Кардіопротекторний антиоксидантний засіб “елгацин”

Винахід відноситься до фармації та медицини, а саме до лікарських препаратів на основі біологічно активних речовин рослинного походження, і може бути використаний у практичній кардіології для фармакокорекції кардіопатологій ішемічної та гіпоксичної природи. За даними ВООЗ захворювання серцево-судинної системи знаходяться на одному з перших місць у рейтингу найбільш поширених захворювань у світі. Серед них суттєва частка захворюваності (в Україні 33,7%) припадає на ішемічну хворобу серця (ІКС), несприятливим наслідком якої є випадки смертності та інвалідності людей працездатного віку. Саме тому правильна і своєчасна фармакокорекція ушкоджень міокарду ішемічної і гіпоксичної природи має не лише медико-психологічне, але й соціально-економічне значення. З сучасних поглядів на патогенез ІХС випливає, що формування тканинної гіпоксії у міокарді насамперед спричиняє зрушення окиснювального метаболізму, активацію вільнорадикального окиснення (ВРО), деструкцію клітинних макромолекул і, як наслідок, втрату серцевим м'язом функціональної спроможності. Функція первинного захисту міокарду від аномальної пероксидації належить фізіологічній антиоксидантній системі, неферментативна ланка якої представлена, зокрема, рослинними поліфенольними сполуками. Відомий кардіопротекторний антиоксидантний засіб, що містить кверцетин як активну речовину (Інструкція по застосуванню гранул кверцетину, 1992р.). На сьогоднішній день з рослинних антиоксидантів поліфенольної будови біофлавоноїдний препарат кверцетин знайшов найпоширеніше застосування у практичній кардіології [Лекарственные препараты Украины 1999-2000, Харьков, "Прапор", 1999, T.I, C554-556], який рекомендований у комплексній терапії захворювань серцево-судинної системи. Гранули кверцетину виробництва БХФЗ (м.Київ) - це лікарська форма активної речовини - Р-вітамінного засобу кверцетину і пектину яблучного. В основу винаходу покладено задачу створення такого кардіопротекторного антиоксидантного засобу, який шляхом зміни активної речовини забезпечив би високу фармакологічну активність засобу рослинного походження. Поставлена задача, вирішується таким чином, що кардіопротекторний антиоксидантний засіб, що містить активну речовину, згідно з винаходом, як активну речовину вибрано комплекс елаготанінів. Доцільно також, щоб таблетована форма препарату додатково містила стеарат кальцію, полівінілпіролідон та цукрову пудру при співвідношенні компонентів (мас.%): Комплекс елаготанінів 2-15 Полівінілпіролідон 2-10 Стеарат кальцію 2 Цукрова пудра решта Використання в якості активної речовини комплексу елаготанінів у 5 разів підвищує фармакологічну активність засобу порівняно з дією препарату "Гранули кверцетину", а таблетована форма дозволяє застосувати препарат у зручній та чітко дозованій технологічній лікарській формі. Комплекс елаготанінів включає елагову кислоту (не менше 70%), дилактон валонієвої кислоти (не більше 10%) та продукти їх взаємодії (решта). Запропонований кардіопротекторний засіб має назву "Елгацин". Таблетки "Елгацину" одержують шляхом простого змішування компонентів таблеткової маси. Кількісний та якісний склад заявленого кардіопротекторного засобу - таблеток "Елгацину" визначений експериментальним шляхом і забезпечує оптимальні фармакологічні та технологічні властивості препарату. Активна діюча речовина, представлена комплексом у складі елагової кислоти, дилактону валонієвої кислоти та продуктів їх взаємодії, обумовлює кардіопротекторну дію препарату, яка реалізується завдяки вираженим антиоксидантним властивостям цих похідних елагової кислоти. Елагова кислота та дилактон валонієвої кислоти є представниками рослинних дубильних речовин - елаготанінів, які, як і біофлавоноіди, належать до фітохімічного класу рослинних поліфенолів. Характерною особливістю дубильних речовин є більш виражена, ніж у біофлавоноїдів, здатність до гальмування вільнорадикального окислення, яка зумовлена особливостями хімічної будови біфенільних поліфенолів. Допоміжні речовини в таблетці забезпечують високі технологічні властивості лікарської форми: полівінілпіролідон - виконує роль