Спосіб підвищення специфічної активності антибіотиків

Спосіб підвищення специфічної активності антибіотиків шляхом обробки останніх γопромінюванням, який відрізняється тим, що опромінювання проводять протягом понад 1,0 до 1,5сек. до одержання дози понад 10 до 15 Грей. (19) (21) a200606370 (22) 08.06.2006 (24) 11.08.2008 (46) 11.08.2008, Бюл.№ 15, 2008 р. (72) ДИКИЙ ІГОР ЛЕОНІДОВИЧ, UA, МАНСЬКИЙ ОЛЕКСАНДР АНАТОЛІЙОВИЧ, U A, ФІЛІМОНОВА НАТАЛІЯ ІГОРІВН А, U A, ДОМАРЬОВ АН АТОЛІЙ ПАВЛОВИЧ, U A (73) НАЦІОН АЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA (56) Порівняльна оцінка селективного потенціалу комерційного та опромінюваного зразків антибіотиків щодо здатності формування антибіотикоре 3 34206 шляхом при використанні стандартних джерел випромінювання. Заявлений інтервал часу g-опромінювання є необхідним для одержання заданих доз опромінювання і обумовлює „швидкість” накопичення цих доз. При експозиції, меншій за 1,0сек, антибіотик не отримує необхідну дозу опромінення що не викликає позитивних зсувів його бактерицидних властивостей. При збільшенні часу обробки більш, ніж 1,5 с, спостерігається руйнування молекули антибіотиків, які представляють собою складну, нестійку систему. Таким чином, оптимальний час обробки - 1сек. При дозі, меншій за 10 Грей, опромінені антибіотики не змінювали вихідних рівней бактерицидної активності по відношенню до тест-культур. Одночасно, при перевищенні дози опромінення понад 15 Грей, спостерігалося руйнування молекули антибіотиків. Таким чином, оптимальна доза обробки - 10 Грей. Заявлений спосіб здійснюють наступним чином. Партію антибіотика оброблюють gвипромінюванням протягом заданого часу до одержання необхідної дози (10-15 Грей) з використанням джерела випромінювання відповідної потужності, причому зазначені параметри зв'язані D залежністю: t= , де t - час опромінювання; D P доза опромінювання; Р - потужність джерела gвипромінювання. Необхідну кількість антибіотика, бажано у ліофілізованій формі, розфасованого у скляні ємності, піддають опроміненню на gустановці протягом 1,0 - 1,5 с до одержання дози 15 Грей. 4 Обрані дози опромінення не викликають руйнування молекули антибіотика. Механізм посилення специфічної дії обумовлений, вірогідно, за рахунок зміни конформаційної характеристики молекули антибіотика. Приклад 1. Згідно з заявленим способом зразки антибіотика стрептоміцина сульфату у формі ліофілізованого порошку масою 1,5г опромінювали протягом 1 с до одержання дози 10 Грей з використанням джерела g-випромінювання Со60. В якості контролю були використані неопромінені зразки стрептоміцина сульфату. Специфічну активність опромінених і контрольних зразків препарата вивчали у відношенні референс-штамів Staphylococcus aureus та Escherichia coli. Вплив g-опромінення на специфічну активність стрептоміцина сульфату вивчали у дослідах in vitro методом серійних розведень. Метод заснований на титруванні в рідких поживних середовищах антибіотика, що випробовують, шляхом послідовного переносу визначеного об'єму рідини з першої пробірки у наступні з використанням контролю поживного середовища, яке не містить відповідного антибіотика. В усі пробірки вносять суспензію добових бактеріальних культур у навантаженні 2,5×105 мікробних клітин в одному мл. Підрахування результатів проводиться через 16 - 18 годин за оцінкою затримки росту в пробірках, які містили відповідні розведення антибіотика. Для оцінки бактерицидних властивостей препарату робили посіви з пробірок без видимого росту на щільне живильне середовище. Результати досліду наведено в таблиці 1. Таблиця 1 Вплив g-опромінення на специфічну активність стрептоміцина сульфату Тест-штам S.aureus E.coli Показник активності Б/стат. Бактериц. Б/стат. Бактериц. Контроль 7,5+1,6 13,6±2,5 14,2±1,3 24,3±3,3 Стрептоміцина сульфат Активність, мкг/мл Опромінений 6,3±1,28 8,2±1,2 12,8±1,6 15,6±1,8 Кратність* 1,2 1,7 1,1 1,5 *Кратність - це відношення даних по активності контрольного зразку до опроміненого. За результатами проведених досліджень встановлено, що у-опромінення у заданій дозі викликає виражене підвищення бактерицидної активності стрептоміцина сульфату у відношенні наведених тест-штамів і суттєво не впливає на підвищення рівня його бактеріостатичної активності. Спостерігалося підвищення бактерицидної активності опромінених зразків по відношенню до S.aureus кратністю у 1,7 рази та по відношенню до E.coli -відповідно у 1,5 рази. Приклад 2. Вивчення впливу g-опромінення на специфічну активність бензилпеніциліну натрієвої солі проводили в умовах, аналогічних наведеним у прикладі 1. Результати досліду наведено в таблиці 2. При порівняльній оцінці бактерицидної активності контрольних і опромінених зразків встановлено потенцюючий вплив у-опромінення по відношенню до S.aureus кратністю у 1,7 рази та по відношенню до E.coli -відповідно у 2,4 рази. Підвищення бактеріостатичної активності у 1,1 - 1,2 рази є несуттєвим. 5 34206 6 Таблиця 2 Вплив g-опромінення на специфічну активність бензилпеніциліну натрієвої солі Тест-штам S.aureus E.coli Показник активності Б/стат. Бактериц. Б/стат. Бактериц. Контроль 12,6±1,3 21,5±2,2 18,4±1,6 41,0±2,7 Бензилпеніциліну натрієвая сіль Активність, мкг/мл Опромінений 14,2±2,2 12,6±1,2 15,2±1,2 17,3±1,8 Кратність* 1,1 1,7 1,2 2,4 *Кратність - це відношення даних по активності контрольного зразку до опроміненого. Таким чином, наведені приклади свідчать про те, що заявлений спосіб сприяє суттєвому підвищенню специфічної, зокрема бактерицидної, активності антибіотиків. Останнє перспективно для поліпшення сучасної антибіотикотерапії і зменшення або зняття ефектів набуття мікроорганізмами лікарської стійкості до антимікробних препаратів. Джерела інформації Комп’ютерна в ерстка Л. Купенко 1. Деклараційний патент на Корисна модель №50467 А, Україна, МПК 6 А61 L 2/08, з. №2002010493, заявл. 21. 01. 02., опубл. 15. 10. 02., Бюл. №10. 2. X.Лазер Биохимические и физиологические эффекты. Влияние на ферменты. //Радиационные эффекты в физике, химии, биологии. -М., 1965.С.497-499. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601