Вакцина проти дерматомікозів коней

Вакцина проти дерматомікозів коней, яка включає посів і роздільне вирощування культур грибів Microsporum canis № 22 і Trichophyton equinum № 13, приготування гомогенатів в 3 Патогенні властивості штаму. Штам патогенний для лабораторних тварин. У лабораторних тварин (кролі, морські свинки) при нашкірному зараженні культурою викликає гіперемію, злущування епідермісу, утворення кірок. Тривалість мікотичного ураження до 25 діб. Генетичні особливості штаму: ауксотрофність, резистентність до антибіотиків, фагів тощо. Штам гриба Microsporum canis №22 володіє високою імуногенною активністю, викликаючи у тварин формування напруженого і тривалого імунітету, то дозволяє рекомендувати його для виготовлення вакцини проти дерматомікозів (трихофітії, мікроспорії) асоційованої інактивованої «Мікоеквівак». Для виготовлення вакцини використовують штам Trichophyton equinum №13 виділений від хворого трихофітією лошати в 2003 році на Новогалещинській біологічній фабриці, отриманий за допомогою методу селекційного відбору за ознакою спороутворення і культурально морфологічних ознак. Ретельно вивчені його культурально - морфологічні, патогенні та генетичні особливості. Штам задепонований в колекції мікроорганізмів Державного науково контрольного інституту біотехнології та штамів мікроорганізмів має реєстраційний номер 348. Штам Trichophyton еquinum №13 досить стабільний, характеризується наступними властивостями: Культурально - морфологічні та особливості штаму. На 15- ту добу на живильному середовищі сусло - агар колонії плоскі, бархатисті, білого кольору, інколи з кремовим відтінком, центр колоній злегка западає в вигляді невеликого кратера, ростучий край рівний, зворотна сторона колонії від світло - коричневого до світло помаранчевого кольору, ріст відмічається на 2-4 добу культивування. Мікроскопія: гіфи рівні, гілчасті, септовані; мікроканідії видовженої, паличкоподібної, овальної форми, багато чисельні. Макроконідії зустрічаються рідко. Патогенні властивості штаму. Штам патогенний для лабораторних тварин. У лабораторних тварин (кролі, морські свинки) при нашкірному зараженні культурою викликає гіперемію, злущування епідермісу, утворення кірок. Тривалість ураження триває 25-30 днів. Генетичні особливості штаму: ауксотрофність, резистентність до антибіотиків, фагів тощо. Штам гриба Trichophyton еquinum №13 володіє високою імуногенною активністю, викликаючи у тварин формування напруженого і тривалого імунітету, що дозволяє рекомендувати його для виготовлення вакцини проти дерматомікозів (трихофітії, мікроспорії) асоційованої інактивованої «Мікоеквівак». Приклад 1. Для отримання вакцини культури штамів M.canis і T.еquinum окремо вирощують протягом 15-25 діб па сусло - агарі при температурі 26-28°С. Металевим стерильним шкрібком з дотриманням асептики, знімають з поверхні суслоагару біомасу і переносять в стерильний стакан 28145 4 гомогенізатора. Культури різних штамів дерматофітів знімають і гомогенізують окремо. В стакан гомогенізатора з дотриманням стерильності вміщують грибкову біомасу з 5-10 матраців, заливають 300-600см3 стерильного 1%ного розчину гіпосульфіту натрію і щільно закривають кришкою. Із культурального гомогенату кожного штаму дерматофіта з дотриманням стерильності відбирають проби для визначення кількості мікроконідій шляхом підрахунку їх в камері Горяєва та відсутності контамінації. Після визначення кількості .