Спосіб прогнозування протікання клімактерію за станом імунорезістентності організму

Изобретение относится к медицине, а более конкретно - к иммунологии и гинекологии и может быть использовано для прогнозирования состояния иммунорезистентности в зависимости от характера климактерия. Известен способ оценки резистентности в период климактерия, заключающийся в определении в крови активных и неактивных нейтрофилов, вычислении на их основе фагоцитарного числа, фагоцитарного индекса и коэффициента завершенности фагоцитоза, определении общего количества лейкоцитов, общего содержания нейтрофилов, активности лизоцима и содержания агглютинина и на основании полученных данных подсчета показателя резистентности для каждого показателя крови, суммирование данных и при общем показателе резистентности ниже 110 определяют сниженную резистентность, а при его значении выше 140 - повышенную резистентность (А.с. СССР №1180000, опубл. 23.09.85, Бюл. №35). Недостатком является то, что данный способ не учитывает содержание эозинофильных клеток крови, которые являются показателем уровня реакции аллергизации. Известен также способ оценки резистентности в период климактерия, включающий забор у обследуемого пробы крови, получении из нее мазка крови и подсчета в мазке содержания эозинофильных клеток, которые характеризуют уровень активности реакции аллергизации (Мянник Г.Г, Оценка динамики иммунологических показателей при некоторых острых стоматологических заболеваниях: Автореф. дисс. … к.м.н. - М., 1987). Недостатком этого способа является то, что при его использовании не учитывается фагоцитарная активность лейкоцитов, являющаяся важным показателем в процессе элиминации продуктов белкового распада, которые вызывают в организме аутоаллергизацию. Наиболее близким к заявляемому способу является способ оценки резистентности организма по уровню циркулирующи х иммунных комплексов в сыворотке крови, который предусматривает определение уровня активности защитной иммунной реакции антиген-антитело и по увеличенному содержанию циркулирующи х иммунных комплексов определяют снижение неспецифической иммунорезистентности в результате накопления в организме аутоантигенов (ЦИКов) (решение о выдаче патента Украины по заявке №94030676 от 30.07.93 - "Способ оценки резистентности организма"). Недостатком указанного способа является то, что он не учитывает уровень напряженности модуляции иммунной реакции, которая характеризует степень активации защитной функции организма. В основу изобретения поставлена задача создания простого и доступного способа прогнозирования течения климактерия путем определения интегральных показателей иммунорезистентности с последующим выявлением их взаимосвязи, обеспечивающая достоверность прогноза. Общим существенным признаком заявляемого способа и прототипа является дифференцированный показатель резистентности которого недостаточно для решения поставленной задачи. Для достоверного прогнозирования течения климактерия был дополнительно использован показатель резистентности учитывающий производительную функцию одной лимфоцитарной клетки в отношении выработки иммуноглобулинов класса Однако абсолютные величины каждого в отдельности показателя и недостаточны для объективной оценки прогноза. Путем экспериментальных исследований была выявлена закономерность коррелятивных изменений, позволяющих объективно прогнозировать течение климактерия. Выявленная закономерность состоит в следующем: при соотношении выше 0,06, а ниже 0,3 прогнозируют физиологическое течение климакса, при соотношении ниже 0,03, а выше 0,6 прогнозируют патологическое течение климакса. Способ осуществляют следующим образом. У обследуемого осуществляют забор пробы крови из концевой фаланги пальца при помощи иглыскарификатора. Для получения мазка крови первую каплю удаляют, а вторую наносят на предметное стекло и получают мазок известным способом. После засыхания мазка его обрабатывают в фиксаторе по Май-Грюнвальду, затем промывают в проточной воде, высушивают и окрашивают краской Романовского - Гимза. В полученном мазке подсчитывают лейкоцитарную формулу (процентное соотношение различных видов лейкоцитов) общепринятым методом. На основании полученных данных определяют количество эозинофилов, входящи х в лейкоцитарную формулу, и общее содержание нейтрофилов. Для определения общего количества лейкоцитов в крови обследуемого параллельно из концевой фаланги пальца при помощи меланжера осуществляют забор крови до отметки 0,5. Затем в этот же меланжер дополнительно вводят до отметки 1,1 разбавляющую жидкость, представляющую собой 3% раствор уксусной кислоты, окрашенный 1%-ным раствором метиленовой сини. Смесь перемешивают, вводят в камеру Горяева и общепринятым методом осуществляют подсчет лейкоцитарных клеток. Для получения сыворотки крови осуществляют забор крови в мерную центрифужную пробирку капельным методом в количестве 0,5мл и получают сыворотку известным способом. Из общего количества полученной сыворотки отбирают 0,05мл для определения