Спосіб визначення антагоністичної активності біфіформу

1. Спосіб визначення антагоністичної активності біфіформу за умови сумісного культивування з мікроорганізмами, який відрізняється тим, що препарат сумісно культивують з патогенними та 42977 через 7 діб з метою виявлення періоду найбільшої антагоністичної активності антагоніста (таблиця). За даними таблиці, асоціації B.longum і E.faecium за одночасного культивування в оптимальному середовищі для всіх асоціантів (B.longum, E.faecium, S.aurerus або ж ентеробактерії) через 24 години інкубування настає пригнічення росту та розмноження стафілококів на 15,26±0,2815,79±0,34%, a патогенних та умовно патогенних ентеробактерій - на 21,70±0,07-24,49±0,24%. Асоціація біфідобактерій та ентерокока не пригнічує ріст та розмноження кандид через 24 години. Подовження строків сумісного інкубування антагоністів та тест-штамів до 2-ї та 3-ї доби сприяє посиленню антимікробної дії тільки на патогенні та умовно патогенні ентеробактерії (39,00±0,19%-43,10±0,01%) і стафілококи (20,91±0,18%-33,20±0,51%). Через 48 годин мікроби-антагоністи стимулюють ріст та розмноження кандид на 12,82±0,11%13,57±1,18%, а через 72 год вони вже частково пригнічують ріст кандид - на 3,23±0,50%-4,85±0,04%. Сумісне культивування біфіформу і тест-штамів упродовж 4-7 діб сприяє посиленню антимікробної дії мікробів-антагоністів стосовно патогенних та умовно патогенних ентеробактерій (42,84±0,13%-53,52±0,25%) та стафілококів (35,24±0,63%40,37±0,12%). Упродовж 4 діб мікроби-антагоністи не проявляють антагоністичної активності стосовно кандид, лише через 7 діб вони проявляють антифунгіостатичну дію (6,50±0,22%-11,17±0,05%). Таким чином, за допомогою даного методу встановлено антагоністичну дію біфіформу тільки для грампозитивних коків (стафілококів, в тому числі антибіотикостійких варіантів) та грамнегативних ентеробактерій (патогенних та умовно патогенних ешерихій, цитробактера, клебсієл). Він практично не інгібує ріст та розмноження кандид упродовж 1-ї доби, а через 48 годин проявляє стимулюючу дію до їх росту та розмноження. Таким чином, застосування даної методики дозволяє встановити антагоністичну активність біфіформу стосовно грампозитивних коків та грамнегативних ентеробактерій. Це вказує на відповідність даного винаходу критерію "позитивний ефект". Таблиця Антагоністична активність біфіформу стосовно патогенних та умовно патогенних ентеробактерій, стафілококів та дріжджоподібних грибів роду Candida (в%) Мікроорганізми К-ть штамів Процент пригнічення росту тест-штамів через 24 год S.aurerus ATC 25923 S.aurerus (антибіотикорезистентні) Е.соlі К12 E.coli Hly+ E.coli О55:K59 C.freundii K.pneumoniae C.albicans 7 C.albicans 48 год 3 доби 4 доби 7 діб 1 15,26±0,28 20,91±0,18 31,86±0,20 35,24±0,63 39,95±0,30 7 15,79±0,34 31,33±0,19 33,20±0,51 36,34±0,43 40,37±0,12 1 3 3 2 3 1 5 22,06±0,05 22,60±0,02 21,91±0,02 24,49±0,24 21,70±0,07 0,62±0,01 0 41,63±0,26 43,10±0,01 40,46±0,09 41,34±0,10 41,13±0,09 12,82±0,11* 13,57±1,18* 39,00±0,19 42,00±0,04 39,52±0,20 39,46±0,08 40,14±0,38 4,85±0,04 3,23±0,50 50,44±0,27 51,07±0,12 51,15±0,04 43,38±0,13 42,84±0,13 0 0 55,52±0,05 55,38±0,09 55,32±0,08 42,98±0,10 42,68±0,07 11,17±0,05 6,50±0,22 Примітка: 0 - антагоністична дія відсутня; * - стимуляція росту культури пробіотиками. __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 2