мікроконідій в вихідних грибкових гомогенатах проводять їх стандартизацію (по кількості мікроконідій). Гомогенат T.equinum повинен містити 120160млн/см3 мікроконідій і M.canis - 120-160млн/см3 мікроконідій (стандартні гомогенати). Стандартизовані гомогенати Т. equinum і М. canis зливають в стерильний бутель у співвідношенні 1:1 і ретельно перемішують. Отримують вакцинний гомогенат з кількістю мікроконідій в 1см3 60-80млн. Після фасування вакцину в ампулах (флаконах) розміщують в термостат для ступінчатої інактивації при температурі від 42 до 58°С протягом трьох діб. Готова вакцина представляє собою суспензія від світло-сірого до світло-коричневого кольору з осадом, який легко розбивається при струшуванні. Вакцину зберігають в закритій заводській упаковці у сухому темному приміщені при температурі від 2°С до 8°С. Термін придатності - 24 місяці з дати виготовлення. Приклад 2. Вакцину проти дерматомікозів (трихофітії, мікроспорії) асоційовану інактиновану «Мікоеквівак» до складу, якої входить штам Microsporum canis №22 і Trichophyton еquinum №13 готують по прикладу 1. Відбирають 12 кролів масою 2,5-3,0кг, вакцину вводять шести тваринам в дозі 1,0см3, внутрішньом'язево, дворазово, з інтервалом 10 14 діб. Через 25 діб після другої імунізації 3 кролів, які були імунізовані, 3 кролів, які були не імунізовані (контрольні тварини) заражають вірулентною культурою Microsporum canis №65 К в дозі 0,5см3 (2,5млн. мікроконідій) та 3 імунізованих і 3 не імунізованих (контрольні тварини) заражають вірулентною культурою Trichophyton equinum №13 в дозі 0,5см3 (2,5млн. мікроконідій). Через 25 діб після другої імунізації у вакцинованих тварин спостерігаємо відсутність клінічних ознак дерматомікозу. У тварин контрольної групи відмічаємо типову клінічну картину тріхофітії, при якій мікотичне вогнище яскраво виражене на 15-25 добу після зараження. Приклад 3. Вакцину проти дерматомікозів (трихофітії, мікроспорії) асоційовану іпактивовану «Мікоеквівак» до складу, якої входить штам Microsporum canis №22 і Trichophyton equinum №13, готують по прикладу 1. Відбирають 6 коней, з яких 3 вводять вакцину в дозі 1,0см3, внутрішпьом'язево, дворазово, з інтервалом 10-14 діб. Через 25 діб після другої імунізації 3 коней, які 5 28145 6 були імунізовані і 3 коней, які були не імунізовані (контрольні тварини) заражають нашкірним методом при цьому зараження проводять одним штамом Microsporum canis №65 К в дозі 0,5см3 (2,5млн. мікроконідій) з одного боку, іншим Trichophyton equinum №2 К з другого в дозі 0,5см3 (2,5млн. мікроконідій). Через 25 діб після другої імунізації у вакцинованих тварин спостерігаємо відсутність клінічних ознак дерматомікозу. У тварин контрольної групи відмічаємо типову клінічну картину дерматомікозу, при якій мікотичне вогнище яскраво виражене на 15-25 добу після зараження. Результати по вивченню поствакцинального імунітету до дерматомікозу у коней та кролів представлені в таблиці №1. Із таблиці видно, що вакцина до складу якої входять антигени із штамів грибів Microsporum canis №22 та Trichophyton еquinum №13, формує імунітет проти дерматомікозу при експериментальному зараженні. Коні та кролі, які раніше не вакцинувалися і не хворіли дерматомікозом сприятливі до експериментального зараження вірулентними культурами збудників. Проведені дослідження показали, що нові штами грибів Microsporum canis №22 та Trichophyton еquinum №13 володіють високою імуногенною активністю, викликаючи у тварин формування напруженого і тривалого імунітету, ідо дозволяє рекомендувати їх для виготовлення вакцини проти дерматомікозів (трихофітії, мікроспорії) асоційованої інактивованої «Мікоеквівак». Використання вакцини «Мікоеквівак» в ветеринарній практиці дозволить покращити ефективність міроприємств по боротьбі з дерматомікозами коней. Таблиця №1 Вид тварин Кількість тварин коні кролі коні кролі 3 6 3 6 Біопрепарат, який використовується для імунізації «Мікоеквівак» «Мікоеквівак» контроль контроль Імунізовані тварини, голів Експериментально заражені тварини 3 6 3 6