Спосіб визначення ендотеліальної дисфункції судин шкіри

Спосіб визначення ендотеліальної дисфункції судин шкіри шляхом електрофорезу холіноміметиків, який відрізняється тим, що на ділянку шкіри передпліччя проводять електрофорез 1,0 % роз 3 ною є методика стимуляції активності ендогенного АХ. Найбільш близьким до заявляемого технічного рішення є спосіб визначення стану шкіри (потовиділення) шляхом електрофорезу пілокарпіну [2]. Пілокарпінова проба основана на визначенні вмісту хлоридів у потовій рідині. При проведенні проби пілокарпін вводиться шляхом електрофорезу (0,5 мкА на протязі 2,5 хв), після чого здійснюється збір поту (3-6 мікролітрів), який зважується і потім визначається вміст іонів хлору та натрію на основі дослідження електропровідності поту. Подібна проба застосовується переважно у дітей з метою скринінгової діагностики муковісцидозу [4] і до останнього часу не використовувалась для визначення ендотелій - залежних форм регуляції стану судин. В основу корисної моделі поставлена задача вдосконалення існуючого способу шляхом застосування іонтофорезу препарату, який викликає тривалі зміни функціонального стану ендотеліоцитів, що дозволить проводити чіткі повторні вимірювання показників мікроциркуляції судин шкіри. Поставлена задача вирішується тим, що, згідно корисної моделі, на ділянку шкіри передпліччя проводять електрофорез 1,0 % розчину пілокарпіну протягом 1,0-1,5 хв при силі струму в 1,0-1,5 мкА, після чого вимірюють об'ємну швидкість течії крові починаючи з 5-ї по 15 хв з моменту припинення електрофорезу, порівнюють отримані величини об'ємної швидкості течії крові з даними контрольних вимірювань, які було проведено до початку електрофорезу пілокарпіну, і при відхиленні цих показників менше ніж на 25 % та більше ніж на 35 % визначають стан ендотеліальної дисфункції судин шкіри. При вирішенні поставленої задачі виходили з того, що на сьогодні чітко показана можливість електрофоретичного введення препаратів - холіноміметиків, які здатні викликати накопичення ендогенного АХ за рахунок інгібування АХ-естерази. Припускали, що їх застосування потребує розробки технології оцінки змін об'ємної швидкості току крові, яка б базувалась на часових характеристиках впливів, що викликані електрофоретичним застосуванням пілокарпіну. Крім того, виходили з принципової можливості посилення продукції оксиду азоту за умови впливу пілокарпіну [3]. Спосіб виконується наступним чином. На ділянці шкіри передпліччя у пацієнта, який знаходиться в положенні сидячи чи лежачи за допомогою постійнохвильової високочастотної доплерографії (прилад «Мінімакс-Допплер-К», СПб, РФ) вимірюють швидкість кровотоку в мікроциркуляторному руслі за допомогою датчика з частотою випромінювання 25МГц. Отримані результати об'ємної швидкості току (Qas) крові виражають в мл/сек/см3. Після цього на цю ж ділянку шкіри передпліччя проводять електрофорез розчину пілокарпіну (1,0%) на протязі 1,0-1,5 хв при силі струму в 1,01,5мкА, після чого повторно похвилинно вимірюють об'ємну швидкість току крові, починаючи з 5-ї до 15хв з моменту припинення електрофорезу, та порівнюють отримані величини з контрольними вимірюваннями, які було проведено до початку 51489 4 електрофорезу пілокарпіну. Згідно власного набутого в процесі тривалих досліджень досвіду, збільшення отриманих показників на 25 – 35 % визначають як фізіологічну норму. Відповідно, зменшення цих показників менше 25 % свідчить про недостатню функцію ендотелію у відношенні продукції оксиду азоту, а збільшення вище 35 % посилення системи ендотелій – залежного синтезу оксиду азоту, що в обох випадках визначається як дисфункція ендотелію судин шкіри. Приклад конкретного виконання способу. Хворій В., 27 років на ділянці шкіри передпліччя в положенні сидячи за допомогою постійнохвильової високочастотної доплерографії (прилад «МінімаксДопплер-К», СПб, РФ) виміряли швидкість кровотоку в мікроциркуляторному руслі за допомогою датчика з частотою випромінювання 25МГц. Цей показник склав 1,10 мл/сек/см3. На цю ж ділянку шкіри передпліччя провели електрофорез розчину пілокарпіну (1,0%) на протязі 1,0-1,5 хв при силі струму в 1,0-1,5 мкА, після чого повторно похвилинно виміряли об'ємну швидкість току крові, починаючи з 5-ї до 15 хв з моменту припинення електрофорезу. Максимум показника Qas спостерігався на 7-11- й хвилинах з моменту припинення електрофорезу і склав 1,43 мл/сек/см3. Таким чином, приріст об'ємної швидкості току крові склав 30,0 %, що відповідає фізіологічній нормі. Висновок: стан ендотеліальної функції судин шкіри в межах норми. Перевагою розробленого способу визначення функціонального стану ендотелію є тривалий період спостереження відповідних ефектів, на протязі якого можна робити повторні вимірювання, що дозволяє більш точно зробити висновок відносно змін мікроциркуляції, які спостерігають в післяелектрофоретичному періоді. Як показала практика використання даної технології, в усіх випадках проведення проби було отримано достовірні результати щодо стану ендотелій - залежних механізмів регуляції показників мікроциркуляції крові судин шкіри. Таким чином, розроблений спосіб визначення ендотеліальної дисфункції судин шкіри у порівнянні з прототипом дозволяє більш надійно провести визначення показника об'ємної швидкості току крові, а також інших функціональних показників мікроциркуляції, завдяки повторним вимірюванням на протязі відносно тривалого проміжку часу та більш вірогідно визначитися з рівнем функціональної активності ендотеліоцитів. Джерела інформації: 1. Васина Е.Ю., Лозовская О.М., Меншутина М.А., Рябова М.А. Использование фармакологических аппликационных проб для оценки дисфункции эндотелия сосудов слизистой носовой полости // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2003. - №4. - С.50-52. 2. Муковисцидоз. Современные достижения и актуальные проблемы. Методические рекомендации / Под ред. Капранова Н.И., Каширской Н.Ю. М.,2005. 110 с. 3. De Couto Pita A., Passafaro D., Ganzinelli S., Borda E., Sterin-Borda L. Differential cholinoceptor modulation of nitric oxide isoforms in experimentally 5 51489 induced inflammation of dental pulp tissue// International Endodontic Journal.-2009.-Vol. 42.-P. 525-533. Комп’ютерна верстка В. Мацело 6 4. Southern K.W., Munck A., Pollit R. et al. A survey of newborn screening for cystic fibrosis in Europe// J. Cystic Fibrosis.- 2007.- Vol.6.- P.57-65. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601