Супозиторії хламіциду для лікування генітальних форм хламідіозу у корів

Винахід належить до ветеринарної медицини, зокрема для препаратів, призначених для лікування хламідіозу у корів. Хламідіоз мають унікальний цикл розвитку і відрізняються від інших мікроорганізмів здатністю добре пристосуватися до внутрішньоклітинних умов паразитування. Хламідії викликають у тварин хвороби з гострим і хронічним перебігом, які клінічно проявляються спорадичними абортами, народженням слабких, нежиттєздатних телят і післяродовими ускладненнями (затримка посліду, розвиток ендометритів, вагінітів, маститів і ін.). Для лікування тварин з різними формами хламідІйної інфекції використовують антибіотики тетрациклінового ряду (окситетрациклін, доксициклін, метацикліну гідрохлорид, дибіоміцин), антибіотикимакроліди (еритроміцин, фармазин-200), а також хеміотерапевтичні засоби, похідні 4-хінолів (офлоксацин) та інші (Хазипов Н.З., Гаффаров Х.З., Шафиков P.A. 1984; Шаткін A.A., Мавров І.І., 1983; Sіbouleeet A.J., Bonbot J.M., 1981). При гострих і хронічних ендометритах застосовують внутрішньоматкове введення лікарських речовин у формі свічок, паличок і ін.), препарати готують на різних основах з додаванням нітрофуранових препаратів (фурагіл, фуpaзолідон і ін.), антибіотиків і сульфаніламідів. Для лікування вульвітів, вульвовагінітів піхву зрошують дезинфікуючими розчинами, застосовують тампонацію і дренування емульсіями і мазями (Зверева Г.В., Хомин С.П. 1976). Недоліком лікування цими препаратами хламідіозів є те, що вони мають незначну протихламідійну дію. Оптимальних способів лікування хворих тварин з різними проявами генітальної хламідійної інфекції не розроблено. Крім того, хламідіози в умовах обмеженого проведення етіологічної діагностики, набули репутації хвороб, які надзвичайно погано лікуються. Прототипом заявленого препарату є фармазин-200. Це антибіотик виробництва Болгарії, діюча речовина тилозин. Дія цього препарату обумовлена пригніченням бактеріального синтезу протеїнів мікроорганізмів, спектр дії охоплює в основному грампозитивні бактерії (стрептококи, дафілококи, корінебактерії, клостридії), мікоплазми і хламідії. Вводиться препарат в організм тварин внутрішньом'язово з розрахунку 5 мг/кг ж.м. двічі в день протягом 7 днів. Недоліком лікування цим препаратом є недостатня ефективність при генітальних формах хламідіозу у корів. Фармазин-200 поступає в Україну через зарубіжні фірми і належить до високовартісних препаратів. Використання нового препарату, який заявляється, дозволяє ефективно лікувати генітальні форми хламідіозу у корів. В основу винаходу поставлено задачу розробити високоефективний препарат для лікування генітальних форм хламідіозу у корів шляхом оптимального підбору лікарських речовин, використання якого б дозволило забезпечити високий процент виліковування. Технічний рівень, який полягає у лікуванні генітальних форм хламідіозу, досягають включенням до складу препарату високоефективного антисептичного засобу - флуренізид (хімічна назва N-(9-флуоренілін)ізонікотиногідразид). Суть винаходу полягає у тому, що пропонується новий вітчизняний високоефективний препарат супозиторії хламіциду, до складу якого входить флуренізид, поліетиленгліколь-400 (ПЕГ-400), поліетиленгліколь-1500 (ПЕГ-1500) і твін-80. Діючою речовиною нового препарату є флуренізид. Флуренізид-N-(9-флуореніліден)-ізонікотиногідразид - легкий рихлий яскраво-жовтий порошок без запаху і смаку, активний до грампозитивних і грамнегативних мікроорганізмів, виявляє високий антихламідійний ефект, має імуномодулюючі властивості, легко проникає в тканини і рідини організму, не викликає алергічних реакцій, не має тератогенних, ембріогенних і мутагенних властивостей. Використовується в медицині для лікування туберкульозу, хламідіозу, порушення гуморального і клітинного Імунітету (ТУ 6-09-14-2246-87). Поліетиленгліколь-400 (ПЕГ-400) - продукт поліконденсації оксиду етилену. Безбарвна прозора в'язка рідина зі слабким характерним запахом. Використовується як гідрофільна основа для лікарських форм (ФС42-1242-79). Поліетиленгліколь-1500 (ПЕГ-1500) - продукт поліконденсації оксиду етилену. Біло-жовтувата або сірувата маса. Використовується як гідрофільна основа для лікарських форм (ТФС 42-811-79). Твін-80 - поліетиленсорбітанмоноолеат, в'язка рідина від ясно-жовтого до буроватого кольору. Використовується як наповнювач для лікарських форм (ТФС 42-167-72). При проведенні патентно-інформаційного пошуку заявником знайдено технічне рішення (фармазин-200, виробництво Болгарія, діюча речовина - тилозин), що може використовуватися для лікування генітальних форм хламідіозу у корів, тобто в якого є найбільша кількість суттєвих ознак, спільних із заявленим рішенням. Це антибіотик широкого спектру дії. Вводиться в організм внутрішньом'язово двічі на день, протягом 7 днів. Однак даних суттєвих ознак недостатньо для одержання очікуваного технічного результату (ефективне лікування вульвовагінітів, ендометритів, маститів хламідійного