Спосіб одержання із жовтка антишокового компонента для сперми

Спосіб одержання із жовтка. антишокового компонента для сперми, що включає екстрагування із жовтка антишокового компонента органічним розчинником, розділення одержаної суміші на фракції і відгонку розчинника, який відрізняється тим, що перед екстрагуванням жовток піддають глибокому заморожуванню в рідкому азоті з подальшим відтаванням. (19) (21) 2000042320 (22) 24.04.2000 (24) 15.05.2001 (33) UA (46) 15.05.2001, Бюл. № 4, 2001 р. (72) Павленко Людмила Миколаївна, Павленко Михайло Петрович (73) Інститут тваринництва Української академії аграрних наук 37844 рожування вірогідно не відрізнявся від виходу екстракту, кріообробленого 30 хвилин. З метою визначення біологічної активності і захисної дії антишокового компоненту, одержаного при різних режимах заморожування нативного жовтка, вивчено його вплив на сперму бугаївплідників після деконсервації. Приклад 3. Еякуляти ділили на чотири рівні проби: контроль-проба 1, дослід-проби 2, 3, 4. За контроль брали стандартне лактозожовтково-гліцерінове середовище. Сперму дослідних проб розбавляли середовищем, до складу якого входило 3% антишокового компоненту, екстракт якого отримали з жовтка після кріообробки впродовж 30 хвилин. Результати досліджень представлені в табл. 3. Результати табл. 3 свідчать, що кріообробка жовтка перед екстрагуванням не впливає негативно на захисні якості антишокового компоненту, одержаного із заморожено-відталого жовтка. Біологічні показники якості сперми, законсервованої в середовищі з вмістом дослідних зразків антишокового компоненту, були ідентичні як між собою, так і порівняно з контролем. Таким чином, використання запропонованою способу одержання із жовтка антишокового компоненту для сперми забезпечує, порівняно з існуючими способами, збільшення виходу із жовтка в 1,3-1,5 раза активнодіючої речовини без зниження її антишокових властивостей і дає змогу раціонально використовувати високоцінну сировину. Відтаювали пакети з жовтком на водяній бані при температурі +18…+2°С. Після відтавання кожну пробу жовтка екстрагували етиловим спиртом 96°С в співвідношенні 1:3, розділяли суміш на фракції і з надосадової рідини видаляли екстрагент на водяній бані при температурі +60...+90°С до зникнення запаху екстрагенту. Результати проведених досліджень наведені в табл. 1. Дані табл. 1 свідчать, що заморожування нативного жовтка зануренням безпосередньо в рідкий азот сприяє найбільш високому виходу антишокового компоненту з одиниці об'єму. Середній вихід екстракту жовтка (антишокового компоненту) в досліді склав 17% проти 12,4% в контролі, що було вище в 1,3 раза на користь досліду. Приклад 2. Вивчали вплив витримки жовтка в рідкому азоті на вихід екстракту з 50 г нативного жовтка. Для цього приготували 3 проби за вищеописаною методикою. Проба 1 не підлягала заморожуванню, пробу 2 заморожували шляхом занурення в азот і витримки в рідкому азоті 30 хвилин, пробу 3 заморожували шляхом занурення в азот і витримували жовток в рідкому азоті 24 години. Результати досліду наведені в табл. 2. Дані табл. 2 свідчать, що при зануренні жовтка в рідкий азот і кріообробці жовтка протягом 30 хвилин вихід екстракту з одиниці об'єму збільшився в 1,5 раза порівняно з контролем, де жовток не підлягав заморожуванню; вихід екстракту з жовтка після його 24-годинного замо Таблиця 1 Вплив різних умов заморожування жовтка на вихід антишокового компоненту (n=10) Дослід – умови обробки жовтка Контроль (нативний жовток) Одержано екстракту жовтка занурення в рідкий азот 6,2 г 12,4% 8,5 г 17,0% розміщення на поверхні рідкого азоту 8г 16% розміщення над рівнем азоту на висоті 10 см 7,8 г 15,6% Таблиця 2 Вплив тривалості кріообробки жовтка на вихід антишокового компоненту після екстрагування Способи обробки жовтка Кількість жовтка, використаного в досліді Жовток без кріообробки (проба 1), г Кріообробка жовтка 30 хв (проба 2), г Кріообробка жовтка 24 хв (проба 3), г Номери зразків 3 4 5 1 2 50 50 4,4 6,0 6,1 6,1 6,6 9,1 7,5 6,7 9,6 7,3 Маса, г % 6 7 50 50 350 6,6 6,4 5,1 38,7 11 9,9 9,9 7,3 7,5 57,8 16,4 9,0 10,0 7,7 8,6 58,9 16,8 50 50 50 Кількість екстракту, г 2 37844 Таблиця 3 Вплив антишокового компоненту, одержаного із заморожено-відталого жовтка на біологічні показники сперми після деконсервації Показники сперми Рухливість сперміїв після кріоконсервації (бали), M±m Показник абсолютної виживаності - Sa, М±m Виживаність сперміїв в годинах, t, М±m Вірогідність різниці - Р Контроль Умови кріообробки жовтка рідким азотом (t=196°C) експозиція на пове- експозиція 10 см занурення рхні над рівнем 4,1±0,21 4,2±0,02 4,1±0,01 4,1±0,15 14,1±0,25 14,1±0,25 14,2±0,31 14,5±0,28 8,0±0,3 8,0±0,5