Спосіб одержання біотрансплантата з твердої оболонки головного мозку

Спосіб одержання бютрансплантата з твердої оболонки головного мозку, що включає забір матеріалу, його консервацію та стерилізацію, який відрізняється тим, що промивають отриманий матеріал у проточній воді протягом 2-х годин і трикратно у фізрозчині протягом 3-х годин при температурі 37°С, причому перед цим виконують розкриття венозних синусів і видалення відрогів, потім його розправляють на твердій пластині та заморожують при температурі -60°С -70°С протягом доби, після чого проводять вакуумну люфілізацію при температурі +40°С +42°С і вакуумі 10 3 мм рт ст протягом 17-19 годин та розфасовують матеріал у медичну упаковку, після чого проводять його гамма-стерилізацію дозою 1,5 Мрад Винахід відноситься до області біологи і медицини, а саме, до способів одержання бютрансплантатів, що можуть бути використані для пластики дефектів оболонок головного і спинного мозку при черепно-мозковій і хребетно-спинальній травмі, об'ємних пухлинних процесах Як прототип обраний спосіб одержання бютрансплантата з твердої оболонки головного мозку (Тоскин К Д , Жебровский В В Пластическая хирургия сложных дефектов брюшной стенки - Киев Здоровья, 1982- с 192), який полягає втому, що здійснюють забір шматків твердої оболонки головного мозку в трупів людей віком 12-50 років у нестерильних умовах і проводять їхню стерилізацію в 0,75-2,0 % розчині формаліну протягом 6-24 годин, потім протягом 5-6 МІСЯЦІВ здійснюють консервацію в консервуючій рідині 31 Е, до складу якої входять натрію цитрат, глюкоза, натрію бромід, етиловий спирт, гліцерин і вода, видалення формаліну роблять у ізотонічному розчині натрію хлориду протягом 3-4 годин шляхом відмивання при температурі 37°С тричі, при збереженні бютрансплантата в консервуючій рідині 31Е більше місяця необхідно робити їхні контрольні бактеріологічні дослідження не менше одного разу на місяць для виключення мікробного забруднення ефективності дії бютрансплантату зі збереженням фізико-хімічних властивостей), є ДІЮЧІ на бютрансплантат при його консервації ХІМІЧНІ реагенти в результаті змінюють його фізико-хімічні властивості, через 5-6 МІСЯЦІВ консервації в рідині 31 Е бютрансплантата втрачають свою МІЦНІСТЬ І еластичність, знижуються їхні біохімічні властивості, підсилюються аутолітичні процеси, немає гарантії знищення пухлинних клітин вірусів, лейкозних бластів і інших, немає можливості тривалого збереження, тому що змінюються форма і розміри б ютра н с пл а нтата В основу винаходу поставлена задача удосконалення способу одержання бютрансплантата з твердої оболонки головного мозку шляхом зміни параметрів технологічних етапів, введення додаткових нових, що дозволяє створити новий високоефективний бютрансплантат за рахунок більш повного збереження його фізичних, ХІМІЧНИХ, нативних властивостей при крюконсервацм і стерилізації Поставлена задача вирішується тим, що в способі одержання бютрансплантата з твердої оболонки головного мозку, що включає забір матеріалу, його консервацію та стерилізацію, згідно до винаходу, роблять розкриття венозних синусів і видалення відрогів, промивають матеріал у проточній воді протягом 2-х годин і трикратно у фізрозчині протягом 3-х годин при температурі 37 С, потім його розправляють на твердій пластині та заморожують при температурі -60°С - -70°С протя Ознаками, що збігаються з істотними ознаками запропонованого способу, є забір матеріалу, його консервація та стерилізація Причинами, що перешкоджають досягненню очікуваного технічного результату (підвищення ю о о> (О гом доби, після чого проводять вакуумну люфілізацію при температурі +40°С - +42°С і вакуумі 10 З мм рт ст протягом 17-19 годин та розфасовують матеріал у медичне упакування, після чого проводять