Спосіб оцінки бактерицидної активності дезінфікуючих засобів

Спосіб оцінки бактерицидної активності дезінфікуючих засобів, що полягає в очищенні Спосіб оцінки бактерицидної активності дезінфікуючих засобів належить до медицини і може бути використаний для вибору ефективних дезінфікуючих засобів у відношенні мікроорганізмів, сорбованих на синтетичних матеріалах, експонованих у лікувальнопрофілактичних установах, науково-дослідних лабораторіях різних рівнів захисту, техногенних штучних екосистемах Особливу значимість може мати при плануванні дезінфекційних заходів при спалахах різних інфекцій, у тому числі нозокоміальних У створених в антропогенному середовищі сучасних штучних екосистемах широко використовуються синтетичні полімерні матеріали, це стосується й установ медичного профілю (для внутрішнього оздоблення приміщень, медичної апаратури, інструментарію, захисного одягу і т п ) Цей фактор здобуває особливе значення для так званих «техногенних» інфекцій, яскравим прикладом яких є таке небезпечне захворювання, як лепонельоз Авторами [1] показана можливість збільшення КІЛЬКОСТІ лепонел на деяких синтетичних матеріалах у десятки тисяч разів, що приводить до формування резервуарів інфекції У бюплівках, що утворюються на поверхнях полімерних матеріалів, зберігаються і розмножуються й ІНШІ види мікроорганізмів, що мають медичне значення Склад мікробних ценозів залежить як від ХІМІЧНОГО складу полімеру, його зразка досліджуваного матеріалу від мікробного забруднення, зараженні поверхні тест-штамами, нанесенні дезінфікуючого засобу та обліку результатів дезінфекції, який відрізняється тим, що після механічного очищення зразки стерилізують, зараження зразків проводять суспензією тих штамів, у відношенні яких необхідно одержати дезінфікуючий ефект (госпітальні, експериментальні, виділені із штучних екосистем), а знезаражений зразок витримують у стерильному живильному середовищі 7-10 діб, після чого здійснюють висів на елективні живильні середовища та проводять облік результатів товщини, гігроскопічності й ін , так і від видів бактерій, що поширені у даній екосистемі Ці позиції актуальні для проблеми госпітальних інфекцій Дані моніторингу різних країн за госпітальними інфекціями, отримані в останні роки, свідчать про зростання в їхній етнології Acmetobacter spp, Pseudomonas spp , грибів роду Candida, Mycetes spp Дані мікроорганізми є бюдеструкторами і здатні використовувати компоненти синтетичних полімерних матеріалів як джерело харчування Причому в складі бюплівок вони більш СТІЙКІ ДО ДІЇ несприятливих факторів, у тому числі дезінфікуючих розчинів, ніж у бактеріальних суспензіях [2], тому що можуть проникати в пори матеріалу Цим визначається необхідність вибору ефективних засобів для дезінфекції поверхонь синтетичних матеріалів з урахуванням конкретних умов Існує спосіб вивчення бактерицидної активності засобів при знезаражуванні поверхонь [3], що включає попередню обробку поверхні зразка, зараження поверхні тест штамами, нанесення дезінфікуючого засобу, облік результатів дезінфекції через 24-48 годин, До недоліків прототипу відносяться не передбачається проведення окремих досліджень у відношенні поверхонь синтетичних матеріалів, CO о о> о> ю 59903 при знезаражуванні поверхонь їх піддають тільки механічному очищенню, у якості тест-штамів використовують тільки культури Echenchia coll і Staphyloccocus aureus, ефективність знезаражування перевіряють методом змивів ватяними чи марлевими тампонами, а для гладких поверхонь паралельно методом відбитків При такому ПІДХОДІ через відсутність попередньої стерилізації зразків досліджуваних поверхонь, облік результатів ускладнюється, тому що синтетичні матеріали, як правило, контамшовані стійкою грибковою і споровою мікрофлорою Метод змивів і відбитків не дає можливості виявити тест-штами, що проникли в пори полімерів Отримані результати будуть адекватними тільки для використовуваних видів мікроорганізмів (Е соїі, St aureus ) і конкретного досліджуваного матеріалу У відношенні інших мікроорганізмів, утому числі госпітальних чи експериментальних штамів, сорбованих на різноманітних видах синтетичних матеріалів, що дезінфікуються, засіб може виявитися неефективним Поставлена задача підвищення точності оцінки бактерицидної активності дезінфікуючих засобів шляхом врахування сорбціиних властивостей синтетичних матеріалів і вибору тест-штамів мікроорганізмів, що дозволить проводити ефективнішу оцінку дезінфікуючих засобів у відношенні широкого спектру мікроорганізмів, сорбованих на синтетичних матеріалах Задача досягається тим, що у відомому способі оцінки бактерицидної активності дезінфікуючих засобів, що полягає у механічному очищенні зразка досліджуваного матеріалу від мікробного забруднення, зараженні поверхні тест-штамами, нанесенні дезінфікуючого засобу й обліку результатів дезінфекції, додатково після механічного очищення зразки стерилізують, зараження зразків здійснюють суспензією тих штамів, у відношенні яких необхідно одержати дезінфікуючий ефект (госпітальні, експериментальні, виділені зі штучних екосистем) Знезаражений зразок витримують у стерильному живильному