Спосіб діагностики харчової алергії у хворих на бронхіальну астму дітей

Спосіб діагностики харчової алергії у хворих на бронхіальну астму дітей шляхом дослідження проби крові, який відрізняється тим, що дві проби крові шкубують з нітросинім тетразолієм, стимулюючи одну з них пірогеналом, потім обчислюють різницю середніх ЦИТОХІМІЧНИХ коефіцієнтів стимульованого і спонтанного варіантів тесту, у випадку, якщо вона має від'ємне значення, констатують наявність харчової алергії Винахід відноситься до галузей медицини, пульмонології та алергологи, метою його є розробка діагностичних ПІДХОДІВ ДО виявлення прихованої харчової алергії у хворих на бронхіальну астму дітей для удосконалення профілактичних та лікувально-реабілітаційних заходів, спрямованих на корекцію зрушень в дитячому організмі, які спостерігаються у пацієнтів з бронхіальною астмою Бронхіальна астма в дитячому ВІЦІ Є ДОСИТЬ розповсюдженою патологією, якій притаманний тісний взаємозв'язок із харчовими алергенами Харчова алергія може носити у цих хворих замаскований, аклінічний характер, тому питання виявлення особливостей перебігу, діагностики та лікування бронхіальної астми у дітей з харчовою алергією мають велике значення для практичних лікарів За даними сучасної літератури частота харчової алергії у дітей коливається в широких межах від 5 до 50% [Дмитришин Б Я Причини формування харчової алергії у дітей раннього віку// ПАГ 1997 - № 5 - С 116-18, Global initiative for asthma management and prevention NHLBI/WHO Workshop Report March 1993 - National Heart, Lung and Blood Institute of Health January, 1995 - Washington, 1995] Джерелом сенсибілізації у дітей з бронхіальною астмою на думку інших авторів, у 26% виступають харчові алергени, в 76% - сполучення трофалергенів з іншими (пилковими, епідермальними) [Rowe A H , Rowe AG In Food Allergy1972-Springfield] ведення харчового щоденника для проведення елімінації підозрюваного на алергогенність харчового продукту [Диагностика и диетотерапия пищевой аллергии у детей раннего возраста Методические рекомендации - М Медицина, 1987- 32с, Клинические реакции на пищу (Под ред M X Лессоф Пер с немец)- М Медицина, 1986] Широке клінічне використання в діагностиці харчової алергії отримали шкірні проби з введенням антигенів, виготовлених з харчових продуктів, одначе вони можуть бути як хибно позитивними, особливо в ранньому ВІЦІ, так і хибно негативними у випадках, коли алергогенність притаманна не продуктам, а їх фрагментам, що утворюються в процесі травлення [Ногаллер А М Пищевая аллергия - М, Медицина, 1983] Метод визначення специфічних імуноглобулінів Е у сироватці крові є достатньо чутливим, але вельми коштовним тестом Внаслідок цього він є малодоступним для широкого загалу практикуючих лікарів Водночас навіть у хворих на бронхіальну астму дітей високий рівень як загального, так і специфічних імуноглобулінів Е-антитіл спостерігається лише у 45 - 78% випадків [И И Балаболкин, С Бабаева, С А Саламатова Специфический IgEи ІдС4-ответ у детей с инфекционноаллергической и смешанной формами бронхиальной астмы// Иммунология -1993 - № 1 - С 40 - 42], вірогідно, за рахунок їх фіксації у тканинах Найбільше значення в діагностиці харчової алергії має ретельне клінічне спостереження за ПОСЛІДОВНІСТЮ розвитку симптомів алергії, їх зв'язком з різними факторами зовнішнього середовища, характером вживаних продуктів за допомогою До аналогів способу, що заявляється, можна віднести "Способ выявления аллергена, вызывающего бронхиальную астму" (автори - И М Скипский, Г Б Федосеев, О А Страшинина, Н В Сыромятникова) [Бюлетень изобретений- 1986№ 1 - С 16 - АС № 1202558], в якому in vitro ви ГО о Ю 50234 значалась густина харкотиння до та після додавання алергену Слід зауважити, що у дітей, на відміну від дорослих, отримати харкотиння дуже важко внаслідок вікових особливостей, що утруднює використання даного способу в педіатричній практиці Прототипом способу, що заявляється, обраний «Способ выявления пищевого аллергена» [Бюллетень изобретений- 1988- № 48 - С 227АС № 1532872], в якому за допомогою підвищення коефіцієнту хемілюмінесценції суміші секрету травного каналу із стандартними харчовими алергенами в порівнянні із контролем роблять висновок про причинну роль окремих трофалергенів Даному прототипу притаманний ряд суттєвих недоліків, головним з яких є необхідність проведення ендогастрального зондування дітей за відсутності показань для цього з боку органів травлення Проведення цієї маніпуляції різко обмежене віком пацієнтів, а також регламентується важкістю стану хворих, які страждають на бронхіальну астму Завданням способу, що заявляється, є максимальне спрощення процесу виявлення харчової алергії у дітей, зокрема при її безсимптомному перебізі, як причинного фактору розвитку бронхіальної астми для оптимізацм лікувальнопрофілактичних заходів цій групі хворих Даний спосіб є загальнодоступним, інформативним, не потребує складної і коштовної апаратури і реактивів і дозволяє в короткий термін підтвердити причинну роль харчової алергії у розвитку та загостренні бронхіальної астми в дітей, навіть якщо ознак непереносимості харчових продуктів немає або вони слабко виражені Поставлене завдання досягається наступним чином у хворих на бронхіальну астму дітей інкубують дві проби крові (одна із додаванням пірогеналу) з нітросинім тетразолієм (НСТ-тест), визначають середній ЦИТОХІМІЧНИЙ коефіцієнт (ЦХК) еозинофільних лейкоцитів крові в спонтанному та стимульованому пірогеналом варіантах та обчислюють різницю стимульованої і спонтанної проби, оцінюючи, таким чином, резерв киснево залежної мікробіцидності еозинофільних гранулоцитів крові як критерій наявності асимптоматичної харчової алергії у хворих на бронхіальну астму дітей у випадках його від'ємного значення Технічне вирішення способу, що заявляється, відрізняється від прототипу тим, що в якості показника наявності прихованої харчової алергії у хворих на бронхіальну астму використовують негативний резерв киснево залежної мікробіцидності еозинофілів периферичної крові за даними НСТтесту, обчислений як різниця їх стимульованого і спонтанного ЦХК Ця ВІДМІННІСТЬ ДОЗВОЛЯЄ зробити висновок про ВІДПОВІДНІСТЬ технічного вирішення, яке заявляється, критерію новизна Суттєва ознака, яка відрізняє технічне вирішення, що заявляється, від прототипу, не виявлена у інших технічних вирішеннях при вивченні даної та суміжних галузей науки, та, таким чином, забезпечує ВІДПОВІДНІСТЬ рішення, яке заявляється, критерію "суттєва ВІДМІННІСТЬ" Спосіб здійснюють таким чином Забір венозної крові становить 0,5мл, які вносять в сіліконізовану пробірку з гепарином (10 ОД/мл) 3 цієї проби по 0,1мл крові вносять у дві пробірки, в одну з яких додають 0,05мл стерильного пірогеналу, а в іншу - 0,05мл фосфатного буферу (рН-7,2) Через 5 хвилин при кімнатній температурі в кожну пробірку додається по 0,1мл 0,1% розчину НСТ на фосфатному буфері Після струшування, перемішування проби шкубують 10 хвилин при +37° в термостаті Після 15-хвилинного охолодження при кімнатній температурі впродовж 5 хвилин проби центрифугують (1000 G), з верхньої частини осаду роблять мазки, які висушують, фіксують 5 хвилин в метанолі (або у суміші НІКІфорова), фарбують реактивом Піралішвілі протягом 45 - 50 секунд та підраховують клітини при мікроскопи (зб 900, об 90, ок 10) в 50 еозинофілах з визначенням середнього ЦХК 1а + 2 + Зс , де а, б, с - відсоток еози100 нофілів з різним ступенем реакції, які визначались за ступенем інтенсивності специфічного забарвлення гранул [Astaldi G , Uerga 1 //Acta Haematol (Basel) -1957 -Vol 17 - P 129-135] Резерв киснево залежної мікробіцидності еозинофільних гранулоцитів крові визначають як різницю ЦХК стимульованого НСТ тесту - ЦХК спонтанного НСТ тесту У випадках, коли цей показник був від'ємним, діагностували наявність харчової алергії у хворої на бронхіальну астму дитини, навіть за умов відсутності КЛІНІЧНИХ ознак