Спосіб біологічного тестування

1. Спосіб біологічного тестування води, що полягає у внесенні церіодафній в контрольну воду і в дослідну воду, експонуванні протягом 48 годин без годування церіодафній, підрахунку живих церіодафній і розрахунку відсотка загиблих церіодафній у дослідній воді відносно кількості живих церіодафній у контрольній воді, відповідно, через 1, 6, 24 і 48 годин експонування з подальшою оцінкою токсичності води за критерієм загибелі 50 % і більше церіодафній, який відрізняється тим, що 3 біотестування у якомога коротший термін, що обумовлює недостатньо високу достовірність і експресність біотестування. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу біологічного тестування води, у якому за рахунок створення нової сукупності ознак була б підвищена достовірність і експресність біотестування. Для вирішення поставленої задачі у способі біологічного тестування води, який полягає у внесенні церіодафній в контрольну воду і в дослідну воду, експонуванні протягом 48 годин без годування церіодафній, підрахунку живих церіодафній і розрахунку відсотка загиблих церіодафній у дослідній воді відносно кількості живих церіодафній у контрольній воді відповідно через 1, 6, 24 і 48 годин експонування з подальшою оцінкою токсичності води за критерієм загибелі 50% і більше церіодафній, згідно з корисною моделлю, виконують додаткові підрахунки живих церіодафній з відповідними розрахунками відсотка загиблих церіодафній у дослідній воді відносно кількості живих церіодафній у контрольній воді через 3 і 12 годин від початку експонування, як контрольну воду використовують штучну прісну воду. Найкраще використовувати церіодафній Ceriodaphnia affinis Lilljeborg віком до 24 годин. Рекомендовано використовувати церіодафній, яких не менш як за 2 години до експонування перестають годувати. Штучну прісну воду краще готувати на дистильованій воді, в яку додають реактиви: магній сірчанокислий 123,0мг/дм3; натрій вуглекислий кислий 96,0мг/дм3; кальцій сірчанокислий 60,0мг/дм3; калій хлористий 4,0мг/дм3; натрій селеністокислий 0,002мг/дм3. Сукупність суттєвих ознак способу, що заявляється, дозволяє підвищити достовірність і експресність біотестування. Так додаткові підрахунки живих тест-об'єктів у початкові 12 годин експонування з подальшими розрахунками відсотка загиблих церіодафній у дослідній воді відносно кількості живих церіодафній у контрольній воді дозволяють вчасно виявити гостру летальну токсичність дослідної води з високим ступенем достовірності, оскільки саме на початку біотестування церіодафній найбільш чутливі до дії токсикантів. Це пояснюється інтенсивним ростом церіодафній, кормом для яких є лише складові відповідно дослідної води і контрольної води. Стабільність складу останньої гарантує відсутність в ній будь яких домішок, які б впливали на життєдіяльність церіодафній, а тому і на результат розрахунків відсотка загиблих церіодафній у дослідній воді відносно кількості живих церіодафній у контрольній воді і, як слідство, підвищує достовір 45053 4 ність біотестування. Технічний результат підсилюється використанням церіодафній віком до 24 годин, які мають більш крупні початкові розміри ніж в найближчому аналозі, це дозволяє уникнути похибки при їх підраховуванні, особливо у перші години експонування. Крім того, достовірність і експресність біотестування підвищується внаслідок створення для церіодафній екстремальних умов існування, а саме, не внесення корму у воду не тільки в період 48 годин експонування, а і до його початку, що підсилює чутливість церіодафній і, як слідство, підвищує достовірність і експресність біотестування. Пропонований спосіб може бути реалізований наступним чином. У конкретному прикладі реалізації використовують по десять посудин об'ємом 20см3 для контрольної води і для дослідної води. У кожну посудину наливають по 15см3 відповідної води і вміщують по одному екземпляру церіодафній. Для біотестування використовують однодобову молодь церіодафній, отриману від стандартизованої лабораторної культури Ceriodaphnia affinis Lilljeborg. Біотестування проводять в стандартних умовах, наприклад, в кліматостаті, люміностаті, за температури (25±1°С), тривалості світлого періоду (16±1) годин і темного періоду (8±1) годин. Тривалість експонування становить 48 годин. Впродовж цього часу воду у посудинах не замінюють, церіодафній не годують. Фіксують час початку експонування. Через одну годину експонування візуально підраховують живих церіодафній у 10 посудинах з дослідною водою і у 10 посудинах з контрольною водою. Живими вважають церіодафній, які вільно рухаються у товщі води або спливають з дна посудини після легкого її струшування. На підставі підрахунку церіодафній визначають їх середнє арифметичне як у контролі, так і у досліді. Результати використовують для розрахунку відсотка загиблих церіодафній у дослідній воді відносно кількості живих церіодафній у контрольній воді. Оцінюють токсичність води за критерієм загибелі 50% і більше церіодафній. Якщо результат розрахунку становить менше 50% - експонування продовжують. Процес підраховування з розрахунком повторюють послідовно через 3, 6, 12, 24 і 48 годин експонування і припиняють при досягненні загибелі 50% і більше церіодафній. У такому випадку проба виявляє гостру летальну токсичність. Подальшу оцінку результатів розрахунку з визначенням ступеня токсичності води за критерієм загибелі 50% і більше церіодафній можна викласти, наприклад, у наступному вигляді: 5 Час біотестування, година 48 48 24 12 6 3 1 45053 Кількість загиблих тест-об'єктів, відсоток менше 50 50 і більше 50 і більше 50 і більше 50 і більше 50 і більше 50 і більше Клас токсичності води Ступінь токсичності І II III IV V VI VII Нетоксична Слаботоксична Помірно-токсична Середньотоксична Високотоксична Надзвичайно токсична Надзвичайно високотоксична Отже, запропонований спосіб забезпечує оперативне і достовірне виявлення гострої летальної токсичності природних і стічних вод, що вкрай ва Комп’ютерна верстка А. Крулевський 6 жливо, наприклад, при виникненні аварійних ситуацій. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601