Спосіб діагностики цитомегаловірусної інфекції

Спосіб діагностики цитомегаловірусної інфекції, що включає морфометричне дослідження маз 3 24583 4 Таблиця Значення відсотку нейтрофільних гранулоцитів крові з параметрами площі клітин більше ніж 170мкм 2 та яскравості цитоплазми нижче 150ум.од. у пацієнтів з клінічними ознаками ЦМВІ (п=32) № п/п Код хворого Площа клітин менше 130мкм 2(%) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Д, 391 І., 363 С, 374 С, 376 О., 380 М.,391 Н., 421 О., 443 С, 460 С, 598 X., 624 С.,781 В., 332 I., 390 З., 446 Д., 612 53,0% 46% 60% 51% 47% 50% 48% 46% 51% 44% 49% 50% 56% 51% 38% 33% Результат дослі- № Код хвородження п/п го Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Не діагностовано Не діагностовано Спосіб виконують наступним чином. Беруть кров із пальця і наносять на предметне скло, готують мазки, фіксують 10 хвилин у 96% етиловому спирті, фарбують 15 хвилин за методом Романовського-Гімза та проводять морфометричний аналіз при якому вимірюють площу клітин та яскравість цитоплазми у 30 випадково обраних клітин в різних полях зору при збільшені мікроскопу 400. Подальшу стандартизацію зображення проводять за допомогою аналізатору мікроскопічного зображення, який збільшує розмір клітин до величин придатних для об'єктивного аналізу. Показник площі має найбільшу прогностичну ефективність, специфічність і чутливість. Для морфометричного аналізу площі НГ крові використовують комп'ютерний аналізатор зображення, наприклад Olympus (Японія); програмне забезпечення DP-Soft (Німеччина), Paradise 07014. Виміри здійснюються методом випадкового вибору 30 клітин в різних полях зору мазку крові. Визначають площу та яскравість цитоплазми НГ і при наявності клітин, що мають площу меншу 130мкм та нормальну яскравість цитоплазми більше ніж 45% або клітин, що мають площу більшу 170мкм 2 та нормальну яскравість цитоплазми більше ніж 60% діагностують ЦМВІ. Приклад 1. У пацієнта Д., 391 з клінічними ознаками ЦМВІ, брали кров із пальця, наносили клітинний матеріал на предметне скло, робили мазок, фіксували 10 хвилин у 96% етиловому спирті, фарбували 15 хвилин за методом Романовського-Гімза та проводили вимір 30 випадково обраних клітин в різних полях зору при збільшенні мікроскопу 400. Аналіз результатів морфометричного дослідження НГ показав, що клітини із площею 110-130мкм 2 з нормальною яскравістю цитоплазми складали 53%. У 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 А., 173 Т., 229 Л., 267 С, 325 О., 371 Н.,452 П., 496 А., 573 Б., 602 Л., 731 С, 764 Д., 811 О.,283 X., 306 Т., 687 А., 672 Площа клітин більше 170мкм (%) 62% 64% 67% 71% 68% 61% 63% 70% 69% 62% 64% 65% 62% 63% 53% 55% Результат дослідження Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Діагностовано Не діагностовано Не діагностовано пацієнта діагностовано ЦМВІ. Проведені ПЦР дослідження підтвердили наявність ЦМВІ. Приклад 2. У пацієнта 3., 446 з клінічними ознаками ЦМВІ, брали кров із пальця, наносили клітинний матеріал на предметне скло, робили мазок, фіксували 10 хвилин у 96% етиловому спирті, фарбували 15 хвилин за методом Романовського-Гімза та проводили вимір 30 випадково обраних клітин в різних полях зору при збільшенні мікроскопу 400. Аналіз результатів морфометричного дослідження НГ показав, що клітини із площею 110-130мкм 2 з нормальною яскравістю цитоплазми складали 39%. ЦМВІ. У пацієнта не діагностовано ЦМВІ Проведені ПЦР дослідження підтвердили отриманий результат - ЦМВІ не виявлено. Приклад 3. У пацієнта А., 173 з клінічними ознаками ЦМВІ брали кров із пальця, наносили клітинний матеріал на предметне скло, робили мазок, фіксували 10 хвилин у 96% етиловому спирті, фарбували 15 хвилин за методом Романовського-Гімза та проводили вимір 30 випадково обраних клітин в різних полях зору при збільшенні мікроскопу 400. Аналіз результатів морфометричного дослідження НГ показав, що клітини із площею 170-190мкм 2 з нормальною яскравістю цитоплазми складали 62%. У пацієнта діагностовано ЦМВІ. Проведені ПЦР дослідження підтвердили наявність ЦМВІ. Приклад 4. У пацієнта Т., 687 з клінічними ознаками ЦМВІ брали кров із пальця, наносили клітинний матеріал на предметне скло, робили мазок, фіксували 10 хвилин у 96% етиловому спирті, фарбували 15 хвилин за методом Романовського-Гімза та проводили вимір 30 випадково обраних клітин в різних полях зору при збільшенні мікроскопу 400. Аналіз 5 24583 результатів морфометричного дослідження НГ показав, що клітини із площею 170-19мкм 2 з нормальною яскравістю цитоплазми складали 53%. У пацієнта не діагностовано ЦМВІ Проведені ПЦР дослідження підтвердили отриманий результат ЦМВІ не виявлено. Запропонований спосіб застосовано у 32-х пацієнтів. Результатами досліджень у 28 пацієнтів діагностовано ЦМВІ, у 4 пацієнтів - не діагностовано. Подальші дослідження підтвердили отримані Комп’ютерна в ерстка А. Рябко 6 результати. В той час коли аналогом, при проведенні ПЦР дослідження у 32-х пацієнтів, у 27 пацієнтів - діагностовано, а у 5 пацієнтів - не діагностовано ЦМВІ. Проведені подальші дослідження показали, що у одного пацієнта діагноз поставлено помилково. Таким чином, порівняння з найближчим аналогом показує, що застосування запропонованого способу дозволяє підвищити точність діагностики ЦМВІ. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601