Спосіб діагностики вторинного імунодефіциту

Спосіб діагностики вторинного імунодефіциту, який включає цитологічну діагностику, який відрізняється тим, що додатково включає кількісну оцін 30119 глибчастий хроматін, крупні, інколи неправильної форми, вакуолі у цитоплазмі і ядрах, тонкий обідок просвітлення цитоплазми навколо ядра; 4) при мікоплазмозі (уреаплазмоз) – мікровакуолізація цитоплазми з мікрококами, феномен "відтавання" або "пінистої" цитоплазми; 5) при хламідіозі елементарні і ініційні тільця хламідій всередині та зовні клітин; 6) загальні ознаки внутрішньоклітинного ураження зі зміною захисних властивостей клітинної оболонки і пісиленням адгезії бактеріальної мікрофлори - "ключеві клітини". Розрахунок феноменів проводиться на 100 епітеліальних клітин. При імунологічному дослідженні крові виділяють слідуючі типи імунодефіцитів: аутоімунний, гіпоімунний і "опухлевий" тип [1]. При співставленні даних імунологічного дослідження і запропонованого способу цитологічної діагностики були одержані слідуючі результати. Для аутоімунного типу імунодефіциту встановлена слідуюча цитологічна картина: скудна мікрофлора, адгезія лімфоцитів до епітеліальних клітин, наявність 30-ти і більш "голих" ядер, їх нагромадження, переважність внутрішньоклітинних форм хламідій - у 20 і більше клітинах, ознаки аутофагоцитоза. За гіпоімунним типом імунодефіциту була притаманна помірна або багата мікрофлора, наявність перінуклеарних феноменів не менш, ніж у 15 клітинах, койлоцитоз - у 10 і більше клітинах, метаплазія епітелія, глибчастий хроматін, не менше 20 клітин зі збільшеним ядром, аномальні фігури мітозу. Проводилося також співставлення цитологічних даних з іншими методиками ідентифікації внутрішньоклітинних збудників: визначення антигену цитомегаловіруса імунофлуоресцентним методом, антигенів вірусу простого герпеса II типа (ВПГ II), хламідій, уреаплазм імуноферментним методом, антитіл класів IgG і IgМ до цитомегаловірусу, до вірусів простого герпеса І і II типів, до хламідій, до токсоплазм за допомогою імуноферментного аналізу (ІФА). Обстежено 150 хворих у віці від 18 до 75 років. З них 80 хворих з аутоімунним типом реакцій організму, 50 хворих з гіпоумуннім типом і 20 хворих - з передпухлинними і пухлинними захворюваннями (ерозії шийки матки - 3 хворих, мастопатії - 4 хворих, фіброміома - 2 хворих, невуси - 2 хворих, залізисті поліпи шлунку - 2 хворих). Приклади конкретного виконання способу 1. Хворий В., 42 роки, поступив у терапевтичне відділення з діагнозом: ревматоїдний артрит, суглобно-вісцеральна форма, сіркопозитивний, активність II ст. 1) заключення імунологічного обстеження: підвищення лейкоцитів - 9,8 г/л нейтрофільний лейкоцитоз - абсолютний (6,5 г/л) і відносний (75%), підвищення імунерегуляторного індекса - 4.7. Порушення на рівні гуморального ланцюга - значне підвищення ІgМ - 4,25 г/л, IgG - 21,3 г/л, активізація комплемента. Схильність до аутоімунних процесів. 2) сіркологічне дослідження крові методом УФА: Антитіла кпаса ОП ОП сиРезультат ІgМ контр.* ров.* до хламідій 0,177 0,314 ++ до цитомегаловірусу 0,200 0,182 Антитіла класу IgG до хламідій 0,230 0,490 ++ до цитомегаловірусу 0,296 0,295 до ВПГ І 0,195 0,395 ++ до ВПГ ІІ 0,200 0,225 + до токсоплазм 0,125 0,197 + Примітка *ОП кнтр. - оптична густина контрольної сироватки; ОП сиров. - оптична густина сироватки пацієнта. Визначення антигенів у зіскобі з зеву методом ІФА: Антигени хламідій - виявлені у титрі 1:4 Антигени уреплазми - не виявлені Антигени ВПГ II - найдений у титрі 1:2 3) Дані цитологічного дослідження зіскобу з мигдалин: флора скудна, нейтрофільні лейкоцити 16, площинно-клітинний епітелій - 100 клітин, лімфоцити - 10, адгезія лейкоцитів до 12 епіталіальних клітин, "голі" ядра - 24. Феномен нагромадження "голих" ядер і їх адгезії до клітин епітелія, лейкоцитам. Хламідійні тільця: позаклітинно - 8, внутрішньоклітинно - в 34 клітинах. Заключення: Хламідіоз. Ознаки герпетичної інфекції. Аутоімунний тип імунодефіциту. 2. Хвора К., 37 років, поступила у клініку з діагнозом: хронічний аднексіт, резидуальна фаза. Фіброміома матки. Ерозія шийки матки. Фібрознокістозна мастопатія. 