Спосіб післяопераційної імунопрофілактики метастазів

Спосіб післяопераційної імунопрофілактики метастазів, що включає ад'ювантне використання фактора переносу, який відрізняється тим, що застосовують ксеногенний пухлиноспецифічний фактор переносу, отриманий із лімфоцитів селезінки щурів на 14-у добу після імунізації клітинами мишачої карциноми легені Льюїс, у сполученні з циклофосфамідом у цитостатичній дозі. (19) (21) u201014155 (22) 29.11.2010 (24) 10.05.2011 (46) 10.05.2011, Бюл.№ 9, 2011 р. (72) ФІЛЬЧАКОВ ФЕОДОСІЙ ВІКТОРОВИЧ, ЛЬОН ГАННА ДАРІЇВНА, ШУМІЛІНА КАТЕРИНА СТАНІСЛАВІВНА, ГРІНЕВИЧ ЮРІЙ ЯКИМОВИЧ (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ ІНСТИТУТ РАКУ 3 номи легені Льюїс (КЛ), та циклофосфаміду (у цитостатичній дозі), що дасть можливість запобігти виникненню метастазів в легенях мишей з підшкірною КЛ. Поставлена задача вирішується таким чином: Ксеногенний пухлиноспецифічний ФП отримують з лімфоцитів селезінки щурів на 14-у добу після внутрішньоочеревинної імунізації живими клітинами КЛ згідно методики [8]. Інтактним мишам C57BL/6 в стопу задньої лапи підшкірно перещеп5 люють КЛ у кількості 5х10 клітин. На 15-у добу після перещеплення КЛ під тіопенталовим наркозом видаляють первинну пухлину шляхом відсікання дистального відрізка ураженої кінцівки з попереднім накладанням лігатури. Тваринам внутрішньоочеревинно вводять препарат ксеногенного пухлино-специфічного ФП у дозі 200 пг/мишу на другу та дев'яту добу після видалення пухлини і циклофосфамід у цитостатичній дозі (60 мг/кг) з розрахунку 0,6 мг/мишу на четверту та одинадцяту добу після операції. На 29 добу після перещеплення пухлини (відповідно 14 доба після операції) тварин умертвляють шляхом дислокації шийних хребців і оцінюють антиметастатичний ефект. Підтвердженням того, що внутрішньоочеревинне введення в ад'ювантному режимі ксеногенного пухлиноспецифічного ФП та циклофосфаміду запобігає метастазуванню, є формування протективної імунної відповіді за допомогою сполученого введення даних препаратів реципієнтам після видалення пухлини, що проявляється в попередженні виникнення метастазів КЛ в легенях у 100 % тварин. Прикладом реалізації заявленого способу може вважатися результат експериментального дослідження - попередження метастазування пухлини у тварин після введення їм в ад'ювантному режимі ксеногенного пухлиноспецифічного ФП та циклофосфаміду. Ксеногенний пухлиноспецифічний ФП отримували із лімфоцитів селезінки щурів на 14 добу після внутрішньоочеревинної імунізації живими клітинами КЛ. Інтактним мишам C57BL/6 в стопу задньої лапи підшкірно перещеплювали КЛ у кіль5 кості 5х10 клітин. На 15 добу після перещеплення КЛ під тіопенталовим наркозом (60 мкг/мишу) видаляли первинну пухлину шляхом відсікання дистального відрізка ураженої кінцівки з попереднім накладанням лігатури. Тваринам внутрішньоочеревинно вводили препарат ксеногенного пухлиноспецифічного ФП у дозі 200 пг/мишу на другу та дев'яту добу після видалення пухлини і циклофосфамід у цитостатичній дозі (60 мг/кг) з розрахунку 0,6 мг/мишу на четверту та одинадцяту добу після операції. На 29 добу після перещеплення пухлини (відповідно 14 доба після операції) тварин умертвляли шляхом дислокації шийних хребців і оцінювали антиметастатичний ефект. Дію ад'ювантної імуно-хіміотерапії із застосуванням пухлиноспецифічного ФП та циклофосфаміду порівнювали з ефектом такої із застосуванням одного із цих препаратів або неспецифічного ФП, отриманого з лімфоцитів селезінки інтактних щурів. 59423 4 Показано, що на тлі сполученого застосування в ад'ювантному режимі пухлиноспецифічного ФП і циклофосфаміду в жодному випадку метастази КЛ у легенях мишей C57BL/6 не були виявлені, тобто індекс пригнічення метастазування склав 100 %. На відміну від цього післяопераційна імунотерапія ксеногенним пухлино-специфічним ФП запобігла появі метастазів у 50 % тварин, при застосуванні неспецифічного ФП в аналогічному режимі - лише у 22 %. Після ад'ювантної хіміотерапії циклофосфамідом метастази КЛ розвились у 100 % мишей, як і в контрольній групі. Ад'ювантна імунотерапія ксеногенним пухлиноспецифічним ФП загальмувала ріст метастазів КЛ у разі їх виникнення: кількість метастазів ((4,59±2,58) шт.) та їх об'єм 3 ((12,80±9,42) мм ) були значно (р