солюбілізатора і підвищує біодоступність активної речовини, цукрова пудра використовується як наповнювач із здатністю до зклеювання таблеточної маси, стеарат кальцію - як ковзний матеріал. Загалом при означеному поєднанні компонентів досягаються оптимальні показники сипучісті, волого-поглинання, стабільністі одержаної суміші, а це, в свою чергу, забезпечує підвищення біологічної доступністі активної речовини засобу. Компоненти, які входять до складу препарату відомі, проте їх композиція, що заявляється, нова, не відома з джерел інформації. Винахід ілюструється прикладами, де описано також спосіб отримання субстанції. Приклад 1. 10кг подрібнених суплідь вільхи після вальцювання екстрагують в умовах методу фільтраційної екстракції 60л 80% спирту етилового. Екстракт концентрують до 9л, отриманий розчин відокремлюють декантацією від ліпофільного осаду. Одержують 8,6л концентрату з залишковою кількістю спирту 39% (визначений методом газової хроматографії). До 4л отриманого концентрату доливають 420мл кислоти конц. соляної і нагрівають 5 годин при 90°С зі зворотним холодильником. Осад, що утворився, відфільтровувають, і гідроліз розчину повторюють у тих же умовах. Відфільтровані осади промивають водою до нейтральної реакції і висушують у вакуум-сушильній шафі при 90°С. Вихід 180г субстанції (3,9% від ваги сировини). Вміст суми елагових кислот складає 82,2%. Препарат елгацин являє собою коричневий аморфний порошок, що містить комплекс елаготанінів: суму елагової та дилактона валонієвої кислот в кількості не менше 80%. Вміст дилактона валонієвої кислоти не повинен бути менше за 10%. Крім кислот препарат містить до 20% полімера припустимо поліфенольної (меланоїдної) природи. Кількісне визначення елагових кислот проводили спектрофотометричним методом при 366нм (максимум поглинання лактонових циклів) в порівнянні із стандартом елагової кислоти. Приклад 2. 10кг подрібнених суплідь вільхи після вальцування екстрагують 60л 80% спирту етилового. Екстракт концентрують під вакуумом при 55-60°С. Після відстоювання протягом доби і видалення ліпофільного осаду декантацією одержують 7л очищеного екстракту, який використовується далі для гідролізу. До 0,5л доливають 0,2л спирту етилового і 30мл кислоти сірчаної 50%. Гідроліз проводять при 85-90°С протягом однієї години. Коричневий осад, що утворився, відфільтровують, промивають водою до нейтральної реакції, висушують. Вихід складає 7г субстанції із вмістом комплексу елаготанінів, в якому сума елагової і дилактона валонієвої кислот складає 91,5%. Після повторного гідролізу у тих же умовах 3 години, одержують додатково 10г субстанції зі вмістом у ній суми елагової і дилактона валанієвої кислот 84,6%. Сумарний вихід субстанції 2,4%. Приклад 3. До 0,5л екстракту (за прикладом 2) додають 0,2л спирту етилового, кислоти соляної конц. до 3%, гідролізують 1 годину при 80-85°С. Осад, що утворився, відфільтровують і продовжують гідроліз фільтрату протягом 3 годин. Осади відфільтровують, промивають водою до нейтральної реакції, висушують при кімнатній температурі до повітряно-сухого стану. Одержують коричневі аморфні порошки - відповідно 9г зі вмістом суми елагових кислот 91,0% і 6г зі вмістом суми кислот 86,9%. Сумарний вихід субстанції 2,4%. У ході експерименту вивчались різні варіанти складу кардіопротекторного засобу "Елгацин", деякі з них наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Варіанти кардіопротекторного антиоксидантного засобу "Елгацин" Компоненти Комплекс елаготанінів Полівінілпіролідон Стеарат кальцію Цукрова пудра Кількісний вміст компонентів (мао%) Варіант Варіант 1 Варіант 2 3 2 15 10 2 2 решта 10 2 Решта 5 2 решта Склад засобу за варіантом 3 є оптимальним за фармакологічною активністю та технологічними властивостями. Склад засобу за варіантом 1,3 також відповідає зазначеним вище вимогам, вміст його компонентів лежить у межах заявлених інтервалів значень компонентів. Склад засобу за межами заявлених параметрів як в бік зменшення, так і в бік збільшення за варіантами 4,5 (в табл. не показані) не відповідає вимогам до заявленого засобу. Зменшення активної діючої речовини зумовлює зниження фармакологічної активності