Спосіб оцінки якості свіжозамороженої та замороженої плазми за параметром залишкової кількості тромбоцитів

Спосіб оцінки якості свіжозамороженої та замороженої плазми за параметром залишкової кількості тромбоцитів шляхом їх підрахунку, який відрізняється тим, що залишкову кількість тромбоцитів в 1 л плазми підраховують, враховуючи об'єм лічильної камери Горяєва і ступінь розведення плазми за формулою: Корисна модель відноситься до галузі медицини і може бути використана у виробничій трансфузіології. Проблема заготівлі якісної свіжозамороженої та замороженої плазми залишається актуальною, адже якість компонентів крові безпосередньо впливає на ефективність гемотрансфузійної терапії та безпеку клінічного використання (1,2,3). В якісно заготовленій свіжозамороженій та замороженій плазмі кількість залишкових клітин тромбоцитів не повинна перевищувати 50,0х109/л (4,5,6). Визначити залишкову кількість клітин тромбоцитів в плазмі можливо за допомогою лабораторних методів досліджень (автоматичного або мануального). Недоліком автоматичної техніки є невірне зчитування показників при низькому вмісті залишкових клітин. При мануальному методі досліджень, за допомогою мікроскопу, плазму розводять до відповідного ступеня. Підрахунок клітин проводять в камері для лабораторних досліджень кількості клітин еритроцитів, лейкоцитів, тромбоцитів. Недоліком мануальної техніки є відсутність чіткої методики проведення досліджень (7). Найближчим аналогом є оцінка якості свіжозамороженої та замороженої плазми за параметром залишкова кількість клітин тромбороцитів за допомогою лабораторного методу з використанням камери Nageotte (8) . Недоліком даного способу є відсутність реєстрації камери Nageotte в Україні. Завданням корисної моделі є контроль якості свіжозамороженої та замороженої плазми. Це досягається шляхом підрахунку залишкових клітин тромбоцитів в плазмі до заморожування за допомогою камери Горяєва (9). Для визначення якості свіжозамороженої та замороженої плазми за параметром залишкова кількість клітин тромбоцитів необхідно: І. До заморожування плазми якісно відібрати зразок гемосередовища, дотримуючись наступних вимог: - використовувати для відбору зразка з'єднувальні трубки полімерних плазмоконтейнерів довжиною 10-20см; - перед відбором зразка, досліджувану свіжозаморожену плазму ретельно перемішати для досягнення її однорідності; - залишок полімерної трубки заповнювати досліджуваним середовищем не менше чотирьох разів; - для герметизації лабораторного зразка використовувати високочастотний запаювач полімерних трубок; Α × 200 × 4 × 10 9 = Α × 2 × 10 9 / л, 400 де X - кількість тромбоцитів в 1 л плазми; А - кількість тромбоцитів, підрахованих в 25 великих (400 малих) квадратах; 200 - ступінь розведення плазми; 4x109 - множник, який приводить результат до об'1 об'єм рідини в малому єму 1 л, так як 4 × 10 9 квадраті; 400 - кількість малих квадратів. (19) UA (11) 45356 (13) U Χ= 3 - до відокремлення від контейнера зразок паспортизувати етикеткою ідентичною до етикетки досліджуваного середовища; - паспортизований зразок супроводжувати направленням. II. Хід виконання: 1) В суху пластикову пробірку відміряти 4,0мл 0,9% розчину хлориду натрію. 2) Додати 0,02мл плазми. 3) Піпетку ретельно промити в верхньому шарі реактиву, перемішати, залишити при кімнатній температурі на 20-30хв.. 4) Підготувати лічильну камеру Горяєва. Заповнену камеру лишити в горизонтальному положенні на 5хв. 5) Рахувати тромбоцити в 25 великих квадратах (400 малих). 6) Провести розрахунок залишкової кількості тромбоцитів в 1л плазми за формулою: Χ= Α × 200 × 4 × 10 9 = Α × 2 × 10 9 / л, 400 де: X - кількість тромбоцитів віл плазми; А - кількість тромбоцитів, підрахованих в 25 великих (400 малих) квадратах; 200 - ступінь розведення плазми; 4x10 9 - множник, який приводить результат до 1 9 об'єму 1л, так як 4 × 10 об'єм рідини в малому квадраті; 400 - кількість малих квадратів. Нормативний показник залишкової кількості клітин тромбоцитів в плазмі -не більше 50,0x109/л. Суть корисної моделі характеризується конкретними прикладами виконання Приклад №1 В камері Горяєва підраховано 40 клітин тромбоцитів. Підраховуємо залишкову кількість клітин тромбоцитів віл плазми за формулою: Χ= Α × 200 × 4 × 10 9 = Α × 2 × 10 9 / л, 400 де: X - кількість тромбоцитів віл плазми; А - кількість тромбоцитів, підрахованих в 25 великих (400 малих квадратів); 200 - ступінь розведення плазми; 4x109 - множник, який приводить результат до 1 9 об'єму 1л, так як 4 × 10 об'єм рідини в малому квадраті; 400 - кількість малих квадратів. Х = 40х2 = 80х109/л Висновок: залишкова кількість клітин тромбоцитів в плазмі становить 80x109/ л і перевищує нормативний показник 50,0x109/л, що не відповідає вимогам. 45356 4 Приклад №2 В камері Горяєва підраховано 20 клітин тромбоцитів. Підраховуємо залишкову кількість клітин тромбоцитів віл плазми за формулою: Χ= Α × 200 × 4 × 10 9 = Α × 2 × 10 9 / л, 400 де: X - кількість тромбоцитів віл плазми; А - кількість тромбоцитів, підрахованих в 25 великих чи 400 малих квадратах; 200 - ступінь розведення плазми; 4x10 9 - множник, який приводить результат до 1 9 об'єму 1л, так як 4 × 10 об'єм рідини в малому квадраті; 400 - кількість малих квадратів. Х = 20х2 = 40х109/л Висновок: залишкова кількість клітин тромбоцитів в плазмі становить 40x109/ л, не перевищує нормативний показник 50,0x109/л, що відповідає вимогам. Таким чином, запропонований спосіб оцінки якості свіжозамороженої та замороженої плазми за параметром залишкової кількості клітин тромбоцитів доступний для використання в усіх закладах Служби крові України. Спосіб дає можливість оцінити якість свіжозамороженої та замороженої плазми і не потребує значних матеріальних витрат. Список використаних джерел 1. «Інструкція по використанню полімерних контейнерів «Гемакон» і «Компопласт» МОЗ СРСР, Москва, 1983р., С.4 2. «Інструкція з фракціонування донорської крові на її компоненти (плазма, еритроцити, тромбоцити, лейкоцити) та їх консервування», наказ МОЗ України №164 відО5.07.99р., Київ, С.3 3. «Стандарти качества в службе крови» Є.Б.Жибурт, Росія, 2005р., С.60 4. «Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components», 5th edition, Council of Europe, 1999p., C.118 5. «Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components», 11th edition, Council of Europe, 2005р., С.135 6. «Керівництво з приготування, використання та забезпечення якості компонентів крові» КиївДніпропетровськ АРТ-ПРЕС, 11-е видання, 2006р., С.131 7. «Технічне керівництво Американська Асоціація Банків крові», 12-е видання, 1996р., С.1026 8. «Збірник правил і статей по переливанню крові» Варшава, 2000р., С.296 9. «Лабораторные методы исследований в клинике» В.В. Меньшиков, Москва, 1987р., С.101 5 Комп’ютерна верстка І.Скворцова 45356 6 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601