Спосіб диференційної діагностики менінгітів

Спосіб диференційної діагностики менінгітів, що включає забір ліквору, який відрізняється тим, що методом газової хроматографії визначають склад вищих жирних кислот в спинномозковій рідині і при КІЛЬКОСТІ пентадеканової 0,01-0,3 % і гептадеканової 0,1-1,2 % жирних кислот діагностують вірусний менінгіт, а при КІЛЬКОСТІ пентадеканової 1,5-16 % і гептадеканової 2,5-12,5 % жирних кислот - бактеріальний менінгіт Спосіб, що заявляється, відноситься до медицини, а точніше до інфектологм і такого її розділу, як нейроінфекцм, і призначений для диференційної діагностики вірусних і бактеріальних менінгітів Рання диференційна діагностика менінгітів бактеріальної і вірусної етіології до останнього часу лишається важливою проблемою сучасної інфектологм Адже, лише своєчасно розпочата відповідна етютропна терапія дозволяє досягнути позитивних результатів в лікуванні менінгітів За КЛІНІЧНИМИ ознаками розрізнити вірусний і бактерійний менінгіт в переважній більшості випадків неможливо Звичайно, лабораторний аналіз спинномозкової рідини дозволяє з'ясувати вірусну або бактерійну природу менінгіту Проте, за даними різних авторів, рутинний аналіз спинномозкової рідини дає вичерпну ВІДПОВІДЬ лише в 75 - 80% випадків На початку захворювання або при інтенсивній антибютикотерапм, розпочатій до поступлення в стаціонар, у спинномозковій рідині хворих на гнійний менінгіт виявляються зміни характерні для серозного запалення м'якої мозкової оболонки Навпаки, при важких формах менінгітів ентеровірусної етіології, в лікворі може виявлятися високий плеоцитоз з нейтрофільозом, що нерідко стає причиною ппердіагностики гнійного менінгіту [2, 4] ріїв Зважаючи на те, що бактеріологічні і вірусологічні методи диференційної діагностики не лише є коштовними, а й потребують досить тривалого часу, загальноприйняті КЛІНІЧНІ І лабораторні дослідження на початку захворювання не завжди дають вичерпну ВІДПОВІДЬ про етіологію захворювання, виникає необхідність в розробці більш інформативних диференційно діагностичних крите Найближчим аналогом - прототипом способу, що заявляється є спосіб диференціальної діагностики менінгітів [3] за визначенням в спинномозковій рідині олігопептидів середньої молекулярної маси Цей спосіб включає забір ліквору, визначення олігопептидів середньої молекулярної маси на спектрофотометрі при довжині хвилі А = 254нм (СІ) і при А = 280нм (С2), розраховується діагностичний показник - ДП = С1\С2 При ДП 2 діагностують вірусний менінгіт Спосіб-прототип має наступні недоліки олігопептиди середньої молекулярної маси - це пул різноманітних речовин з різною молекулярною масою, а жирні кислоти є складовими частинами фосфоліпідів клітинних мембран, що першими реагують на впливи інфекційних чинників [1] Тому, зміни у спектрі жирних кислот є первинними по відношенню до змін олігопептидів середньої молекулярної маси, і більш специфічними Задача, що вирішується полягає у забезпеченні диференційної діагностики менінгітів вірусної і бактеріальної етіології Технічним результатом нового способу буде зменшення частоти діагностичних помилок і підвищення ефективності лікування менінгітів шляхом своєчасного призначення відповідної етютропної терапії Поставлена задача, згідно винаходу, досягається тим, що методом газової хроматографії визначають склад вищих жирних кислот (ЖК) ЛІПІДІВ спинномозкової рідини і при КІЛЬКОСТІ пентадеканової (С 15) ЖК 0,01 - 0,3%, гептадеканової (С со (О 44632 С 17 гепта0-0,01 8,1 ± 0 , 4 0,48 ±0,1^ при КІЛЬКОСТІ пентадеканової (С 15) ЖК 1,5 - 16%, деканова гептадеканової (С 17) ЖК 2,5 - 12,5% діагностують бактеріальний менінгіт За період з січня 2000 року до березня 2001 Запропонований спосіб здійснюється наступроку у відділенні нейроінфекцій Київської міської ним чином у хворого під час люмбальної пункції дитячої клінічної інфекційної лікарні запропонованабирають спинномозкову рідину Ліквор в об'ємі ним способом бактеріальний менінгіт було діагно0,5 - 1мл вміщують у пробірку з притертою пробстовано у 62 хворих, а вірусний у 19 хворих, в усіх кою ємністю 10 - 15мл, додають 5 - 7мл хлорофохворих діагноз був верифікований вірусологічнирмно-метанольної суміші (у співвідношенні 2 1) і ми, бактеріологічними, серологічними методами тримають ЗО хвилин в холодильнику при темпераПриклад 1 Хворий Ярослав Л , 5 років (№ турі 4°С, потім відбирають піпеткою Пастера ниж592\2000)поступив до стаціонару на другу добу від ній хлороформний шар Для повноти реакції етап початку захворювання з діагнозом Менінгококова екстракції здійснюють ДВІЧІ Об'єднані хлороформінфекція, генералізована форма менінгококцемія, ні екстракти концентрують до висихання в потоці гнійний мешпт азоту при температурі 45°С на водяній бані До Захворювання мало гострий початок з підвисухого осаду ЛІПІДІВ спинномозкової рідини