Спосіб інтраопераційної ідентифікації та візуалізації прищитоподібних залоз у експериментальних тварин

Спосіб інтраопераційної ідентифікації та візуалізації прищитоподібних залоз в експериментальних тварин, що включає введення контрастагента, який відрізняється тим, що експериментальним тваринам (щурам) за 2 год. перед хірургічним втручанням у мінімально-ефективній дозі 300 мг/кг внутрішньочеревно вводять як флуоресцентний контраст-агент 3 % розчин 5-амінолевулінової кислоти і через 2-4 години спостерігають фотодетекцію флуоресцентного контраст-агента під час паратиреоїдектомії. (19) (21) u201104445 (22) 11.04.2011 (24) 10.11.2011 (46) 10.11.2011, Бюл.№ 21, 2011 р. (72) КОЦЮМБАС ІГОР ЯРОСЛАВОВИЧ, ЗУБАЧИК ВОЛОДИМИР МИХАЙЛОВИЧ, МІНЬКО ЛІДІЯ ЮРІЇВНА, ПАТЕРЕГА ІГОР ПЕТРОВИЧ (73) ДЕРЖАВНИЙ НАУКОВО-ДОСЛІДНИЙ КОНТРОЛЬНИЙ ІНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНИХ ПРЕПАРАТІВ ТА КОРМОВИХ ДОБАВОК 3 прищитоподібних залозах, що дозволяє при фотодетекції визначити їх величину, форму, розташування [3]. Препарат 5-амінолевулінова кислота (5-АЛК) відомий препарат, який широко застосовується у медицині, зокрема, у флуоресцентній діагностиці і фотодинамічній терапії. Прищитоподібні залози - периферійні органи ендокринної системи, вони є гіперметаболічні, порівняно з оточуючими їх тканинами, і тому можуть виявляти підвищену флуоресцентність, що дає можливість використати цю властивість для визначення їх величини, форми, розташування і анатомічного взаєморозташування з прилеглими тканинами за допомогою препарату 5-АЛК. При проведенні патентно-інформаційного пошуку заявником не знайдено технічного рішення інтраопераційної ідентифікації та візуалізації прищитоподібних залоз в експериментальних тварин, яке б мало спільні суттєві ознаки із заявленим рішенням. Відомі способи візуалізації тканин під час операційного втручання ґрунтуються на використанні барвників (5 % розчин трипанового синього та 1 % метиленовий синій), коли за інтенсивністю забарвлення тканин або за зміною кольору структур органів визначають їх приналежність. Новий спосіб інтраопераційної ідентифікації та візуалізації прищитоподібних залоз, який заявляється, передбачає візуалізацію органів малих розмірів із застосуванням фотосенсибілізуючого препарату другого покоління - 5-амінолевулінової кислоти (5-АЛК) та підвищену флуоресцентність прищитоподібних залоз. Застосування цього способу дає можливість визначити величину, форму, розташування і анатомічне взаєморозташування з прилеглими тканинами прищитовидних залоз, що має важливе значення в експериментальній медицині для моделювання патологічних процесів, вивчення дії лікарських засобів тощо. Перелік фігур креслення. Фігура 1 Спосіб інтраопераційної ідентифікації та візуалізації прищитоподібних залоз, який заявляється, ілюструється фігурою 1, де зображена флуоресценція прищитовидних залоз щура, які були ідентифіковані і видалені після застосування препарату 5-АЛК. Під мікроскопом у полі голубого світла з використанням світофільтра видно флуоресцентне світіння видалених прищитовидних залоз. Фігура 2 На фігурі 2 подана діаграма визначення оптимальної дози препарату 5-АЛК і тривалості його дії для прищитоподібної флуоресценції. За результатами експериментальних досліджень, які проводилися на 36 дослідних щурах, були визначені мінімально-ефективна доза флуоресцентного контраст-агента (препарат 5-АЛК), яка складає 300 мг/кг і тривалість його дії, час, протягом якого можна віалізувати прищитовидні залози за допомогою їх флуоресцентного світіння. Дія препарату 5АЛК настає через 2 год. після внутрішньочеревного введення і триває більше 4-х год. Реалізація заявленої корисної моделі здійснюється таким чином. Експериментальним тваринам 64500 4 (щурам) за 2 год. перед операційним втручанням внутрішньочеревно вводять флуоресцентний контраст-агент, 3 % розчин 5-амінолевулінової кислоти, у мінімально-ефективній дозі (300 мг/кг маси тіла) і через 2-4 години спостерігають фотодетекцію флуоресцентного контраст-агента під час паратиреоїдектомії. Безпосередньо перед введенням препарат 5-АЛК розводять 0,9 % ізотонічним розчином натрію хлориду до 3 % концентрації. Приклади конкретного використання корисної моделі. Для визначення оптимальної дози препарату 5-АЛК і тривалості його дії для прищитоподібної флуоресценції проводили експериментальні дослідження на 36 щурах. Експериментальні тварини були поділені на 6 груп (по 6 тварин). Препарат безпосередньо перед введенням розводили 0,9 % ізотонічним розчином натрію хлориду до 3 % концентрації. Для визначення оптимальної дози препарату 5-АЛК кожній групі щурів (по 6 тварин) вводили внутрішньочеревинно різні дози препарату: 100, 200, 300, 400, 500 і 700 мг/кг. Препарат вводили за 2 год. перед операцією і проводили дослідження флуоресценції через 1, 2 та 4 год. (по дві тварини з кожної дослідної групи). Тваринам під ефірним наркозом проводили розтин шкіри у передній ділянці шиї довжиною 2-3 см. Після цього тупим шляхом під звичайним світлом розсували м'язи, щоб мати прямий доступ до задньо-латеральної поверхні щитоподібної залози, де розміщені прищитоподібні залози. У тварин висікали мічені флюоресцентним агентом 5-АЛК прищитоподібні залози, а за відсутності такого світіння залоз продовжували препарування до адекватного їх розташування, виключаючи топографічну нетиповість і отримання „фальшивих" прищитоподібних тканин. Після паратиреоїдектомії розтин зашивали хірургічним шовком, а операційне поле обробляли 3 % спиртовим розчином йоду. Результати досліджень наведені на діаграмі (Фігура 1). При застосуванні флюоресцентного препарату 5-АЛК у дозах 300 мг/ кг маси тіла і вищих (400, 500, 700 мг/кг) прищитоподібні залози експонували достатню флуоресценцію для розрізнення їх на тлі щитоподібної залози. У голубому свіченні ілюмінація спостерігалася у 23 із 24 випадків. При дозах препарату 5-АЛК у 100 та 200 мг/кг (