Спосіб моделювання захворювання тканин пародонту у тварин

Спосіб моделювання захворювання тканин пародонту у тварин, який включає початкове моделювання метаболічного ацидозу та резорбції кісткової тканини альвеолярних паростків щелеп, який відрізняється тим, що під наркозом здійснюють операцію хірургічної кастрації тварин, після чого вивчають біохімічні зміни в тканинах пародонту, інших тканинах організму і вивчають стан кісткової тканини альвеолярних паростків щелеп через 30-40 днів після проведення оперативного втручання Винахід відноситься до галузі медицини, а саме до експериментальної стоматологи, де передбачено моделювання захворювання тканин пародонту у тварин з метою подальшого визначення тактики лікування захворювання тканин пародонту у людини Існує спосіб моделювання захворювання тканин пародонту, який виконується слідуючим чином до раціону тварин, наприклад щурів, додається хлористий амоній із розрахунку 4 мг на грам маси щурів, вранці, до основного годування, навпротязі 1-го місяця У експериментальних тварин розвиваються явища метаболічного ацидозу, притаманні генералізованому пародонтиту, та резорбція кісткової тканини альвеолярних паростків нижніх щелеп (1) Недоліком вищеназваного способу є труднощі, які пов'язані з необхідністю ретельного контролю за годуванням тварин, при чому, в раціон харчування додається хлористий амоній - хімічна речовина, яка інколи визиває негативну реакцію у дослідних тварин, доводиться насильно проводити годування Завданням заявляемого винаходу є забезпечення більш щадящего підходу до тварин, запобігання ускладнень щодо інших органів тварин в зв'язку з тим, що запропонований спосіб не пов'язаний із введенням до раціону щурів хімічної речовини, а передбачає вплив на тварин під контрольованим наркозом Завдання досягається тим, що, під наркозом здійснюють операцію хірургічної кастрації тварин, наприклад щурів, з послідуючим вивченням змін в тканинах пародонту та в інших тканинах організму через 30-40 днів після проведення оперативних втручань В моделюванні захворювання тканин пародонту приймали участь ЗО самок щурів, віком 5міс , середньою вагою 161 грам Серед тварин виділили контрольних щурів (6 тварин), яким не проводили кастрацію, та щурів (24 тварини), яким проводили операцію хірургічної кастрації Заявляємий спосіб виконують слідуючим чином під ефірним наркозом, після обробки операційного поля 5% спиртовим розчином йоду, розрізом 1см довжиною в нижній трітині животу пошарове розкривають черевну порожнину При ревізії виділяють матку, труби яєчників і обидва яєчникі На труби яєчників накладають ПОДВІЙНІ лігатури, труби яєчників пересікають та яєчники видаляють Культі труб яєчників обробляють 5% спиртовим розчином йоду Проводять гемостаз Операційну рану пошарово ушивають наглухо та обробляють антисептичним розчином Тривалість оперативного втручання становить 5-7 хвилин Далі, тварин розміщують по клітках, де проходить їх адаптація після дії ефірного наркозу (7-10 хвилин) Післяопераційний період проходив без особливостей і становив 30-40 днів Після цього, тварин під ефірним наркозом декапітують За умов низької температури забирають кісткову тканину нижніх щелеп, слизову оболонку ясен, тканину печінки для біохімічних досліджень, та для вивчення змін в КІСТКОВІЙ тканині щелеп Стан кісткової тканини альвеолярних паростків нижніх щелеп оцінюють за інтенсивністю резорбнм кістки ю о> о> ю 54995 по абсолютному оголенню коренів зубів на бінокулярному мікроскопі в одиницях (1од=0,1мм) (2) Вміст окиснених та відновлених нікотинамідних коферментів визначають в спиртових екстрактах спектрофотометрично по утворенню НАД Н в присутності ВІДПОВІДНИХ ферментів при довжині хвилі 340нм (3) Визначення