Спосіб запобігання стресової реакції організму

Спосіб запобігання стресової реакції організму шляхом введення антистресового препарату для корекції активності протеїназ, який відрізняється тим, що як антистресовий препарат використовують кверцетин, корегують активність протеїназ пригніченням ферментів альтернативних шляхів утворення анпотензину II, а саме хімази та тоншу, і судять про ефективність запобігання стресової реакції організму за рівнем хімази та/або тоншу Винахід відноситься до галузі біохімії та може бути використаний в медицині та ветеринари, зокрема для пригнічення активації альтернативних шляхів утворення вазопресорного пептиду анпотензину II (All), профілактики виникнення серцевосудинних захворювань, контролю терапії алергічних і запальних процесів, гострого інфаркту міокарда, коронарного атеросклерозу, бронхіальної астми Відомий спосіб запобігання стресової реакції організму (див Патент України №18035А, МПК А61К37/64, А61В10/00/Л М Самохина, Н Ф Стародуб // Промислова власність Офіц бюлетень 1994 - №1 - с 15), - прототип, який полягає у введенні у організм антистресового препарату, у якості якого використовують а-1-інгібітор протеїназ (а1-ІП) або його аналоги, наприклад трасилол Препарат вводять безпосередньо після дії стресового фактору Судять про ефективність дії препарату за рівнем протеїназ і а-1-ІП у крові У цьому способі здійснюють запобігання стресової реакції організму шляхом корекції загальної активності протеїназ, а взагалі корегують дефіцит а-1-ІП, що виникає в результаті розвитку стресової реакції зопресорного пептиду АП Ця задача вирішується тим, що вводять антистресовий препарат для корекції активності протеїназ У якості антистресового препарату використовують кверцетин Корегують активність протеїназ пригніченням ферментів альтернативних шляхів утворення All, а саме хімази та тоншу Судять про ефективність запобігання стресової реакції організму за рівнем хімази та/або тоншу Використання антистресорного препарату кверцетину (3,3,4,5,7-пентапдроксифлавону) обумовлено його антизапальними та антиоксидантними властивостями, тому що окислювальний стрес призводить до зростання утворення і вивільнення клітинами організму цитокшів/медіаторів запалення, а саме штерлейкшу-1, фактору некрозу пухлин-а і молекул міжклітинної адгези-1, вони підвищують проникність судин і служать хемоатрактантами лейкоцитів Більшу частину лейкоцитів становлять нейтрофіли, котрі при активації утворюють супероксид-анюни, що генерують такі токсичні ПОХІДНІ, як перекис водню, пдроксилрадикал, хлораміни, ппохлорна кислота, а також сприяють вивільненню протеїназ, таких як еластаза, колагеназа, протешаза 3 і катепсину G, що є одним з ферментів альтернативних шляхів утворення All Недоліком відомого рішення є те, що у цьому способі не враховується активація ферментів альтернативних шляхів утворення вазопресорного пептиду АП, що виникає в результаті стресової реакції В основу винаходу поставлена задача розробки такого способу запобігання стресової реакції організму, у якому буде пригнічуватись активність ферментів альтернативних шляхів утворення ва Вибір критерію ефективності запобігання стресової реакції рівня хімази обумовлено тим, що хімаза - один з основних ферментів альтернативного, незалежного від анпотензинперетворюючого ферменту, шляху утворення вазоконстрикторного пептиду АІ із АІ у серці людини, і є хемотаксичним (О 46411 чинником для нейтрофілів та інших клітин, які приймають участь у розвитку запальних процесів Крім того, активація альтернативного шляху може спостерігатися в результаті навантаження, стресу, а серед ефектів All - збільшення окислювального стресу Вибір критерію ефективності препарату рівня тоншу обумовлено тим, що в альтернативному шляху утворення All також бере участь тонін, який каталізує (як і катепсин G) розщеплення не тільки АІ, але й анпотензиногену Перевага вибору між катепсином G і тоніном саме за тоніном обумовлена наявністю у катепсину G властивостей, які не мають відношення до утворення АП Вибір критерію ефективності препарату або рівня хімази, або тоншу обумовлено тим, що хімаза щурів, також собак, кроликів і мишей має меншу локальну активність у порівнянні з хімазою людини, крім того, хімаза утворює All із АІ у людей, приматів, собак, тоді як у щурів і мишей вона розщеплює All, тим самим підвищення активності тоншу на фоні відсутності змін рівня хімази свідчить про локальну активацію альтернативного шляху утворення All Дослідження по запропонованому способу проведені в Інституті терапії АМН України, які показали що введення в організм кверцетину в дозі ЮОмг на 100г ваги експериментальним тваринам порівняно з дією а-токоферолу, пентоксифілшу за умов окислювального стресу запобігає активації альтернативних шляхів утворення All Відтвореність - ступінь