додащенням температури тіла до 39,7°С, багаторазоють 5мл 1% розчину сірчаної кислоти в метанолі вої блювоти, появи спочатку плямистота переносять розчин у скляну ампулу ємністю папульозного висипу, який через декілька годин Юмл, після запаювання проводять гідроліз і мезмінився на геморагічний На момент поступлення тилювання в термостаті при температурі 85°С до стаціонару стан дитини розцінювався як тяжпротягом 20 хвилин Екстракцію метильованих ЖК кий, температура 39,3°С, пульс 114уд\хв, була ЛІПІДІВ спинномозкової рідини здійснюють ДВІЧІ виражена інтоксикація, геморагічний висип на нигексан-ефірною сумішшю (у співвідношенні 1 1) в жній частині тулуба і стегнах, різко позитивні усі об'ємі 5мл (для розмежування фаз додають 1мл менінгеальні симптоми При спинномозковій пункдистильованої води), відбирають піпеткою Пастеції отримано мутний ліквор Лабораторний аналіз ра верхній шар Об'єднані екстракти випарюють до ліквору реакція Панді ( + + + + ) , білок - 1,6г\л, цитоз висихання в потоці азоту при температурі 45°С на - 1457 х 106\п (нейтрофіли) Дані об'єктивного обводяній бані Сухий осад розчиняють в 40 - 50мкл стеження і лабораторного дослідження спинномочистого гексану та вводять у випарювач хроматогзкової рідини були підставою для встановлення рафа в об'ємі 5мкл діагнозу гнійний менінгіт Визначений при газохроматографічному аналізі вміст пентадеканової ЖК Газохроматографічнии аналіз спектру ЖК ЛІПІ4,7% і гептадеканової ЖК - 9,5%, що є властивим ДІВ спинномозкової рідини здійснюється на газодля гнійного менінгіту Надалі з ліквору було видівому хроматографі серп "Цвет - 500" з полум'янолено менінгокок іонізаційним детектором в ізометричному режимі 17) ЖК 0,1 - 1,2% діагностують вірусний менінгіт, а за таких умов використовують скляну колонку (розміром 2м х 0,3см), заповнену фазою 5% ПЕГС (поліетиленгликолю сукцинату) на хроматоні NAW-HMDS (зернистість 0,125 - 0,160мм), температура колонки +187°С, температура випарювача +250°С, витрати азоту та водню -35мл\хв, повітря 200мл\хв, швидкість діаграмної стічки - 240мм\год, чутливість шкали 10А 7 , об'єм проби, яка вводиться 5мкл, тривалість аналізу - 20 хв Кількісна оцінка спектру жирних кислот проводиться методом нормування площ з визначенням частки кислот у відсотках Похибка визначення ±10% Спинномозкову рідину для аналізу спектру жирних кислот набирали при поступленні до стаціонару Спектр жирних кислот визначали в двох групах хворих 1 група - 15 дітей з бактеріальними менінгітами, 2 група - 12 дітей з вірусними менінгітами Як норму використано показники 10 практично здорових дітей Результати газохроматографічного аналізу спектру вищих жирних кислот ЛІПІДІВ спинномозкової рідини наведено в таблиці Таблиця Склад жирних кислот ЛІПІДІВ спинномозкової рідини (%) Жирні кислоти С 15 пентадеКанова Норма (п=10) 0-0,01 1 група (п=15) 5,65 ± 0,71 2 група (п=12) 0,1 ±0,07 Приклад 2 Хвора Ірина К, 12 років (№ 228\2000), поступила до стаціонару на 8 день від початку захворювання з діагнозом Епідемічний паротит, типовий, нервово-залозиста форма, двосторонній паротит, серозний менінгіт Захворювання мало гострий початок з підвищенням температури до 38,6°С, збільшення біля вушних слинних залоз В наступні дні температура утримувалась на більш низьких цифрах, з'явилась болючість в місцях розташування уражених залоз, сухість в ротовій порожнині, погіршення апетиту На 8 день від початку захворювання слинні залози зменшились в розмірах, але з'явився нестерпний головний біль, блювання, знову підвищилась до високих цифр температура При поступленні стан дитини розцінено як серед ньо тяжкий, температура 38,9°С, помірно виражена інтоксикація, з менінгеальних симптомів позитивний Керніга і нижній Брудзинського, ригидність потиличних м'язів помірної вираженості При проведені люмбальної пункції прозора спинномозкова рідина витікала під підвищеним тиском В лабораторному аналізі спинномозкової рідини реакція Панді (++), білок - 0,57г\п, цитоз - 679x106\л ( 75% лімфоцитів) Дані анамнезу, КЛІНІЧНОГО і лабораторного обстеження підтвердили діагноз Визначений методом газової хроматографії вміст пентадеканової ЖК - 0,01%, гептадеканової ЖК - 0,6% свідчили про вірусну природу менінгіту Таким чином, запропонований спосіб дозволяє якісно і швидко проводити диференційну діагнос 5 44632 6 тику вірусних і гнійних менінгітів 3 Патент № 17531 А "Спосіб диференційної Література діагностики менінгіту" / Мостюк А І , Дашо М Б , 1 Алимова Е К , Аствацатурьян А Н Липиды Дашо Ю А та ш - Заявлено 22 05 95, опубліковаи жирные кислоты в норме и при ряде патологичено 6 05 97 - Бюл № 5 ских состояний - М Медицина, 1985 - 2 3 7 с 4 Цветанова Е М Ликворология - К 2 Зинченко А П Острые нейроинфекции у Здоров"я, 1986 - 3 7 1 с детей -Л Медицина, 1986 - 3 2 0 с ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 - 90