Спосіб визначення чутливості хворих до препаратів, що містять нітрогліцерін

Спосіб визначення чутливості хворих до препаратів, що містять нітрогліцерин, який включає взяття крові, отримання богатої та бідної тромбоцитами плазми, збагачення бідної тромбоцитами плазми до робочої концентрації, введення нітро 30474 ншити трудомісткість та травматичність способу та підвищити його інформативність. Поставлена задача досягається тим, що у відомому способі визначення чутливості хворих до препаратів, що містять нітрогліцерин, який полягає у взятті крові, отриманні плазми з робочою концентрацією тромбоцитів, її дослідженні та оцінці отриманих результатів, згідно винаходу у двох порціях плазми з робочою концентрацією тромбоцитів 3·106 клітин в 1 мл, послідовно вимірюють оптичну густин у, спочатку в першій порції - до та після додавання натрієвої солі аденозиндифосфорної кислоти в концентрації 1·10-6 М, далі в другій вихідну оптичн у густину та кінцеву - після послідовного додавання нітрогліцерину до концентрації 1·10-6 М і через 5 хвилин - натрієвої солі аденозиндифосфорної кислоти до концентрації солі першої порції, розраховують величину зміни оптичної густини кожної порції після додавання натрієвої солі аденозиндифосфорної кислоти у відношенні до вихідної та при зменшенні величини зміни оптичної густини в др угій порції на 60% та більше у порівнянні з першою визначають чутливість хворих до препаратів, що містять нітрогліцерин, як збережену, менше ніж на 60% - як знижену. Пропонований спосіб здійснюється, таким чином. У пацієнта з ліктьової вени беруть кров у кількості 10 мл в пробірку, що містить 0,1 мл 3,8% розчину цитрату натрію. Після інкубації крові на протязі однієї години при кімнатній температурі відбирають надосадову рідину та визначають у ній кількість тромбоцитів. Кров, що лишилася, центрифугують 10 хв. при 3000 об./хв. з метою отримання бідної тромбоцитами плазми. Зібрану до центрифугування плазму, багату тромбоцитами, розводять плазмою, бідною тромбоцитами, до концентрації клітин 3·106 в 1 мл. Отриману плазму з робочою концентрацією тромбоцитів розділяють на дві проби, по 1 мл кожна. До першої проби додають натрієву сіль аденозиндифосфорної кислоти у кінцевій концентрації 1·10-6 М та визначають фотометричним методом зміну оптичної густини розчину. До другої проби додають нітрогліцерин у кінцевій концентрації 1·10-6 М, та через 5 хвилин - натрієву сіль аденозиндифосфорної кислоти до концентрації солі першої порції. Потім аналогічним чином визначають зміну оптичної густини розчину. При зменшенні зміни оптичної густини проби, що містить нітрогліцерин у кінцевій концентрації 1·10-6 М та аденозиндифосфорну кислоту у кінцевій концентрації 1·10-6 М, у порівнянні з пробою, що містить тільки аденозиндифосфорну кислоту у кінцевій концентрації 1·10-6 М, на 60% та більше роблять висновок про збереження чутливості до нітрогліцерину, при зменшенні даних змін оптичної густини менше, ніж на 60% - про послаблення чутливості до нітрогліцерину. Із застосуванням способу, обстежено 19 хворих на ішемічну хворобу серця, серед них 7 пацієнтів із стенокардією напруги III функціонального класу, та 12 - із стенокардією напруги II функціонального класу. Недостатність кровообігу в досліджуваних хворих не перевищувала І ст. згідно класифікації ВОЗ. Для верифікації способу, всім хворим проводилась парна велоергометрія - до та після внутрішньовенного крапельного введення 0,01% розчину нітрогліцерину з розрахунку 0,01 мл на 1 кг ваги. Результати дослідження наведені в таблиці. Як видно з таблиці, висновки щодо чутливості до нітрогліцерину, зроблені на основі способу, що заявляється, відповідають висновкам, отриманим при дослідженні чутливості до нітрогліцерину за способом парних велоергометрій. Спосіб ілюструє клінічний приклад. Хворий Д-о, 56 років, хворіє ішемічною хворобою серця на протязі десяти років. Останні три роки виставлявся діагноз: ІХС: стенокардія напруги, III функціональний клас, атеросклеротичний кардіосклероз, атеросклероз аорти та коронарних артерій (коронаровентрикулографія 5.1992 р.). НК І ст. Звернувся зі скаргами на біль за грудниною, що виникає після фізичного навантаження та не проходять після прийому однієї таблетки нітрогліцерину - дози, що була раніше достатньою для зняття приступу. Погіршенню стану передувало епізодичне приймання сустаніту на протязі 4-х тижнів. Після виключення інших причин дестабілізації стану виникла необхідність в обстеженні хворого способом, що пропонується. Для цього напередодні