вмісту сульфгідрильних груп та дісульфідних з'єднань проводять за допомогою реактиву Елл мана за КІЛЬКІСТЮ утворюючегося тюнітрофенільного аніону (ТНФА) прямопропорційного КІЛЬКОСТІ вільних сульфгідрильних груп (4) Цифрові результати статистично обробляють з використанням критерію! Стьюдента (5) В результаті проведених експериментальних досліджень встановлено, що хірургічна кастрація у тварин викликає резорбцію кісткової тканини альвеолярних паростків нижніх щелеп, яка є однією з основних ознак прояву генералізованого пародонтиту (див табл 1) Також при кастрації самок щурів відмічають значне збільшення вмісту відновлених нікотинамідних коферментів (НАД Н), зниження вмісту окиснених форм коферментів (НАД) і відношень НАД/НАД Н, що свідчить про зниження окисних і підвищення відновних властивостей в досліджуваних тканинах організму тварин (див табл 2) Такі зміни говорять про те, що виникає та розвивається компенсований метаболічний ацидоз за рахунок підвищення відновних властивостей тканин Окисно-відновний статус сульфгідрильних груп (SH) також відіграє важливу роль у деяких функційних клітинних процесах Змінам співвідношення тіоли/дисульфіди (SH/SS) приділяється роль регулятора процесів обміну Розвиток явищ компенсованого метаболічного ацидозу після хірургічної кастрації тварин супроводжується збільшенням відновних властивостей в тканинах організму (див табл 2), що підтверджується підвищенням вмісту сульфгідрильних груп і відношення тіоли/дисульфіди при одночасному зменшенні вмісту дисульфідів (SS) Вищеназвані біохімічні зміни, насамперед в КІСТКОВІЙ тканині нижніх щелеп та слизовій оболонці ясен, так, як і резорбція кісткової тканини альвеолярних паростків нижніх щелеп у кастрованих тварин являються основними проявами запальнодистрофічного процесу в тканинах пародонту генералізованого пародонтиту Таким чином операція хірургічної кастрації самок щурів безумовно може бути використана при моделюванні захворювання тканин пародонту Запропонований спосіб моделювання захворювання тканин пародонту дозволяє забезпечити виникнення компенсованого метаболічного ацидозу та резорбцію кісткової тканини альвеолярних паростків нижніх щелеп у тварин без додаткового їх травмування ХІМІЧНОЮ речовиною - хлористим амонієм В зв'язку з тим, що запропонована операція хірургічної кастрації тварин не викликає побічних негативних явищ, пов'язаних із введенням ХІМІЧНИХ речовин, забезпечується запобігання втрати тварин, що пов'язано з тривалістю та ходом експерименту 1 А с 1399807 СССР МКИ 4 G 09 В 23/28 Способ моделирования пародонтита / Пахомова В А, Мельничук Д А , Журавский Н И , Крюкова ГН - Опубл 30 05 88 Бюлл Изобретений -1988 -№20 2 Пахомова В А Роль метаболического ацидоза в патогенезе пародонтита и пути его коррекции Автореф дис д-ра мед Наук - К , 1992 -51с 3 Методы биохимических исследований / Под ред Прохоровой М И - Л Изд-во Ленингр ун-та, 1982 -С 161-164, 181-183 4 Веревкина И В , Точилкин А И , Попова Н А Колориметрический метод определения SH-rp и S-S-связей в белках при помощи 5,5-дитиобис (2нитробензойной) кислоты // Современные методы биохимии -М Медицина, 1977 -223,231с 5 Білоклицька ГФ , Пахомова В О, Мельничук Д О , Протункевич О О , Петі А О , Сандига ЛГ Нові можливості корекції метаболічного ацидозу за умов експериментального пародонтиту // ФІЗІОЛОГІЧНИЙ журнал - 2000 - Т 46, №5 - С 77-82 Резорбція альвеолярних паростків нижніх щелеп самок щурів при моделюванні генералізованого пародонтиту Тварини (щури) Таблиця 1 Самки Вік 5 МІСЯЦІВ 1-й моляр 2-й моляр 3-й моляр Група 1 (контрольна) 7,96±0,32 7,26±0,30 8,05±0,38 Група 2 (кастровані щури) *12,4±0,5 *14,76±0,49 *22,24±0,68 Примітка * означає достовірну різницю (р