наявності непереносимості їжі Показники епідеміологічної значущості даного тесту оцінені у 100 дітей з бронхіальною астмою, половина з яких мала клініко-параклінічні ознаки харчової алергії, верифікованої за допомогою шкірних проб з трофалергенами та на підставі підвищеного вмісту специфічних імуноглобулінів Е до харчових алергенів, а у 50 пацієнтів за допомогою вищенаведених імуно-алерголопчних обстежень наявність харчової алергії була виключена В таблиці наведені показники діагностичної ЦІННОСТІ від'ємних значень резерву киснево залежної мікробіцидності еозинофільних гранулоцитів крові, за даними НСТ-тесту цих гранулоцитів, у хворих на бронхіальну астму дітей щодо верифікації харчової алергії як причинного фактору даного захворювання Таблиця Діагностична ЦІННІСТЬ ВІД'ЄМНОГО резерву киснево залежної мікробіцидності еозинофілів крові (за даними НСТ-тесту) у хворих на бронхіальну астму дітей (в %) Чутливість Специфічність 73,9 88,4 Передбачувана ЦІННІСТЬ Позитивна 87,2 Негативна 76,0 Розповсюдженість Точність 80,9 51,7 50234 Таким чином, від'ємне значення різниці ЦХК еозинофілів крові стимульованого і спонтанного варіантів НСТ-тесту з високим ступенем специфічності, чутливості та передбачуваної ЦІННОСТІ І розповсюдженості може використовуватись для виявлення харчової алергії у дітей з бронхіальною астмою, навіть за умови асимптоматичного перебігу алергії Це за умови простоти і доступності даного способу дозволить не тільки полегшити діагностичний пошук причинно значущих алергенів при розвиткові бронхіальної астми, але й зменшити КІЛЬКІСТЬ І важкість приступів, що дозволить досягти позитивного вплинути на стан пацієнтів із даною хронічною патологією КЛІНІЧНІ приклади 1 Хвора Жекел Галина Костянтинівна, 3 роки, історія хвороби № 273 (1988 р), поступила у пуль монологічне відділення Обласної дитячої клінічної лікарні з приступом бронхіальної астми Діагноз КЛІНІЧНИЙ Бронхіальна астма, змішана форма, приступний період, середньої важкості, ДН І-ІІ ст КЛІНІЧНИХ проявів харчової алергії немає Резерв киснево залежної мікробіцидності еозинофілів крові (-) 0,14 умов од Шкірні проби з алергенами домашній пил Змм, куряче яйце - 6мм ІдЕ загальний - 23 МО/л, специфічні Ід Е до трофалергенів курячий білок - 2, яйце - 3, молоко - 0, риба - 0 2 Хворий Гортолан Андрій Васильович , 2 роки 10 міс , історія хвороби № 982 (1987 р), поступив у пуль монологічне відділення ОДКЛ з приступом бронхіальної астми Діагноз КЛІНІЧНИЙ Бронхіальна астма, приступний період, інфекційно-алерпчна форма, середньої важкості, ДН І ст КЛІНІЧНІ прояви харчової алергії відсутні Резерв киснево залежної мікробіцидності еозинофілів крові (-) 0,02 умов од Шкірні проби з алергенами домашній пил 6мм, овальбумін - 6мм, коров'яче молоко - 4мм, риба - 6 мм, пух, перо - 4мм ІдЕ загальний - 64 МО/л З Хворий Кадик Сергій Дементійович, 5,5 років, історія хвороби № 1905 (1987р) Поступив у пуль монологічне відділення ОДКЛ з діагнозом Бронхіальна астма, атонічна форма, приступний період, середньої важкості, ДНІ КЛІНІЧНІ прояви харчової алергії відсутні Резерв киснево залежної мікробіцидності еозинофілів крові (+)0,17 умов од Шкірні проби з алергенами коров'яче молоко негат, риба - негат, домашній пил - 6мм, пух, перо - 6мм ІдЕ загальний - 11 МО/л, специфічні Ід Е до трофалергенів молоко - 0, риба-0 Таким чином, використання способу, що заявляється, дозволяє забезпечити надійність та достовірність у виявлені прихованих форм харчової алергії у хворих на бронхіальну астму дітей, що робить можливою раціоналізацію лікувальнопрофілактичних заходів для покращання і стабілізації стану хворих Окрім того, відпадає потреба у необгрунтованих обмеженнях в харчовому раціоні та в проведенні коштовних, але нерідко малоінформативних обстежень Цим забезпечується позитивний вплив на характер перебігу бронхіальної астми у дітей, а також отримання позитивного економічного ефекту ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71