його гама-стерилізацію дозою 1,5 Мрад Між сукупністю істотних ознак запропонованого способу та очікуваним технічним результатом, що може бути досягнутий, виявляється наступний причинно-наслідковий зв'язок розкриття венозних синусів і видалення відрогів у забраному матеріалі дозволяє забрати залишки венозної крові, що може згодом утворювати тромби, дає зручності надалі для формування форми і різних розмірів бютрансплантата, наступне промивання у воді і фізрозчині забезпечує повне знекровлювання і чистоту бютрансплантата, а розправлення його на твердій пластині додає фіксовану форму бютрансплантату і попереджає дисоціацію ІОНІВ, введення додаткового етапу заморожування дозволяє не піддавати препарат обробці ХІМІЧНИМИ реагентами як у способі-прототипі, завдяки чому він зберігає основні фізико-хімічні властивості, дозволяє знизити його антигенні властивості і дає часткову стерилізацію, проведення вакуумної люфілізацм збезводнює біотрансплантат без порушення фізикоХІМІЧНИХ властивостей його клітин і тканин, дозволяє зберегти форму і нативні властивості препарату, розфасовка в медичне упакування дає зручність для подальшої стерилізації і дозволяє зберегти плоску форму бютрансплантата, останній етап - гама-стерилізація дозволяє знищити бактерії, віруси, пухлинні клітини, грибкові міцели та ІНШІ хвороботворні організми, що можуть бути присутні у препараті, використовувана доза 1,5 Мрад при гама-стерилізацм не змінює морфологічну структуру тканин твердої оболонки головного мозку і дає можливість тривалого збереження бютрансплантатів у стерильних умовах Перед операцією медичне упакування з бютрансплантатом розкривають у стерильних умовах, трансплантат поміщають у стерильний фізрозчин натрію хлориду, тобто проводять його репдратацію і використовують ВІДПОВІДНО ДО ВИМОГ техніки операції Отримані запропонованим способом бютрансплантата після регідратації мають блискучу гладку поверхню і легко прошиваються голками Спосіб заключається в наступному Спочатку здійснюють забір твердої оболонки головного мозку зі зводу черепа через 2 години після смерті людини, дотримуючи вимоги Закону України "Про трансплантацію органів та інших анатомічних матеріалів людини" Для забору матеріалу відбирають донорів з обов'язковим обстеженням для виключення тих, котрі відносяться до групи ризику по медичних і соціальних показаннях Проводять тестування з метою виявлення антитіл до ВІЛ-шфекцій, тестування на виявлення сифілісу, на виявлення бактеріальної контамінації, а також на виявлення антигенів гепатитів В і С, тестування на цитомегаловірус В забраному матеріалі розкривають венозні синуси і видаляють відроги Після чого здійснюють його промивання в проточній воді протягом 2-х 62905 годин, а потім промивають у фізрозчині трикратно протягом 3-х годин при температурі 37°С Потім розправляють тверду мозкову оболонку на пластині з твердого матеріалу, наприклад, нержавіючої сталі, що дозволяє уникнути окислювання, після чого здійснюють заморожування в холодильнику при температурі -60°С - -70°С протягом 24-х годин Наступним етапом проводять вакуумну люфілізацію Для цього помещають препарат в сублімацій3 ну установку, в якій створюють вакуум 10 ртст и виконують підогрів до температурі +40°С - +42°С протягом 17-19 годин Потім отриманий біотрансплантат розфасовують у медичне упакування і проводять його гамастерилізацію дозою 1,5 М рад у промислових умовах Перед операцією медичне упакування з бютрансплантатом розкривають у стерильних умовах, поміщають у стерильний фізрозчин натрію хлориду, тобто проводять його репдратацію і використовують ВІДПОВІДНО до вимог техніки операції Запропонований спосіб дозволяє одержати бютрансплантати з твердої оболонки головного мозку, що мають наступні переваги високу МІЦНІСТЬ та