Спосіб експериментального моделювання ерозивно-виразкових уражень слизової шлунка та дванадцятипалої кишки у щурів за допомогою гідроксиду амонію

Спосіб експериментального моделювання ерозивно-виразкових уражень слизової шлунка та 3 Однак даний спосіб має свої вади: даний спосіб тільки імітує процес виразкоутворення, тому що у людей виразки утворюються при збережених підщелепних та під'язичних залозах і без порушення проходження пілоричного каналу; даний спосіб викликає ушкодження тільки слизової шлунка, в той час як слизова 12-палої кишки залишається непошкодженою; при даному способі у шлунковій порожнині щурів відсутня висока концентрація аміаку, тому що виробник аміаку НР-інфекція - у щурів у природних умовах на слизовій шлунку відсутній. Відомий спосіб термічного моделювання виразкової хвороби -відтворення виразкового дефекту шляхом глибокого, до температури рідкого азоту (196°С), охолодження обмеженої ділянки стінки шлунка. Під місцевою анестезією 0,5% розчином новокаїну роблять верхнє-серединну лапаротомію, після чого шлунок виводять у рану. Спеціальний пристрій (діаметр - 10мм, товщина - 2мм), заздалегідь витриманий протягом 2-3 хвилин у рідкому азоті, щільно притискають до серозної оболонки шлунка у обраному місці протягом 10-15 секунд, внаслідок чого відбувається швидке і глибоке замороження стінки шлунка. Після аплікації пристрій легко відокремлюється від серозної оболонки внаслідок його природного нагрівання оточуючим повітрям і тепловим випромінюванням тварини [Вертелкин В.А., Голофеевский В.Ю., Стефанюк Н.Ф. Криогенный способ формированияя экспериментальной язвы желудка // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1987. -№2. С.77-78]. Однак даний спосіб має свої вади: даний спосіб тільки імітує процес виразкоутворення, тому що у людей виразки утворюються при температурі +37°С; рідкий азот не утворюється у шлунковій порожнині людини у природних умовах; при даному способі у шлунковій порожнині щурів відсутня висока концентрація аміаку, тому що виробник аміаку - HP-інфекція - у щурів у природних умовах на слизовій шлунку відсутній. Відомий спосіб хімічного моделювання виразкової хвороби - резерпін-бутадїонова модель. Піддослідним щурам внутрішньоочеревинно уводять бутадіон (100мг/кг) і резерпін (2мг/кг) протягом 3 діб, при цьому на слизовій шлунка утворюється виразково - деструктивне ураження у вигляді безлічі краплинних утворень розміром від 0,5х1,0 до 2х3мм. [Никулин А.А., Буданцева СИ. Сравнительная оценка методов воспроизведения экспериментальных язв желудка // Фармакология и токсикология. - 1973. - №5. - С.564-567.]. Однак даний спосіб має свої вади: даний спосіб тільки імітує процес виразкоутворення, тому що у людей виразки утворюються і без потрапляння до організму резерпіну та бутадіону; даний спосіб викликає ушкодження тільки слизової шлунка, в той час як слизова 12-палої кишки залишається непошкодженою; при даному способі у шлунковій порожнині щурів відсутня висока концентрація аміаку, тому що виробник аміаку - HP-інфекція - у щурів у природних умовах на слизовій шлунку відсутній. 40528 4 Відомий спосіб хімічного моделювання виразкової хвороби - оцтова модель за Окабе. Піддослідним щурам на серозну оболонку органу через кільце з потрібним внутрішнім діаметром наносять льодяну оцтову кислоту протягом 30с [Зиматкин СМ., Угляница К.Н. Влияние ретаболила на заживление ацетатной язвы 12-ти перстной кишки и пострезекционной раны желудка у крыс // Язвенная болезнь. Клинические и экспериментальные исследования: сборник научных трудов. - Гродно, 1983. - С.33-39]. Однак даний спосіб має свої вади: даний спосіб тільки імітує процес виразкоутворення, тому що льодяна оцтова кислота не утворюється у шлунковій порожнині людини у природних умовах; при даному способі у шлунковій порожнині щурів відсутня висока концентрація аміаку, тому що виробник аміаку - НР-інфекція - у щурів у природних умовах на слизовій шлунку відсутній. Відомий спосіб моделювання виразкової хвороби за механізмом стресових уражень - модель іммобілізаційного емоційного стресу. Щурів поміщають у спеціальний пристрій у вертикальному положенні до низу головою на 24 години, після чого щурів декапітують під поверхневим ефірним наркозом і виймають шлунки для вивчення їх стану. При цій моделі ерозивно-виразкові ураження слизової шлунка різного ступеню виразності (від ерозій до тяжких проривних виразок) знаходять у всіх щурів у 100% випадків (у середньому, у кожного щура спостерігаються 1-2 проривні виразки) [Левицький А.