уровня циркулирующих иммунных комплексов. Параллельно из общего количества полученной сыворотки отбирают 0,2мл для определения титра нормального агглютинина общепринятым серологическим методом. Для определения активности лизоцима от общего количества полученной сыворотки отбирают 0,1мл и определение ведут нефелометрическим методом. Для определения фагоцитарной активности нейтрофилов-фагоцитов от общего количества отобранной у обследуемого крови отбирают 0,3мл и вносят в пробирку, содержащую 0,1мл 3% раствора цитрата натрия и определяют фагоцитарную активность нейтрофиловфагоцитов. На основании полученных результатов вычисляют фагоцитарное число по формуле где - количество активных нейтрофилов; - количество неактивных нейтрофилов; фагоцитарный индекс по формуле где тел; - количество жизнеспособных микробных - количество нежизнеспособных микробных тел; и коэффициент завершенности фагоцитоза по формуле На основании полученных данных подсчитывают показатель неспецифической резистентности по формуле где (показатели гуморального и клеточного звена неспецифической резистентности организма: 1 - активность лизоцима; 2 - содержание агглютинина; 3 - общее количество лейкоцитов; 4 количество нейтрофилов; 5 - фагоцитарный индекс; 6 фагоцитарное число; 7 коэффициент завершенности фагоцитоза); - показатель резистентности; - относительный статистический вес показателей; - величина показателя у пациента в момент обследования; - известная из практики величина j - того показателя, соответствующая наименьшей резистентности организма; aik - известная из практики величина показателя, соответствующая наибольшей резистентности организма. Показатель дифференцированной оценки резистентности организма формуле где вычисляют по - индекс завершенности иммунной реакции; - содержание эозинофилов, %; показатель неспецифической резистентности организма; - абсолютное число уровня циркулирующи х иммунных комплексов. Показатель резистентности определяют таким образом. У обследуемого производят забор пробы из концевой фаланги пальца при помощи иглы-скарификатора. Первую каплю удаляют, а вторую наносят на предметное стекло и получают мазок известным способом, После высыхания мазка его обрабатывают в фиксаторе по МайГрюнвальду, затем промывают в проточной воде, высушивают и окрашивают краской Романовского - Гимза. В полученном мазке подсчитывают форменные элементы белой крови общепринятыми методами. Из полученной лейкоцитарной формулы определяют абсолютное количество лимфоцитов. Параллельно в целях получения сыворотки осуществляют забор крови в мерную центрифужную пробирку капельным методом в количестве 0,5мл и получают сыворотку известным методом. Далее сыворотку отделяют от кровяного сгустка и из полученной сыворотки отбирают 0,025мл для определения содержания иммуноглобулина по методу Манчини. Полученные данные (абсолютное число лимфоцитов и содержание иммуноглобулина подставляют в формулу где г/л; - содержание иммуноглобулинов класса абсолютное число лимфоцитов (лейкоциты), и вычисляют показатель резистентности. Решение поставленной задачи подтверждается следующими примерами. Пример 1. При профосмотре работницы Н., 40 лет, работающей в гальваническом цехе ХТЗ, проведено исследование показателей периферической крови. Результаты исследования: - ПНР, усл.ед. - 58; - уровень ЦИК, усл.ед. - 63; - содержание эозинофилов, % - 3; - содержание иммуноглобулинов класса г/л - 8,5; - абсолютное число лимфоцитов - 2870. Согласно предлагаемому способу были определены показатели и Таким образом, обследование работницы Н. предлагаемым способом позволило предположить возможность возникновения физиологического климакса. Полученные результаты по и в отдельности не позволяют прогнозировать развитие физиологического течения климакса. Учитывая коррелятивную зависимость результатов исследования по и в совокупности позволило прогнозировать физиологическое течение климакса. Проведенный профосмотр в динамике подтвердил развитие физиологического климакса на основании клинических данных обследованной работницы. Пример 2. При профосмотре работницы А., 42 лет, работающей в гальваническом цехе ХТЗ, проведено исследование показателей периферической крови. Результаты исследования: - ПНР, усл.ед. - 125; - уровень ЦИК, усл.ед. - 111; - содержание эозинофилов, % - 3; - содержание иммуноглобулинов класса г/л - 18,6; - абсолютное число лимфоцитов - 2028. Согласно предлагаемому способу были определены показатели и Таким образом, обследование работницы А. предлагаемым способом позволило предположить возможность возникновения патологического течения климакса. Полученные результаты по и в отдельности не позволяют прогнозировать развитие патологического течения климакса. Учитывая коррелятивную зависимость результатов исследования по и в совокупности позволило прогнозировать патологическое течение климакса. Проведенный контрольный осмотр в динамике подтвердил патологическое течение климакса на основании клинических данных обследуемой работницы.