Протитромботичний засіб

Антитромботическое средство, содержащее ацетилсалициловую кислоту и гетероциклическое соединение, отличающееся тем, что в качестве гетероциклического соединения оно содержит гидазепам формулы Изобретение относится к области фармакологии, в частности к средству, обладающему антиагрегационной активностью по отношению к тромбоцитам плазмы крови Известно, антитромботическое средство, содержащее дипиридамол (I) и ацетилсалициловую кислоту (II) - аспирин [1] дилтиазема (III) и ацетилсалициловой кислоты (II) [2] Однако антиагрегационный эффект проявляется при использовании больших доз этого средства (30-100 мг/кг) CH2CONHNH2 при соотношении гидазепам ацетилсалициловая кислота равном 1 (1-10) о Ri=R3=-N(CH2-CH2-OH); СООН Однако, потенцирование антритромбического действия такого средства отмечается только при последовательном введении компонентов второй компонент вводится через 4 часа после первого (Seiffge D, Weithman К Superadditive antithrombotic effects follow consecutive administration of drugs Eur J Pharmacol -1987 - 1 3 7 - № 2-3p 287-288) Известно средство, обладающее антиагрегационной активностью по отношению к тромбоцитам крови, представляющее собой композицию из Зоя В основу изобретения поставлена задача создания антитромботического средства, в котором замена гетероциклического соединения позволяет повысить антиагрегационную активность по отношению к известным ранее средствам Поставленная задача решается антитромботическим средством, содержащим ацетилсалициловую кислоту и гетероциклическое соединением тем, что в качестве гетероциклического соединения оно содержит гидазепам (1-гидразинометилкарбонил-7-бром-5-фенил-1,2-дигидро-ЗН-1,4бенздиазепин-2-он) формулы (IV) IV ГО ГО 43324 Из патентной и научно-технической литературу неизвестно, что средство, состоящее из гидазепама и ацетилсалициловой кислоты обладает антиагрегационной активностью по отношению к тромбоцитам крови Средство готовится путем смешивания гидазепама и ацетилсалициловой кислоты в заявляемых пределах в крохмальной взвеси и вводится в виде суспензии в физиологическом растворителе (Гидазепам Андронати С А и др Киев, Наукова думка, 1992 г, с 98) Производили изучение антигемостатической и антиагрегационной активности Примеры изучения приведены в таблицах риалы 4-й Всес научно-технич конф , Москва, 2425сент, 1991 г - с 201) Гидазепам и эталоны сравнения ацетилсалициловую кислоту и алпразолам вводили внутрибрюшинно крысам-самцам массой 120-180 г в фармацевтически активных дозах 0,25, 0,5, 1 мг/кг Антигемостатическую активность определяли через 50 мин после введения исследуемого вещества, либо смеси и оценивали по времени удлинения кровотечения в % по отношению к контролю Полученные результаты представлены втабл 1 За пределами указанных в таблице 1 соотношений (гидазепам ацетилсалициловая кислота) усиления антитромбической активности не наблюдается Пример 2. Антиагрегационную активность по отношению к тромбоцитам плазмы крови крыс исследовали фотометрически по методу Борна (Born J V R , Nature - 1962 - 194 - p 927) В качестве индуктора агрегации тромбоцитов использовали АДФ в конечной концентрации 10 5 М Исследуемые вещества IV, II, V и смесь веществ IV+II вносили в кювету агрегометра в конечной концентрации 10 4 М за 5 минут до прибавления индуктора агрегации Результаты записывались графически и на агрегатограмме, определяли следующие параметры агрегации % ингибирования агрегации (I, %), амплитуда агрегации через 1 минуту после начала (Аі,%), время полудезагрегации (Т-і/2, %) Все параметры оценивались в % по отношению к контролю Исследование антигемостатической активности (см табл 1) показало, что самую высокую активность проявляют композиции гидазепама в дозе 0,5 мг/кг с ацетилсалициловой кислотой в дозах 0,5 мг/кг (1 1), 1,5 мг/кг (1 3), 2,5 мг/кг (1 5) и 5 мг/кг (1 10), удлиняя время кровотечения у крыс на 81,6-71,1% соответственно, что в 3,9-3,4 раза превосходит антигемостатический эффект ацетилсалициловой кислоты, в 3 раза - эффект алпразолама