походження; запобігання затримці посліду і абортів). Технічних рішень, які містять сукупність всіх ознак, що повністю б співпадали із ознаками заявленого рішення, не виявлено. Це дозволяє зробити висновок про відповідність заявленого технічного рішення критерію "новизна". В джерелах латентної і науково-технічної інформації не знайдено відомостей про використання флуренізиду як інгредієнта препарату для лікування генітальних форм хламідіозу у корів. Отже, заявлене технічне рішення не випливає явним чином з рівня техніки, що дозволяє зробити висновок про відповідність його критерію "винахідницький рівень". Заявлений препарат може бути використаний для лікування генітальних форм хламідіозу у корів і тому відповідає критерію "промислова придатність". Таким чином, заявлене технічне рішення є новим, промислово придатним, має винахідницький рівень, тобто відповідає всім умовам патентоспроможності винаходу відповідно до статті 6 розділу 2 закону України "Про охорону прав на винаходи і корисні моделі". Реалізація заявленого рішення здійснюється таким чином. Основою для приготування супозиторій хламіцид є гюліетленгліколі 400 і 1500 (ПЕГ-400 і ПЕГ-1500). Поліетилєнгліколь-1500 вносять у хімічну склянку і розтоплюють на водяному огрівнику при температурі 70 80°С. У розтоплений розчин ПЕГ-1500 додають ПЕГ-400. Суміш ретельно перемішують, фільтрують при температурі 70-80°С через подвійний шар марлі, додають твін-80 і охолоджують до 45-50°С. У напівзастиглу основу вводять флуренізид. Масу ретельно перемішують і розливають у попередньо охолоджені і змазані вазеліновою олією форми. Залиті форми охолоджують. Одержані супозиторії хламіциду застосовують для лікування генітальних форм хламідіозу у корів. Приклад 1. З метою вивчення протихламідійної дії флуренізиду (діючої речовини)були проведені експериментальні дослідження на курячих зародках, інфікованих штамом хламідій Г-88 (виділений із абортованого плода корови). Результати досліджень показали, що флуренізид у дозі 48-52 мкг/зародок попереджає загибель зародка від хламідій. Приклад 2. З метою визначення оптимальної дози діючої речовини - флуренізид в препараті були проведені експериментальні дослідження на коровах, у яких за допомогою клініко-мікробіологічних і серологічних методів діагностовано хламідіоз. Клінічно захворювання проявлялись вульвовагінтами, ендометритами, затримкою посліду після отелів. Спостерігають народження мертвих телят і їх загибель у перші дні життя. Для лабораторних досліджень від тварин брали кров двічі (у перші дні хвороби і повторно через 2-3 тижні після проведення курсу лікування), досліджували сироватку крові на наявність антитіл проти хламідій у реакції зв'язування комплементу за загально прийнятою методикою. При цьому антитіла виявлені в 14 з 30 досліджуваних сироваток у титрах від 1:5 до 1:40. Для мікробіологічних досліджень з зішкрябів слизової оболонки вагіни готували мазки-відбитки на предметних скельцях, фіксували і забарвлювали за методом Стемпа, а також флуоресціюючою хламідійною актисироваткою (для люмінісцентної мікроскопії) і досліджували відповідно в світловому і люмінесцентному мікроскопах. При цьому виявляли морфологічні структури хламідій, забарвлені у яскраво-червоний колір на зеленуватому фоні препарату (забарвлення за методом Стемпа), а також антигени хламідій у вигляді цитоплазматичних включень, які флуоресціюють яскраво-зеленим або жовтувато-зеленим кольором (забарвлення флуоресціюючої хламідійної антисироватки). Були виготовлені супозиторії хламіциду з вмістом флуренізиду в дозах: 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 г (мас.%: 1,0; 1,5; 2,0; 2,4; 2,9; 3,4), якими лікували хворих тварин. Результати проведеного лікування наведені в табл.1. Як видно з одержаних результатів, терапевтичний ефект проявляється при застосуванні супозиторій хламіциду, коли вміст діючої речовини флуренізиду складає 2,0-3,4 (мас.%) або 0,4-0,7 г. Оптимальний склад нового препарату становить мас.%: Флуренізид 2,0-3,4 ПЕГ-400 29,1-28,0 ПЕГ-1500 68,0-67,0 Твін-80 0,9-1,6 Приклад 3. З метою порівняння ефективності препарату супозиторії хламіциду з прототипом були сформовані 2 групи корів з діагнозом хламідіоз. Першу групу лікували фармазином-200, другу - новим препаратом. Отримані дані наведені у табл.2. Як видно з табл.2 новий препарат, який заявляється, за лікувальною ефективністю у 2,2 рази перевищує відомий препарат фармазин-200. Лікувальний ефект нового препарату - упозиторії хламіциду визначено за формулою: Е=100*(В - А): В де Е - лікувальний ефект (%); А - кількість невилікуваних тварин у дослідній групі (%); В - кількість невилікуваних тварин у контрольній групі (%). Е=100*(66,6 -16,6): 66.6*75%. Таким чином, на підставі проведених експериментальних досліджень було встановлено високу антихламідійну активність нового препарату - супозиторії хламіциду. Впровадження його у ветеринарну практику дасть змогу ефективно лікувати генітальні форми хламідіозу у корів, що сприятиме збільшенню поголів'я та продуктивності.