Спосіб визначення чутливості лейкоцитів крові до антибіотиків

Спосіб визначення чутливості до антибіотиків, який включає приготування біохімічної системи, інкубацію в цій системі антибіотика та хемілюмінесцентне дослідження цієї системи з антибіотиком та без нього, який відрізняється тим, що як антибіотик застосовують стандартний диск з антибіотиком Винахід відноситься до галузі медицини, зокрема - клінічної фармакології і може бути використаний для визначення дії антибіотиків на лейкоцити крові ВІДОМІ способи визначення чутливості лейкоцитів крові до антибіотиків, основані на виконані комплексу біохімічних та біологічних досліджень [1,2] Недоліком цих способів є їх трудомісткість, тривалість виконання, методична складність та недостатня об'єктивність Найближчим аналогом є спосіб визначення чутливості лейкоцитів крові до антибіотиків, що включає забір крові, приготовления біохімічної системи, додавання до цієї системи антибіотика та визначення величини світосуми хемілюмінесценції [3] Недолік найближчого аналога обумовлений складністю приготування системи, трудомісткістю та тривалістю процедури Задачею винаходу є розробка такого способу визначення чутливості лейкоцитів крові до антибіотиків, який би за рахунок використання стандартних дисків з антибіотиками спрощував би технологію і зменшував тривалість дослідження Поставлена задача вирішується тим, що в способі визначення чутливості до антибіотиків, який включає приготування біохімічної системи, інкубацію в цій системі антибіотика та хемілюмінесцентне дослідження цієї системи з антибіотиком та без нього, згідно з винаходом, в якості антибіотика застосовують стандартний диск з антибіотиком Використання стандартних дисків з антибіотиком забезпечує спрощення технології та зменшує тривалість дослідження, так як не потребує розрахунків необхідної дози антибіотика Особливо складно її розраховувати для антибіотиків у розчиненому виді Крім того, для крихітної дози, необхідної для проведення аналізу, використовується флакон антибіотика, розрахований для лікувальних цілей В результаті лабораторних досліджень, 15 проб крові, де були використані диски з відомим антибіотиком гентаміцином і підбором дози антибіотика за прототипом достовірної різниці показників хемілюмінесценції не одержано (Р>0,05) Дані зведено в таблицю Таблиця № проби 1 2 3 Показники хемілюмінесценції (імп/хв) диск з антибіотиком за найближчим аналогом 6214 6547 1350 1213 16406 16682 00 о ю 54081 Продовження таблиці № проби 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Показники хемілюмінесценції (імп/хв) диск з антибіотиком за найближчим аналогом 14537 14605 1717 1732 3184 3176 863 854 81520 2275 2599 4137 11175 1101 81414 2212 2180 3925 11204 997 876 437 849 582 Спосіб виконують таким чином у необхідну КІЛЬКІСТЬ флаконів із розчином Хенкса й люмінолом додають по 0,2мл крові Далі, в усі флакони, крім одного, добавляють диски з випробовуючими антибіотиками Потім флакони переносять у люміноментр або спектрометр для реєстрації хемілюмінесценції і якщо різниця величини хемілюмінесценції флакону з антибіотиком знижена або збільшена в 3 рази, то це свідчить про те, що антибіотик впливає на лейкоцити крові Приклад 1 Забір крові в КІЛЬКОСТІ 1МЛ виконали з ліктьової вени хворого Г У флакони з розчином Хенкса й люмінолом додали по 0,2мл цільної крові В перший флакон нічого не додавали (контроль), а в другий додали диск з гентаміцином Вміст флаконів перемішали і внесли в гнізда люмінометра Реєстрували хемілюмінесценцію протягом двох годин Одержані ПІКОВІ значення вмісту флаконів дорівнювали ВІДПОВІДНО 7364 та 1717 імпульсів/хв Отже, величина хемілюмінесценції флакону з гентаміциновим диском була знижена більше як у 3 рази, що свідчить про вплив цього препарату на лейкоцити крові Приклад 2 Забір крові в КІЛЬКОСТІ 1МЛ виконали з ліктьової вени хворого Д У флакони з розчином Хенкса й люмінолом додали по 0,2мл цільної крові В перший флакон нічого не додавали (контроль), а в другий додали диск з гентаміцином Вміст флаконів перемішали і внесли в гнізда люмі нометра Реєстрували хемілюмінесценцію протягом двох годин Одержані ПІКОВІ значення вмісту флаконів дорівнювали ВІДПОВІДНО 3211 та 2225 імпульсів/хв Отже, величина хемілюмінесценції флакону з гентаміциновим диском не була знижена більше як у 3 рази, що свідчить про те, що антибіотик не впливає на лейкоцити крові При обстежені 27 хворих запропонованим способом витрачається для приготування біохімічної системи 2-3 хв , тоді як на приготування такої ж системи за найближчим аналогом потрібно 45-60 хв , що значно скорочує тривалість дослідження Джерела використаної інформації 1 Маянский А Н , Невмятуллин А Л , Маянский Н А Проблемы управления фагоцитарными механизмами иммунитета Журн Микробиол 1995, 3 21-26 2 Muraoka Н, Aoyama Т, Saika Т, Sato Y , Kobayashi I , Akita H , Iwata S , Sato Y , Sunakawa KEffect of antibiotics and antibody on phagocytic bactericidal activity of polymorphonuclear neutrophils of Bordetella pertussis Kansenshogaku Zasshi 1999 Mar, 73(3) 239-43 3 Крижевський В В , Стеблина В Є Патент України № 32231 А, 6А61В10/00 Спосіб визначення чутливості лейкоцитів крові до антибіотика Опубл 15 12 2000// Бюл№7-11 - Найближчий аналог ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71