вірогідності відмінностей не перевищує 5% Запропонований спосіб здійснюють у такій ПОСЛІДОВНОСТІ 1 Вводять антистресовий препарат, а саме кверцетин Борщаговського хімфармкомбшату внутрішньочеревинно в дозі ЮОмг на 100г ваги експериментальних тварин або людям, які часто зазнають нервових подразнень, з імунологічними порушеннями чи хворим на серцево-судинну хворобу (з підвищеною активністю альтернативних шляхів утворення АП) у фармакопейно прийнятих дозах 2 Судять про ефективність запобігання стресової реакції організму за рівнем хімази та/або тоншу, які визначають у біологічному матеріалі (сироватка крові, гомогенати тканин щурів та шш , останні попередньо центрифугують Юхв при 5000д на центрифузі типу РС-6 при 4°С і зберігають при необхідності за умов -20°С до аналізу) Визначення рівнів хімази та/або тоншу проводять відомим методом, наприклад згідно Пат України № 34208 А або 32131 А, Заявки на винахід № 2000031815 від 31 03 2000 р, позитивне рішення від 19 01 2001 р ВІДПОВІДНІСТЬ активності хімази та/або тоншу нормальним значенням свідчить про відсутність активації альтернативних шляхів утворення All і таким чином, про запобігання розвитку стресової реакції організму Можливість здійснення запропонованого способу підтверджується прикладами Приклад 1 Запобігання стресової реакції організму щурів за умов окислювального стресу, що викликано введенням хлориду кобальту Одній групі тварин вводили хлорид кобальту (СоСЬ 6Н2О) у дозі Змг на 100г ваги тіла Згідно винаходу, другій групі за 2 год до ін'єкції хлориду кобальту вводили кверцетин Борщаговського хімфармкомбшату у дозі ЮОмг на 100г ваги тіла Контрольній групі тварин вводили фізіологічний розчин у ВІДПОВІДНІЙ дозі Щурів декапітували через 2 год після ін'єкції хлориду кобальту Печінку перфузировали охолодженим фізіологічним розчином Тканини легень, серця, печінки і нирок (300мг) гомогенизировали в Змл Na-фосфатного буферу рН 7,4 - 7,6 при 4 6°С Стримані гомогенати центрифугували Юхв при 5000д на центрифузі РС-6 при 4°С Зберігали при -20°С до аналізу Досліджували ефективність запобігання стресової реакції за рівнем хімази та/або тоншу, який визначали відомим методом, наприклад згідно Пат України № 34208 А, 32131 А, Заявки на винахід № 2000031815 від 31 03 2000 р Результати дослідження Активність хімази становить - за умов введення хлориду кобальту у легенях-13,6% (8,41 ± 2,28 у контролі), у серці -10,87% (7,84 ±3,04 у контролі), у печінці -12,08% (9,01 ± 3,08 у контролі), у нирках - 23,5% - значно зростає (12,57 ± 4,25 у контролі), - за умов попереднього введення кверцитину у легенях - 6,72%, у серці -7,32%, у печінці -11,25%, у нирках -13,3% - наближається до норми, Активність тоншу становить - за умов введення хлориду кобальту у легенях - 13,5% - не змінюється (16,87 ± 3,43 у контролі), у серці - 14,96% - зростає (9,45 ± 2,46 у контролі), у печінці - 15,79% - зростає (7,46 ± 2,62 у контролі), у нирках - 9,61% - не змінюється (11,78 ± 3,85 у контролі), - за умов попереднього введення кверцитину у легенях - 6,72%, у серці - 7,32% - нормалізується, у печінці -11,25% - наближається до норми, у нирках -13,3% Рівень хімази та тоншу за умов введення кверцитину відповідає нормальним значенням, що свідчить про запобігання розвитку стресової реакції організму, а саме активації альтернативних шляхів утворення All Приклад 2 Запобігання стресової реакції організму у людей за умов дії нервових стимулів Згідно винаходу, людині, яка скаржиться на часті нервові збудження та розлад, вводили кверцетин Борщаговського хімфармкомбшату у фармакопейно прийнятих дозах (Для кращої впевненості у необхідності використання запропонованого способу до призначення кверцитину проводять визначення рівня хімази та/або тоншу у сироватці крові) Досліджували ефективність запобігання стресової реакції за рівнем хімази та/або тоншу, який визначали відомим методом, наприклад згідно 5 46411 6 Пат України № 34208 А, 32131 А, Заявки на винагає у пригніченні активації альтернативних шляхів хід № 2000031815 від 31 03 2000 р утворення All, і оцінки ефективності використання Результати дослідження в якості антистресового препарату кверцетину за Активність хімази становить - 1,6%, що відпорівнем хімази та/або тоншу відає нормальному значенню (1,13 ± 0,52 у контВикористання запропонованого способу в меролі), дичній практиці дозволяє забезпечити пригнічення Активність тоншу становить - 5,1%, що близьактивності ферментів альтернативних шляхів ко до нормального значення (3,22+ 1,21 у контроутворення All, сприяє профілактиці розвитку патолі) логічного стану організму Вказані приклади підтверджують можливість запобігання стресової реакції організму, що поля ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044)456-20- 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71