хворому в положенні лежачи була проведена велоергометрія. Граничне навантаження склало 50 Вт на протязі трьох хвилин. Критерієм зупинки слугував розвиток больового приступу, який був об'єктивно виражений у косовисхідній депресії сегмента ST на 1,5 мм у відведенні V5 та на 2 мм у відведенні V6. Напад був купований внутрішньовенною інфузією 10 мл 25% розчину сульфату магнію. На другий день з ліктьової вени хворого взяли 10 мл крові, з якої отримали 2 мл збагаченої тромбоцитами плазми. Плазма була поділена на дві частини. До першої частини був доданий розчин натрієвої солі аденозиндифосфорної кислоти у кінцевій концентрації 1·10-6 М, до другої - нітрогліцерин у кінцевій концентрації 1·10-6 М та через 5 хвилин - натрієва сіль аденозиндифосфорної кислоти до концентрації солі першої порції. Зміну оптичної густини розчину визначали фотометричним методом. Висхідна оптична густина першої проби склала 0,85 одиниць оптичної густини. Після додавання до неї розчину натрієвої солі аденозиндифосфорної кислоти у кінцевій концентрації ·10-6 М оптична густина проби склала 0,67 одиниць оптичної густини. Таким чином, додавання до розчину натрієвої солі аденозиндифосфорної кислоти змінило оптичну густин у проби на 27,1%. У другій пробі вихідна оптична густина розчину склала 0,88 одиниць оптичної густини. Додавання до проби нітрогліцерину у кінцевій концентрації 1·10-6 М не змінило оптичну густину розчину, а після того, як до розчину додали натрієву сіль аденозиндифосфорної кислоти у кінцевій концентрації 1·10-6 М, його оптична густина склала 0,67 одиниць оптичної густини. Зміна оптичної густини в др угій пробі склала 23,9%. Було встановлено, що зміна оптичної густини проби, що містила нітрогліцерин, відрізнялась від зміни оптичної густини проби, що не містила його, на 12%, що було розцінене як розвиток толерантності до нітрогліцерину. Для верифікації результатів дослідження пацієнту вн утрішньовенно крапельно був введений 0,01% роз 2 30474 чин нітрогліцерину з розрахунку 0,01 мл на 1 кг ваги (вага пацієнта 79 кг). Після цього йому в кліностазі була проведена повторна велоергометрія. Граничне навантаження склало 50 вт на протязі 3-х хвилин. Т.ч., була зафіксована відсутність приросту тривалості виконуваного навантаження на фоні дії нітрогліцерину. У зв'язку з цим хворий був переведений на терапію корватоном 0,002 г чотири рази на день з тразікором 0,02 г чотири рази на день на протязі двох тижнів. Після цього у хворого знову взяли кров з ліктьової вени та провели порі вняльне визначення оптичної густини за пропонованою методикою. На цей раз зміна оптичної густини проби, що містила нітрогліцерин, відрізнялась від зміни оптичної густини проби, що не містила його, на 72%, що свідчило про відновлення чутливості до нітрогліцерину. На основі даних дослідження хворому була підібрана адекватна доза та форма прийому препарату (сустак-форте 1 таб. двічи на день) в комбінації з тразікором та аспірином, після чого хворий був виписаний під нагляд дільничного кардіолога. Таблиця Зміни оптичної густини № п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 Хворий П.Б. П.И. Ц.Б. К.М. Х.Т. Б.В. Ж.В. Л.В. К.Н. Д.Б. К.Д. Т.Б. О.В. К.С. Д.В. К.Д. Г.С. С.В. О.Н. в пробі з АДФ в пробі з НГ та АДФ (в %) 25,5% 16,3% 6,7% 6,5% 26,1% 10,3% 23,0% 29,4% 14,4% 2,9% 12,8% 13,3% 16,4% 10,0% 27,1% 9,8% 5,2% 34,7% 29,5% 9,1% 11,3% 0% 4,0% 12,2% 5,4% 9,0% 8,3% 1,7% 2,1% 0% 11,0% 6,1% 9,3% 23,0% 1,9% 2,3% 21,3% 4,8% 64% 31% 100% 38% 53% 48% 61% 72% 88% 28% 100% 17% 63% 42% 12% 81% 56% 38% 84% Результати велоергометрій Ступінь збе- граничне граничне Ступінь зберереження чу- наванта- навантаження чутливості тливості ження до ження пісприйому ля прийому НГ НГ збережена 75 вт 3' 100 вт 2' збережена знижена 50 вт 1' 50 вт 1' знижена збережена 75 вт 1' 100 вт 1' збережена знижена 25 вт 3' 25 вт 3' знижена знижена 75 вт 3' 75 вт 3' знижена знижена 75 вт 2' 75 вт 2' знижена збережена 100 вт 1' 100 вт 3' збережена збережена 75 вт 3' 100 вт 3' збережена збережена 75 вт 2' 100 вт 3' збережена знижена 75 вт 2' 75 вт 2' знижена збережена 75 вт 3' 125 вт 1' збережена знижена 50 вт 3' 50 вт 3' знижена збережена 75 вт 3' 100 вт 2' збережена знижена 50 вт 3' 50 вт 2' знижена знижена 50 вт 3' 50 вт 3' знижена збережена 75 вт 1' 100 вт 2' збережена знижена 50 вт 2' 50 вт 2' знижена знижена 25 вт 3' 25 вт 3' знижена збережена 75 вт 2' 100 вт 3'1' збережена __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 35 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3