П., Зубков О.Б., Макаренко О.А., Гойдик B.C., Семанів О.М. Оцінювання проти виразкової дії бальзаму «Біотрит» на стресовій моделі виразок шлунка у щурів // Одеський медичний журнал. - 1999. - №2. - С.10-11]. Однак даний спосіб має свої вади: даний спосіб тільки імітує процес виразкоутворення, тому що у людей у природних умовах виразки утворюються у вертикальному положенні догори головою; даний спосіб викликає ушкодження тільки слизової шлунка, в той час як слизова 12-палої кишки залишається непошкодженою; при даному способі у шлунковій порожнині щурів відсутня висока концентрація аміаку, тому що виробник аміаку - НРінфекція - у щурів у природних умовах на слизовій шлунку відсутній. Найбільш близьким до заявленого технічного рішення є спосіб біохімічного моделювання виразкової хвороби. За допомогою зонду під уретановим наркозом тваринам внутрішньошлунково вводять сечовину за концентрацією 0,25-2,5мг/мл та 100 - 1000ОД фермента уреази, що призводить до швидкого збільшення концентрації аміаку у шлунковій порожнині, і, відповідно, з нашої точки зору, до утворення гідроксиду амонію. При цьому одночасно відмічається негативний вплив уреази на моторну функцію шлунка і шлунковий кровообіг. При обстеженні слизової шлунка після декапітації тварин відмічаються виразкові ураження різного розміру [Рожавин М.А. Патогенные свойства Campylobacter pylori // Клиническая медицина. 1989. - №11. - С.20-23]. Однак даний спосіб має свої вади: даний спосіб викликає ушкодження тільки слизової шлунка, в 5 40528 той час як слизова 12-палої кишки залишається непошкодженою; препарат, який містить фермент уреазу, має велику ціну. В основу запропонованої корисної моделі поставлено задачу створення способу експериментального моделювання ерозивно-виразкових уражень слизової шлунка та дванадцятипалої кишки у піддослідних тварин, а саме - у щурів, що гарантує зручність проведення моделювання ерозивновиразкових уражень, максимальну подібність уражень у тварин до уражень у людей, а також не потребує великих витрат. Поставлена задача вирішується тим, що, згідно корисної моделі, експериментальне моделювання ерозивно-виразкових уражень слизової шлунка та дванадцятипалої кишки у піддослідних тварин, а саме - у щурів, здійснюється за допомогою введення у шлункову порожнину щурів за допомогою зонду 1-2мл 1-2% розчину гідроксиду амонію. Спосіб здійснюється наступним чином Під поверхневим ефірним наркозом у шлункову порожнину щурів, які 1 добу перебували без їжі, за допомогою зонду вводять 1 - 2мл 1-2% розчину гідроксиду амонію, після чого тварин поміщають у помешкання без доступу до їжі та води на 1 добу. Приклад конкретного застосування. Під час проведення експериментального моделювання ерозивно-виразкових уражень слизової шлунка та дванадцятипалої кишки (проток №7) щуру - самцю віком 2,5 місяця під поверхневим Комп’ютерна верстка О. Рябко 6 ефірним наркозом у шлункову порожнину було введено 2мл 2% розчину гідроксиду амонію. Піддослідна тварина залишилась живою і через 1 добу під поверхневим ефірним наркозом була декапітована, після чого було вилучено шлунок та дванадцятипала кишка для вивчення стану їх слизової. Після розтину шлунка по великій кривині в антральному відділі шлунка було візуально зафіксовано 3 ушкодження слизової (d=0,4-0,7см), які були покриті фібрином і некрозом сіро-жовтого кольору. При розтині дванадцятипалої кишки на слизовій було візуально зафіксовано 5 поверхневих ушкоджень слизової (d=0,1-0,4см). Дані гістологічного дослідження уражень слизової шлунка щура відповідали картині гострої виразки: некроз слизової оболонки, некроз власної пластинки слизової оболонки, некроз підслизової оболонки; інфільтрація поліморфними лейкоцитами глибших тканин; набряк глибших тканин. Дані гістологічного дослідження уражень слизової дванадцятипалої кишки щура відповідали картині гострої ерозії: некроз слизової оболонки до власної пластинки, крововиливи у вигляді геморагій, порушення мікроциркуляції Таким чином, у порівнянні з прототипом, заявлений спосіб є більш зручним, дозволяє швидко і максимально достовірно провести експериментальне моделювання ерозивно-виразкових уражень слизової шлунка та дванадцятипалої кишки, а також не потребує великих витрат. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601