Спосіб культивації клітин у чашках петрі та полістиролових плашках

Реферат: UA 67895 U UA 67895 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Корисна модель належить до ветеринарної біотехнології, зокрема до способів культивації культур клітин. Сучасну вірусологічну лабораторію важко уявити без клітинних культур різного походження. Культивацію клітин проводять загальноприйнятими методами. Технологічний процес складається з отримання клітин з органів шляхом ферментативної дезінтеграції, їх висівом у флакони різної місткості з додаванням поживного середовища для підтримання їх росту та інкубацією в термостатах з відповідною температурою. [Посібник з медичної вірусології: за редакцією Гиріна В.М… – К.: Здоров'я, 1995 - С. 46-54; Руководство по лабораторной диагностике вирусных и риккетсиозных болезней / Под. ред. П.Ф. Здроводского и проф. М.И. Соколова. – М.: Медицина, 1965. - С. 48-72; Методические рекомендации по культивированию перевиваемых культур клеток СПЭВ - М, ПСП, КЩС, КТП / Жуковский А.Н., Кучерявенко А. А., Гончаренко А. Г и др. – К.:, 1987 - С. 18-19]. При культивації клітин з доступом повітря необхідно створювати анаеробні умови [Сергеев В. А. / Репродукция и выращивание вирусов животных. – М.: Колос, 1976. - С. 14-15]. Так, культивування клітин у чашках Петрі та полістиролових плашках можливе лише при створенні анаеробних умов. Для цього багато фірм випускають спеціально оснащені СО 2інкубатори. Недоліком наведеного вище способу культивації є використання дорогого обладнання. Ми поставили задачу розробити спосіб культивації клітин у чашках Петрі та полістиролових плашках без використання СО2-інкубаторів. Поставлена задача виконується так, що спосіб культивації клітин у чашках Петрі та полістиролових плашках, який включає висів клітин у поживне середовище, відрізняється тим, що для створення анаеробних умов використовують процес горіння парафінової свічки, яка поміщена в закриту біксу. 3 Спосіб здійснюється так: суспензію клітин у концентрації 500-600 тис. клітин/см висівають у рідке живильне середовище, що містить: середовище Ігла - 45 %, середовище 199-45 %, 3 сироватку крові ВРХ - 10 %, глютамін - 0,1 %, а також 100 ОД/см натрієвої солі пеніциліну та сульфату стрептоміцину. Після цього суспензію клітин переносять на чашки Петрі та полістиролові плашки з лунками. Закривають кришками та поміщають в біксу, де встановлено запалену парафінову свічку. Біксу закривають кришкою, краї якої змащують гліцерином для щільного закриття та поміщають у звичайний термостат, де інкубують протягом 5-7 діб при температурі (37±0,5)°С без зміни середовища. Після формування моношару клітини знімають зі скла загальним методом та використовують для пересіву. Враховуючи значну роль культур клітин як біологічного матеріалу, який необхідний для репродукції вірусів, вивчення їх біологічних властивостей, ідентифікації та типізування при лабораторній діагностиці інфекційних захворювань тварин, оптимізація виробничого процесу без використання дорогого обладнання ставить цей спосіб в ряд вагомих внесків у галузі ветеринарної біотехнології. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб культивації клітин у чашках Петрі та полістиролових плашках, що включає висів клітин у поживне середовище, який відрізняється тим, що для створення анаеробних умов використовують процес горіння парафінової свічки, яка поміщена в закриту біксу. 45 Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 1