1) Заключення імунологічних досліджень: зміни на рівні клітинної ланки - лейкоцитоз - 10,1 г/л, лімфоцитопенія абсолютна (0,7 г/л) і відносна (7%), значне підвищення нульвих німфоцитів 72%. Порушення на рівні гуморального звена – незначне зниження ІgА - 0,6 г/л. Схильність до опухолевих процесів. 2) Сіркологічні дослідження крові методом ІФА: ОП сиРезульАнтітіла класу ІgМ ОП контр. ров. тат до хламідій 0,177 0,097 до цитомегаловірусу 0,200 0,632 +++ Антитіла класу IgG до хламідій 0,230 0,229 до цитомегало0,296 0,470 + вірусу до ВПГ І 0,1950,265 + до ВПГ II 0,200 0,270 + Визначення антигенів у зіскобах з слизної оболонки уретри: Антигени хламідій - не виявлені. Антигени уреплазм - не виявленіАнтиген ВПГ II - не виявлений. Антиген цитомєгаловіруса - виявлений у титрі 1:4. 3) Дані цитологічного дослідження з уретри: плоскоклітинний епітелій - 100 клітин, мікрофлора - помірна коккобацилярна, койлоцитоз - 14 клітин, метаплазія 2 ст. - 30 клітин, перинукліарний обідок - 15 клітин, вакуолізація цитоплазми - 30 клітин, 2 30119 вакуолізція ядра - 10 клітин. Феномен "совиного ока" у 4-х клітинах. Заключення. Ознаки цитомегаловірусної інфекції. Метаплазія епітелія 2 ст. Ознаки зниження протипухлинного імунітету. 3. Хворий Ф., 32 роки, поступив в терапевтичне відділення з діагнозом: Хронічний бронхіт, стадія загострення. ДН-І ст. Хронічний тонзилліт, субкомпенсований. Хронічний пієлонефріт у стадії загострення. 1) Заключення імунологічного дослідження: іАбсолютна лейкопенія - 3,4 г/л. Порушення на рівні клітинної ланки - зниження імунорегуляторного індексу - 1,1. Порушення на рівні гуморальної ланки - значне зниження ІgА - 0,3 г/л, незначне зниження ІgМ - 0,5 г/л. ІgG - 7,2 г/л. Зниження активності комплемента, пригноблення фагоцитарної активності. Гіпоімунний тип імунодефіциту. 2) Сіркологічне дослідження крові методом ІФА: ОП ОП си- РезульАнтитіла класу IgM контр. ров. тат до хламідій 0,180 0,198 + до цитомегаловірусу 0,200 0,280 + Антитіла класу IgG до хламідій 0,230 0,304 + до цитомегаловірусу 0,296 0,329 + до ВПГ І 0,195 0,260 + до ВПГ ІІ 0,210 0280 + Визначення антигенів методом ІФА у зіскобах слизних оболонок: а) мигдалин. Антигени хламідій - не виявлені. Антигени уреаплазм - виявлені у титрі 1:4 Антиген ВПГ II - не виявлено. Антиген цитомегаловіруса - виявлено у титрі 1:2. б) урерти . Антигени хламідій - не виявлені. Антигени уреаплазм - виявлені у титрі 1:2. Антиген ВПГ II - виявлені у титрі 1:2. Антиген цитомегавіруса - не виявлений. 3) Дані цитологічного дослідження зіскобів слизинних оболонок: а) мигдалин: плоскоклітинний епітелій – 100 клітин, мікрофлора - багата коккобацилярна, міцетелії - грибів, нейтрофільні лейкоцити - 30, "ключеві" клітини - 45. Феномен "пінистої" ("танучої") цитоплазми - 10 клітин, мікровакуолізація цитоплазми з мікрококками - 50 клітин, збільшення ядер і перинуклеарний ободок гіперхромії - 15 клітин, хламідійні тільця внутрішньоклітинно в 10 клітинах, зовнішньоклітинно - поодинокі. Заключення: Мікроплазмоз. Кандідаміноз. Гарднєрелльоз. Носійство хламідій. Ознаки цитомегаловірусної інфекції. Гіпоімунний тип імунодефіциту. б) уретри: плоскоклітинний епітелій - 100 клітин, мікрофлора - помірна коккбацилярна, нейтрофільні лейкоцити - 10, одиничні міцелії грибів, "ключові" клітини - 24. Феномен "талої" цитоплазми - 12 клітин, мікровакуолізація цитоплазми з мікрококками - 35 клітин, збільшення ядер в 10 клітинах, "голі" ядра - 18. Заключення: Уреаплазмоз. Гарднєрелльоз. Кандидамікоз. Ознаки герпетичної інфекції. Ознаки гіпоімунного типу імунодефіциту. Таким чином, запропонований спосіб діагностики вторинного імунодефіциту, в порівнянні з прототипом, дозволяє в більш короткий термін з мінімальними матеріальними витратами (на протязі 30-40 хвилин замість декілька годин або навіть днів) та з високою точністю визначити не тільки можливу причину, але і наявність та патогенетичну спрямованість імунодефіциту. Джерела інформації 1. Кресюн В.Й., Бажора Ю.І., Рибалова С.С. Клинические аспекты иммунофармакологии. – Одесса, 1993. – 208 с. 2. Харрисон Т.Р. та співавт. Внутренние болезни. – Т. 4. – М., 1994. – С. 82-110, 179-183. 3. Шувалов Є.П. Инфекционные болезни. – М., 1995. – С. 656. __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 35 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3