засобу, а збільшення активної речовини не покращує фармакологічного ефекту вище варіанту 2. Приклад 4. Експериментальне вивчення кардіопротекторної дії таблеток "Елгацин" виконано на моделі гострого ізадринового міокардиту у білих щурів у порівнянні з відомим рослинним антиоксидантом кверцетином, який на сьогоднішній день знайшов застосування у клінічній кардіології, і є прототипом "Елгацину" за фармакологічною дією. Ізадриновйй міокардит моделювали внутрішньом'язовим введенням білим щурам ізадрину у дозі 60 мг/кг протягом 4-х діб. Дослідні тварини були розділені на 4 групи: 1- інтактний контроль; 2 - контрольна патологія; 3,4 - групи тварин, яким перорально щодня 1 раз на день за 1 годину до введення ізадрину вводили елгацин у дозі 1мг/кг та препарат порівняння кверцетин у дозі 5мг/кг, відповідно, протягом усього терміну моделювання патології. Для оцінки функціонального стану міокарду здійснювали електрокардіографічне обстеження тварин та визначали інтенсивність стану патологічної ліпопероксидації за біохімічними показниками (табл.2). Аналіз отриманих результатів показав, що застосування елгацину при гострому ізадриновому міокардиті з вірогідною розбіжністю від нелікованих тварин зменшувало вміст кінцевого продукту перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) - малонового діальдегіду (МДА), нормалізувало активність ферменту супероксиддисмутази (СОД) та вміст відновленого глутатіону (ВГ) (табл.2). Одночасно зменшувались прояви цитолізу (достовірне зниження гіпертрансаміназемії), ішемії та відновлювалась скорочувальна функція міокарду (достовірна нормалізація показника зміщення (ST) та частоти серцевих скорочень (ЧСС). Вплив препарату порівняння кверцетину у дозі 5мг/кг на досліджувані показники носив невірогідний характер, що свідчить про меншу вираженість його кардіопротекторного ефекту порівняно з елгацином, який досліджували у значно меншій дозі -1мг/кг. Таблиця 2 Результати дослідження кардіопротекторної активності елгацину порівняно з кверцетином Показник Дослідні групи тварин Патологі Інтактни Контроль Патологія я+ й + елгацин, на Кверцети контрол патологія 1мг/кг н, 5мг/кг ь МДА, 72,56±1 142,31± 106,97±9, 116,48± мкмоль/г 0,56 19,52* 25** 10,02* СОД, 0,68±0,0 G,97±0,0 0,71±0,03* 0,89±0,04 ум.од 6 5* * * 18,57±1, 44,56±2, 24,77± 37,77±3,1 ВГ, мг% 77 06* 1,97*/** 4* АсАТ, 0,57±0,0 0,85±0,0 0,65±0,07* 0,71±0,05 ммоль/г.л 5 6* * * 379,90± 739,68± 413,85± 541,08± ЧСС, уд/хв 14,80 44,18 * 15,12** 23,75 * Відхиленн 2,06 0,13 2,00 0,00 (я ST від 0,5¸0,5) (1¸2,5)* (0¸0,5)** (1¸2,5)* ізолінії, MM * - відхилення достовірне інтактного контролю, Р< 0,05; ** - відхилення достовірне контрольної патології, Р< 0,05; відносно до відносно до Статистичну обробку показника ST проводили з використанням критерію U (Віжоксона-Манна-Уїтні). Висновок: дослідження, проведені на моделі гострого ізадринового міокардиту у білих щурів, доводять наявність у таблеток "Блгацину" кардіопротекторної активності, яка зумовлюється його антиоксидантними властивостями та перевищує за вираженістю фармакологічну ефективність відомого антиоксиданту кверцетину. Найбільш виразним, порівняно з кверцетином, є коригуючий вплив елгацину на показники скорочувальної активності міокарду. Перевагу запропонованого препарату "Елгацину" у порівнянні з кверцетином підкреслює співставленім значень їх умовнотерапевтичних доз, оскільки елгацин застосовувався у дозі 1мг/кг, яка у 5 разів менша за умовнотерапевтичну дозу кверцетину - 5мг/кг. За результатами вивчення гострої токсичності таблетки "Елгацин" є відносно нешкідливим препаратом, при тривалому введенні не справляють суттєвого негативного впливу на функцію життєвоважливих органів і систем організму експериментальних тварин, що є свідченням безпечності препарату при застосуванні протягом тривалого часу. Таким чином, заявлений кардіопротекторний антиоксидантний засіб "Елгацин" виявляє виражену кардіопротекторну активність, зумовлену антиоксидантними властивостями. Засіб практично нетоксичний, одержується за простою технологією, яка реалізується на стандартному промисловому обладнанні; існує достатня вітчизняна сировинна база для виробництва.