еластичність, мають особливості морфогенезу, такі як низька антигенність, тромборезистентність, СТІЙКІСТЬ до інфекції, можливо їхнє застосування в хворих з ускладненнями виразково-некротичного характеру при периферичній артеріальній недостатності, коли використання синтетичних матеріалів обмежене чи неможливе, відсутність яких-небудь специфічних ускладнень при їхньому застосуванні, доступність і простота передопераційної обробки біоімплантатів важливо в екстрених ситуаціях для швидкості відновлення регіонального та органого кровотоку Можливе заміщення отриманого запропонованим способом бютрансплантата протягом одного року після операції власними тканинами організму, тобто біотрансплантат має здатність тривалий час зберігати свої фізичні якості в умовах організму реципієнта Приклад одержання бютрансплантата з твердої оболонки головного мозку У бюманекена-донора віком ЗО років, що помер раптово в результаті автотравми в умовах бюро судово-медичної експертизи було виконано забір твердої оболонки головного мозку зводу черепа в строгій ВІДПОВІДНОСТІ з вимогами Закону України "Про трансплантацію органів та інших анатомічних матеріалів людини" Перед забором було зроблене тестування ВІДПОВІДНО до вимог МОЗ України, пов'язане з визначенням наявності особливо-небезпечних інфекцій на виявлення антитіл до ВІЛ-шфекцій, на виявлення сифілісу, на виявлення бактеріальної контамінації, а також на виявлення антигенів гепатитів В і С, цитомегаловірусу Після ЧОГО ЗДІЙСНЮЮТЬпромивання отриманого матеріалу в проточній воді протягом 2-х годин, потім промивають у фізрозчині трикратно протягом 3-х годин при температурі 37°С Розправляють тверду мозкову оболонку на пластині з нержавіючої сталі і заморожують у хо лодильнику при температурі -65 С протягом 24-х годин, далі проводять вакуумну люфілізацію Для цього помещають препарат в сублімацій3 ну установку, в якій створюють вакуум 1 0 мм рт ст и виконують підогрів до температурі +40°С протягом 18 годин Потім отриману сировину розфасовують у медичне упакування з харчової пластмаси і проводять його гама-стерилізацію дозою 1,5 М рад у промислових умовах Після ЧОГО роблять аналізи на бактеріальне забруднення і пірогенність з видачею офіційного висновку Розфасовану сировину зберігають у звичайних умовах аптечних складів Перед операцією медичне упакування з бютрансплантатом розкривають у стерильних умовах і проводять його репдратацію, поміщаючи в стерильний фізрозчин натрію хлориду на 40 - 60 хвилин Запропонований спосіб дозволяє одержати бютрансплантат, що може бути використаний для пластики дефектів оболонок головного і спинного мозку при черепно-мозковій і хребетно-спинальній Комп'ютерна верстка А Ярославцева 62905 травмі, об'ємних пухлинних процесах, відновлення анатомічної ЦІЛІСНОСТІ СТІНКИ кровоносних судин великого і середнього калібру при локальних ушкодженнях їхньої стінки, протезуванні великих судин, повторної пластики дефектів передньої черевної стінки, наприклад, пахові грижі, грижі білої лінії живота, також бютрансплантат може бути придатний при нейрорафм периферичних нервів, відновленні позасуглобового зв'язкового апарата та інших структур опорно-рухового комплексу Застосування запропонованого способу одержання бютрансплантата з твердої оболонки головного мозку забезпечує технічне рішення оперативних втручань, дозволяє створювати банк готових бютрансплантатів, застосовувати їх при хірургічних операціях, при масових ураженням у військово-польових умовах Спосіб одержання бютрансплантата з твердої оболонки головного мозку простий і не вимагає великих витрат, дозволяє проводити стерилізацію відомими методами, отриманий матеріал легко піддається упакуванню, підлягає тривалому збереженню Підписне Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119