Спосіб диференційної терапії гіполіпідемічними препаратами для корекції порушень обміну ліпідів

Изобретение относится к кардиологии и генетике и может быть использовано в стационарных и амбулаторных условиях для лечения и профилактики атеросклероза гиполипидемическими препаратами. Известен способ контроля эффективности лечения дислипопротеидемии [Богацкая Л.Н., Киряков A.B. и др. Вопросы геронтологии. Сборник. Киев, 1990, вып. 12, с. 22-27], включающий предварительное фенотипирование дислипопротеидемии (ДЛП) до лечения больных ишемической болезнью сердца (ИБС) и лечение гиполипидемических препаратов, например липантила в средней терапевтической дозе, под контролем показателей липидного обмена. Эффективность проведенного курса лечения определяли по динамике контрольных показателей до и после назначенной терапии (прототип). Недостаток прототипа заключается в том, что он обладает малой информативностью, т.к. он не предусматривает влияние генотипа при подборе индивидуального лечения, что снижает эффективность гиполипидемической терапии. Задача изобретения: повышение эффективности гиполипидемической терапии путем индивидуального подбора дифференциального лечения при коррекции нарушений липидного обмена. Для решения поставленной задачи авторами предложен способ дифференциальной терапии гиполипидемическими препаратами при коррекции нарушений липидного обмена, включающий определение фенотипа дислипопротеидемии и назначение гиполипидемических препаратов под контролем показателей липидного обмена. При этом дополнительно до лечения определяют генотип больного ИБС и по виду генотипа назначают соответствующий гиполипидемический препарат. Отличительными признаками изобретения являются: 1. Дополнительно до лечения определяют генотип больного путем полимеразной цепной реакции с последующим проведением горизонтального электрофореза и рестрикционного анализа. 2. При отсутствии сайта рестрикции ХваI гена Апо-В (екзон 26) - генотипе Х1Х1 назначают липантил в средней терапевтической дозе. 3. При наличии сайта рестрикции ХваІ гена Апо-В (екзон 26) - генотипе Х2Х2 назначают ловастатин в средней терапевтической дозе. Дополнительное определение генотипа больного до его лечения гиполиподемическими препаратами обусловлено тем, что в развитии ДЛП и атеросклероза важную роль играют изменения, происходящие в генах. Кроме того, известно, что сходное фенотипическое проявление липидных нарушений может быть вызвано различными типами мутаций генов. Поэтому результаты исследований по определениям фенотипа ДЛП и генотипа больного повышают информативность способа и позволяют обоснованно назначить индивидуальную адекватную терапию. Для определения генотипа авторами использован эффективный метод полимеразной цепной реакции, который позволяет за непродолжительное время (2-3 часа) получить множество копий исследуемого участка гена. Последующая операция горизонтального электрофореза в полиакриламидном геле продукта полимеразной цепной реакции (ПЦР) необходим для идентификации исследуемого участка ДНК. Полученные образцы ДНК подвергают рестрикционному анализу с использованием фермента эндонуклеазы ХваІ. По результатам рестрикционного анализа определяют генотип больного: принято, что отсутствие сайта рестрикции (исследуемого участка) в отцовской и материнской дезоксирибонукленовой кислоте (ДНК) гена Апо-В в экзоне 26 соответствует генотипу Х1Х1, а наличие сайта рестрикции в отцовской и материнской ДНК гена АпоВ в экзоне 26 соответствует генотипу Х2Х2. Выбор адекватной терапии при коррекции нарушений липидного обмена основан на определении генотипа больного. По данному способу проведена исследовательская работа в отделе генетических исследований атеросклероза Института терапии АМН Украины. Результаты исследований 38 больных ИБС показали, что при генотипе Х1Х1 наибольший терапевтический эффект достигается при назначении липантила, а при генотипе Х2Х2 наибольший терапевтический эффект - при назначении ловастатина. Повышение лечебного эффекта проявляется фенотипически в снижении липопротеидов в плазме крови после окончания курса терапии по сравнению с их исходным уровнем, что подтверждается ниже примерами осуществления предложенного способа. Кроме того, применение данного способа в медицинской практике будет способствовать предотвращению развития и прогрессирования атеросклеротического процесса и позволит прогнозировать целесообразность повторного курса лечения индивидуально подобранными препаратами. Отличительные признаки предложенного решения соответствуют критерию "новизна" и требованиям изобретательского уровня. Предложенный способ осуществляют следующим образом. 1. До лечения у больных ИБС проводят исследование крови, в процессе которого определяют фенотип ДЛП по известной методике [Томпсон Г.Р. Фенотипирование ДЛП по Фредриксону. Руководство по гиперлипидемии. - Лондон, 1989]. Фенотип определяется показателями липидного спектра крови. 2. Дополнительно определяют генотип больного, для чего из крови обследуемых лиц выделяют ДНК путем экстракции фенолом и хлороформом методом полимеразной цепной реакции с помощью амплификатора типа Amply-250 по известной методике [John I. et all//Sclence. - 1991. - V.252. - Р.1643-1651]. 3. Проверяют наличие достаточного количества полученных копий исследуемого участка гена Апо-В (экзон 26) путем горизонтального электрофореза в полиакриламидном геле по известной методике [Маниатис Т. и др. Молекулярное клонирование. - М.: Мир. - 1984. - С. 156-175. 403-407]. 4. Проводят рестрикционный анализ сайта рестрикции ХваІ эндонуклеазой для определения генотипа. 5. При выделении генотипа Х1Х1, который характеризуется отсутствием сайта рестрикции ХваІ гена аполипопротеина В (Апо-В) в экзоне 26, назначают липантил, а при генотипе Х2Х2, который характеризуется наличием сайта рестрикции ХваІ гена Апо-В в экзоне 26, назначают ловастатин в средней терапевтической дозе в течение месяца на фоне соблюдения гиполипидемической диеты. 6. Судят об эффективности проведенного курса гиполипидемической терапии при положительной динамике показателей липидного обмена, функционального статуса системы кровообращения и клинического состояния по сравнению с исходными значениями до лечения. В табл. 1 представлена динамика контрольных показателей эффективности проведенного лечения по предложенному способу. Примеры осуществления способа. Пример. 1, Больной Л., 42 лет, обследован амбулаторно. Клинический диагноз: ИБС. Стабильная стенокардия напряжения ІI ФК. Недостаточность кровообращения 0 степени (НКО ст.). Гипертоническая болезнь II стадии. Гиперхолестеринемия. По заявляемому способу до лечения проведено исследование крови, в процессе которого определили фенотип ДЛП-11А, т.е. изолированная гиперхолестеринемия. Затем был выявлен генотип больного Л. путем полимеразной цепной реакции с последующим проведением горизонтального электрофореза и рестрикционного анализа. У больного Л. генотип X1Х1, и ему назначено лечение гиполипидемическим препаратом - липантилом 3 раза в день по 50 мг в течение месяца на фоне соблюдения гиполипидемической диеты. Эффективность проведенного курса адекватной терапии подтверждается положительной динамикой контрольных показателей, представленных в табл. 2. Курс дифференциальной терапии гиполипидемическими препаратами, в частности липантином, по заявляемому способу способствует улучшению показателей липидного спектра крови, функционального статуса системы кровообращения и клинического состояния пациента. Пример 2. Больной М., 37 лет. клинический диагноз: ИБС. Стабильная стенокардия напряжения 1 ФК. Гипертоническая болезнь II стадии. НК 0 ст. Комбинированная гиперлипопротеинемия. Распространенный ксантоматоз. Атеросклероз артерий нижних конечностей. По заявляемому способу до назначения медикаментозного лечения у больного М. определили фенотип ДЛП-11б - гиперхолестеринемия, сочетающаяся с гипертриглицеридемией). Дополнительно по заявляемому способу был выявлен генотип больного М. путем проведения полимеразной цепной реакции с последующим горизонтальным электрофорезом и рестрикционным анализом. У больного М. генотип Х2Х2 (наличие сайта рестрикции Хваl гена Апо-В), и ему назначен курс лечения другим гиполипидемическим препаратом - ловастатином в суточной дозе 20 мг в течение месяца на фоне соблюдения гиполипидемической диеты. Эффективность проведенного курса лечения ловастатином подтверждается положительной динамикой контрольных показателей, представленных в табл. 3. Курс адекватной терапии, в частности ловастатином, способствует улучшению показателей липидного спектра крови, функционального статуса системы кровообращения и клинического состояния пациента.