середовищі 7-10 діб, після чого роблять висів на елективні живильні середовища та проводять облік результатів Суть винаходу полягає у наступному роблять дозоване зараження простерилізованих зразків синтетичних полімерних матеріалів (розміром 2х2см), тест-штамами мікроорганізмів, у відношенні яких необхідно одержати дезінфікуючий ефект, наприклад, еталонний штам L pneumophila Philadelphia І, госпітальні штами Pseudomonas aerugmosa, Candida albicans, Staphylococcus aureus Після обробки дезінфікуючим засобом зразки з дотриманням стерильності вносять у колби зі стерильним глюкозним бульйоном і термостатують 710 діб Виявлення росту бактерій раніше ніж 7 діб може бути недостатньо інформативним тому, що вплив несприятливих чинників (у тому числі дезінфікуючих засобів) викликає створення форм з уповільненим темпом росту, а також в ці строки можливо виявлення пізнього росту мікробних клітин, що знаходяться в порах полімерів Понад 10 діб термостату вати зразки недоцільно, бо переважна маса бактерій до цього часу дає ріст на рідких середовищах (глюкозний бульйон) Після чого роблять висів на ЩІЛЬНІ елективні живильні середовища і відмічають наявність чи відсутність росту тест-штамів При відсутності росту роблять висновок, що засіб можна використовувати для знезаражування досліджуваних матеріалів Таким чином, застосування запропонованого рішення підвищує точність оцінки бактерицидної активності дезінфікуючих засобів та ефективність оцінки дезінфікуючих засобів у відношенні широкого спектру мікроорганізмів, сорбованих на різноманітних синтетичних матеріалах Приклади конкретного виконання Полімерні матеріали на різній основі - 3 зразки - на полівінілхлоридній, 2 -на полістироловій, 2 - на поліпропіленовій, піддавали механічному очищенню і дрібній стерилізації протягом 5 діб по 5 годин УФ-випромінюванням у медичному стерилізаторі "Panmed" По три стерильних однакових зразки кожного виду, розміром 2х2см вносили в стерильні чашки Петрі і заливали суспензією мікроорганізмів з концентрацією 106 КУО/мл з розрахунку 2 5мл на чашку Залишали на одну годину при кімнатних умовах (температура 18-20°, вологість повітря 5060%) Після ЦЬОГО видаляли стерильною піпеткою залишок суспензії і залишали зразки до повного висихання Як тест-штами використовували еталонний штам L pneumophila Philadelphia I, госпітальні штами Pseudomonas aerugmosa, Candida albicans, Staphylococcus aureus, E coh У якості дезінфектантів використовували офіцінальні засоби корзолекс, сокрена, лізоформін, хлорамін Обробку заражених зразків проводили ВІДПОВІДНО до прикладеного до препаратів наставления Потім залишали зразки до повного висихання і поміщали в колби зі стерильним глюкозним бульйоном Посіви термостатували при 37°с із щоденним візуальним переглядом При помутнінні середовища проводили висів 1,0мл бульйону на пластинки з елективними живильними середовищами у залежності від виду тестованого мікроорганізму При відсутності видимого росту посіви витримували до 10 діб і також робили контрольні висіви на ВІДПОВІДНІ середовища лепонели - на середовище елективне для культивування лепонел (СЕЛ), псевдомонад и - на м'ясопептонний агар рН 7 2, кандіди - на середовище Сабуро, стафілококи - на жовточно-сольовий агар, кишкову палочку - на середовище Ендо (Табл) Облік результатів показав, що після обробки сокреною, корзолексом і хлораміном полімерних матеріалів на полівінілхлоридній основі відмічено 59903 Таблиця Порівняльне визначення бактеріцидної активності деяких дезінфікуючих засобів № Дезінфікуючі засоби 1 скорена (1%) 2 корзолекс (3%) 3 лізоформін (1%) 4 хлорамін (1%) 5 активований хлорамін (1%) облік результатів тест-штам и мікроорганізмів за прототипом L pn Phil I Ps aemginosa St aureus Candida albicans E coh L pn Phil I Ps aemginosa St aureus Candida albicans E coh L pn Phil I Ps aemginosa St aureus Candida albicans E coh L pn Phil I Ps aemginosa St aureus Candida albicans E coh L pn Phil I Ps aemginosa St aureus Candida albicans E coh в/р** в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р в/р за способом, що пропонується в/р н/р*(на5-у добу) в/р в/р в/р в/р н/р (на 3-ю добу) в/р н/р (на 5-у добу) в/р в/р в/р в/р в/р в/р н/р (на 8-у добу) в/р в/р н/р (на 4 -у добу) в/р в/р в/р в/р в/р в/р *н/р - наявність росту, **в/р - відсутність росту Ріст тест-штамів Pseudomonas aerugmosa на 3-5 добу, Candida albicans на 4-5 добу, L pneumophila Phil І на 8-ю добу На зразках, оброблених лізоформіном та активованим хлораміном ріст був відсутній У такий спосіб для матеріалів на полівшілхлоридній основі у відношенні вивчених штамів виявились ефективними тільки лізоформін та активований хлорамін Джерела інформації Комп'ютерна верстка Т Чепелсва 1 Schofield G М , Locci R Effect of rubbers and their constituents on proliferation of Legionella in naturelly hot water//J appl Bactenol -1985-Vol59P 519-27 2 Doman R M Biofilms Microbial Life on Surfaces // Emerging Infection Diseases - 2002 - Vol 8 № 9 - P 881-890 3 Инструкция по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств( МЗ СССР, 1968) Підписано до друку 06 10 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна