Спосіб індивідуального підбору довжини хвилі при ввч-терапії

Спосіб індивідуального підбору довжини хвилі при ВВЧ-терапії, включаючий вимірування фізикохімічних показників мембран імунокомплексних клітин біологічного об`єкту до і після впливу ЕМВ ВВЧ in vitro відрізняється тим, що визначають ферментативну активність екто-АТФ-ази відокремлених лімфацитів, та вибирають для впливу ту довжину хвилі, на якій екто-АТФ-азна активність відокремлених лімфоцитів за змістом неорганічного фосфата найбільш висока. (19) (21) 99031363 (22) 12.03.1999 (24) 15.02.2001 (33) UA (46) 15.02.2001, Бюл. № 1, 2001 р. (72) Запорожан Валерій Миколайович, Беспоясна Валентина Віл'ївна, Бубнов Володимир В'ячеславович, Грушецька Олена Вікторівна (73) Одеський державний медичний університет, Науково-дослідний інститут Здоров'я сім'ї 33580 В основі винаходу полягає завдання щодо удосконалення способу добору довжини хвилі за ВВЧ-терапії шляхом визначення активності ектоАТФ-ази імунокомпетентних клітин, що може сприяти підвищенню точності вибору режиму впливу. Зазначене вище завдання вирішується завдяки тому, що, згідно з винаходом, виявляють ферментативну активність екто-АТФ-ази ізольованих лімфоцитів і обирають для впливу таку довжину хвилі, на якій екто-АТФ-азна активність ізольованих лімфоцитів за вмістом вільного неорганічного фосфа ту є найбільш високою. Запропоноване рішення має відмінні від прототипа ознаки: 1) визначення ферментативної активності ектоАТФ-ази ізольованих лімфоцитів; 2) вибір на підставі отриманих результатів довжини хвилі для подальшого лікування. Отже, запропоноване рішення відповідає критерію "новизна". Застосування оцінювання ферментативної активності як біохімічного критерію стану регуляторних систем організму є відомим. Однак визначення довжини хвилі ЕМВ ВВЧ на підставі зміни АТФазної активності у тесті in vitro з метою більш ефективної у подальшому дії у доступній науковотехнічній літературі нами не виявлено. Крім того, жоден з існуючих способів не грунтується на оцінюванні стану структур і функцій щодо рівня клітини, зазвичай це був або рівень регуляторної системи, або рівень цілого організму. Спосіб, як послідовність ряду операцій, полягає у такому: · забирання крові у хворої і виділення лімфоцитів із суцільної крові; · опромінення частини клітин ЕМВ ВВЧ з різною довжиною хвилі; · визначення екто-АТФ-азної активності ізольованих лімфоцитів не опромінених й опромінених на різних довжинах хвиль; · вибір довжини хвилі згідно з отриманими результатами. Спосіб виконується таким чином: У хворої здійснюється забирання крові з ліктьової вени на 22-24-й день менструального циклу до початку ВВЧ-терапії з метою вибору довжини хвилі. Лікування проводиться, починаючи з 5-6-го по 15-16-й день менструального циклу протягом 10 діб, і складається з 10 процедур по 45 хвилин кожна. Фракцію очищених лімфоцитів із домішкою нейтрофілів до 10-15% отримують шляхом диференційованого центрифугування на градієнті густини фікол - вераграфіну. Життєздатність оцінюють за вилученням трипанового синього. Після цього суспензії лімфоцитів (5 млн клітин/мл) об'ємом 0,8 мл у фотопластових кюветах опромінюють апаратом "Явь-1" на довжинах хвиль, що дорівнюють 5,6 і 7,1 мм, протягом 40 хв., після чого по 0,2 мл суспензії розміщують у пробірці з 0,8 мл інкубаційного середовища й інкубують у термостаті при 37°С протягом 19 годин. Після опромінення проби фіксують холодним 10% розчином НClO4 мл /пробу і піддають центрифугуванню при 1400´10, надосадову рідину використовують для визначення вмісту вільного неорганічного фосфату, що від биває підсумкову процесів власне АТФ-аз, за методом Фіске-Субарроу (нм Фн/год/106 клітин). Порівнюючи й аналізуючи отримані результати, для подальшого курсу лікування обирають таку довжину хвилі, на якій ступінь екто-АТФ-азної активності був найбільшим на тесті in vitro. Подальше опромінення хворих проводили за допомогою приладу. "Явь-1", при цьому падаюча потужність потоку становила 10 мВт/см2, тривалість опромінення 45 хвилин, вплив здійснювався на ділянку грудини на рівні прікріплення другого ребра. Приклад. Хвора Н., 42 роки. Діагноз : Міома матки. Забирання крові зроблено на 22 день менструального цикла. Визначення екто-АТФ-азної активності початкової і на різних довжинах хвиль ізольованих лімфоцитів, опромінених в умовах in vitro: - вихідні значення - 50,3 нм Фм/год 106 клітин; - на довжині хвилі 5,6 мм - 45,21 нм Фм/год 106 клітин; - на довжині хвилі - 7,1 мм - 53,84 нм Фм/год 106 клітин. Отже, для подальшого лікування була обрана довжина хвилі, яка дорівнювала 7,1 мм. Внаслідок проведеного лікування шляхом застосування дібраної довжини хвилізначно поліпшився загальний стан хворої, зменшилися болі, нормалізувався менструальний цикл, контрольне дослідження після лікування виявило зростання екто-АТФ-азної активності ( 68,8 нм Фм/год 106 клітин) і показників імунітету. Нами було обстежено і здійснено лікування 30 хворих із гіперпластичними процесами за різної вихідної виразності імунодефіциту (табл. 1). Після проведеного лікування на довжинах хвиль, дібраних в результаті оцінювання зміни екто-АТФ-азної активності ізольованих лімфоцитів в умовах in vitro, відмічався виразний клінічний ефект, визначалася нормалізація показників імунної системи (табл.2.). Слід зазначити, що після проведення терапії відмічаються зниження реакції ізольованих лімфоцитів на ЕВМ ВВЧ тієї само довжини хвилі, на якій відбувалося лікування, і розвивається сенсибілізація відносно ЕВМ ВВЧ з іншими значеннями довжини хвилі. На підставі вищевикладеного можна припустити, що виразність фізіологічного ефекту ЕМВ ВВЧ тією чи іншою довжиною хвилі здебільшого залежить безпосередньо від стану самої системи на момент впливу ЕМВ, що доводить необхідність щодо його визначення. Таким чином, отримані результати свідчать, що запропонуваний спосіб дозволяє підвищити точність й індивідуальність стосовно вибору довжини хвилі ЕВМ ВВЧ-дії, а селективна ВВЧ-терапія має виразний загальноклінічний, імуно-стимулюючий вплив і усуває розвиток побічних ефектів, які можуть мати місце під час призначення даного лікувального фактора без урахування індивідуальної чутливості або пошуку його параметрів у процесі безпосередньої дії на організм. Джерела інформації 1. Андреев Е.А., Белый М.У., Ситько С.П. АН УССР, -1984 г., -№ 10. - С. 60-63. 2 33580 2. Каменев Ю.Ф., Саркисян А.Г., Реброва Т.Б. и др. Миллеметровые излучения в лечении осложненных раневой инфекцией повреждений конечностей // Вопросы использования электромагнитных излучений малой мощности в медицине. Удмуртия. – 1991. - С. 88-90. 3. Пославский М.В., Зданович О.В., Парфенов А.С. и др. Особенности влияния электромагнитных излучений миллиметрового диапазона на релогию крови и возможность индивидуального подбора параметров лечения // Миллиметровые волны в биологии и медицине. - М., 1989. - С. 20-25. Таблиця 1 Вид впливу In vitro Результати In vі vo Виразний нормалізуючий Без ефекту ефект Довжина Кількість хвилі пацієнток тільки на 7,1 24 тільки на 5,6 Кількість Абс. % Абс. % хвилі 7,1 пацієнток 23 22 95,6 1 4,4 5,6 7 7 100 0 0 30 29 96,7 1 3,3 6 усього Довжина 30 Таблиця 2 Спосіб добору довжини хвилі За змінною АТФ-азної активності За реологічними параметрами крові вид дії ЕМВ мм діапазону ЕМВ мм діапазону кількість процедур 10 10 кількість хворих 30 100% 30 100% кількість хворих із позитивним ефектом 29 96,7% 24 92,3% кількість хворих без ефекту 1 4,4% 2 7,7% ________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3