lam SK, Wong 01-24. WM, Chen JS, Zheng TT, Feng RE, Lai КС, Ни WH, 13. Expression of Tie-1 and 2 receptors, and Yuen ST, Leung SY, Fong DY, Ho J, Ching CK, Chen angiopoietin-1, 2 and 4 in gastric carcinoma; JS; China Gastric Cancer Study Group. immunohistochemical analyses and correlation with Gastroenterology. 2004 Jul;127(l):344-6; clinicopathological factors. Т Nakayama, A Yoshizaki, 5. El-Omar EM, Oien K, Murray LS, et N Kawahara, A Ohtsurul, С Y Wen, E Fukuda, M al.Increased prevalence ofprecancerous changes in Nakashima2 & I Sekine //Histopathology. - Volume 44 relatives of gastric cancer patients: critical role ofH. Issue 3 Page 232 - March 2004. pylori. Gastroenterology 2000;118; P.22-30. 14. Wiksten J-P, Lundin J, Nordling S, Kokkola A, 6. Ito M, Haruma K, Kamada T, et al. Stenman U-H & Haglund C.I I Histopathology, 2005. Helicobacter pylori eradication therapy improves V.46. - P.380. atrophic gastritis and intestinal metaplasia: a 5-year Комп’ютерна верстка В. Мацело Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601