и на 9,4% - эффект гидазепама Изучение антиагрегационной активности в опытах in vitro (см табл 2), показало, что заявляемое а нтит ром боти чес кое средство на 82,5% по сравнению с контролем подавляет агрегацию тромбоцитов, вызванную АДФ в богатой тромбоцитами плазме крови крыс, что значительно превосходит эффект ацетилсалициловой кислоты (31,3%) и гидазепама (12%), взятых в отдельности Алпразолам в концентрации 10 4 М не подавляет агрегацию тромбоцитов, индуцированную АДФ, что согласуется с литературными данными (Carolyn М Chesney, D Piter - Biochem and Biophys Resear Commun 1987 - 4 4 - № 1 - p 359) Пример 1. Антигемостатическую активность гидазепама, а также эталонов сравнения ацетилсалициловой кислоты алпразолама и их смесей изучали по методике определения времени кровотечения (ВК) при нанесении стандартного надреза (длина 5 мм, глубина 1 мм) на вентральной части хвоста крыс-самцов после их анестезии при внутривенном введении уретана (Л Г Черстова, и др , Мате По всем остальным параметрам оценки процесса агрегации тромбоцитов заявляемое средство также оказалось эффективнее, чем при их раздельном введении в инкубационную среду Так, начальная интенсивность процесса (А-і) оказалась снижена на 52,5% по сравнению с контролем и гидазепамом, на 63,5% по сравнению с ацетилсалициловой кислотой, существенно - в 2,6 раза по сравнению с контролем сокращается время дезагрегации слипшихся тромбоцитов (Т1/2) при соотношении гидазепам ацетилсалициловая кислота равном 1 (1-10) Причинно-следственную связь между заявляемыми признаками и достигаемым результатом можно объяснить следующим Известен алпразолам (8-хлор-1-метил-6-фенил-4Н-1,2,4-триазоло-4,3-а 1,4-бенздиазепин) формулы (V) Однако соединение (V) ингибирует агрегацию тромбоцитов, индуцируемую фактором агрегации тромбоцитов и не ингибирует агрегацию тромбоцитов вызываемую аденозин дифосфорной кислотой (АДФ) и другими индукторами (Патент ЕПВ 0176927 А2, 1982), ЛД 50 алпразолама - 830 мг/кг Известен гидазепам - анксиолитический препарат - транквилизатор дневного действия (Гидазепам Андронати С А и др Киев Наукова думка, 1992 г), ЛД50 гидазепама - 1600 мг/кг Известно антиагрегационное средство ацетилсалициловая кислота (II), широко применяемое в медицинской практике в качестве антитромботического агента (Машковский М Д Лекарственные средства М Медицина -1989 - 4 1 - с 165) Однако антиагрегационный эффект ацетилсалициловой кислоты существенно зависит от дозы и в больших дозах (0,5 г 3 раза в день) она не только тормозит биосинтез тромбоксана, но и нарушает биосинтез простациклина, мощного антигемостатического агента (Машковский М Д - т а м же) Таким образом, прямое антиагрегационное действие ацетилсалициловой кислоты сочетается со снижением антиагрегационной активности сосудистой стенки (Irene A J , Reily and G A Fitzgerald Aspirin in Cardiovascular Disease Drugs - 1988 35 - p 154-176) 43324 Пример 3. Токсичность фармакологически активного заявляемого средства изучали при постоянной температуре (22°С) окружающей среды на индивидуально содержащихся животных Оценку результатов проводили через 24 часа после введения заявляемого средства внутрь белым мышам ЛДбо предлагаемой композиции 1600 мг/кг [1500 1850] Таким образом, заявляемое нами средство в дозе 0,5 мг/кг гидазепама и ацетилсалициловой кислоты в дозах 0,5, 1,5, 2,5, 5 мг/кг проявляет вы сокую антигемостатическую и антиагрегационную активность в отношении тромбоцитов, значительно превосходит по действию эталон сравнения средство (алпразолам-ацетилсалициловая кислота) и может найти применение в медицине для профилактики тромбообразования и лечения сердечно-сосудистых заболеваний, в основе которых лежит повышенная агрегационная активность тромбоцитов Предлагаемое средство обладает низкой токсичностью, поскольку ЛДбо составляет в опытах на мышах при введении внутрь 1600 мг/кг Таблица 1 А нти ге м остати ч ее кая активность гидазепама, алпразолама, ацетилсалициловой кислоты и их сочетании при в/б введении в опытах на крысах при *р < 0,05, **р