Спосіб одержання комплексу поліфенольних сполук з протизапальною, кардіопротекторною та антиоксидантною дією

Винахід відноситься до фармації, а саме до одержання біологічно-активних сполук з рослинної сировини, зокрема комплексу поліфенольних сполук з трави чини весняної, який проявляє протизапальну, кардіопротекторну та антиоксидантну дію. Відомий спосіб одержання засобів, які мають гіпоглікемічну активність [1]. Спосіб здійснюють шляхом екстракції трави квасолі 50% етиловим спиртом при співвідношенні 1:8-1:10, одержаний комплекс упарюють до 1/18-1/20 попереднього об'єму, водний залишок очищують спиртом з наступною обробкою хлористим метиленом. До недоліків відомого способу можна віднести використання як екстрагенту хлористого метилену, який є токсичною речовиною, має температуру кипіння близько 40°С. Його використання потребує за те хнікою безпеки особливих умов. Згідно з вимогами ДФУ залишковий вміст хлористого метилену у субстанціях та готових лікарських засобах не повинен перевищувати 0,05%, що у 20 разів менше, ніж граничний вміст залишкових кількостей етилового спирту (граничний вміст етилового спирту - 1,0%) [2]. Для організації рентабельного виробництва хлористий метилен необхідно повертати до технологічного процесу, що вимагає додаткових виробничих площ, збільшення енерго- та інших матеріальних витрат. Найближчим до заявленого способу є спосіб одержання біологічно активних сполук, що мають цукрознижуючу дію [3] з трави квасолі звичайної шляхом екстракції сировини водним етиловим спиртом при співвідношенні 1:2,5-1:3, упарювання комплексу до 1/10-1/11 попереднього об'єму, очищення кінцевого продукту етиловим спиртом з наступною сушкою. Проте відомий спосіб дозволяє одержати комплекс біологічно-активних сполук лише з цукрознижувальною дією. До того ж задане співвідношення сировина: екстрагент імовірно не забезпечує вичерпної екстракції активних речовин. Завданням винаходу є створення способу одержання поліфенольного комплексу рослинного походження з широким спектром фармакологічної дії, при якому шля хом спиртової екстракції трави чини весняної при заданих режимах, одержують поліфенольний комплекс з протизапальною, кардіопротекторною та антиоксидантною активністю при високому виході кінцевого продукту. Поставлене завдання вирішується таким чином, що у способі одержання комплексу поліфенольних сполук з протизапальною, кардіопротекторною та антиоксидантною дією шляхом екстракції рослинної сировини 50% етиловим спиртом, упарювання, обробки одержаного екстракту етиловим спиртом з наступним упарюванням і сушкою, передбачено, що в якості рослинної сировини використовують траву чини весняної, екстракцію проводять при співвідношенні сировина: етиловий спирт 1:7 протягом 48 годин, одержаний екстракт упарюють до 1/7-1/8 попереднього об'єму з наступною обробкою 96% етиловим спиртом при співвідношенні екстракт: етиловий спирт 1:1,5, відокремлюють осад, а надосадову рідину упарюють до 1/3 попереднього об'єму і висушують. Послідовність прийомів та параметри заявленого способу визначені експериментальним шляхом. Заявлене співвідношення сировина: екстрагент (1:7) та час проведення екстракції (48 годин) є оптимальними і забезпечують вичерпну екстракцію комплексу поліфенольних сполук з трави чини весняної. Для видалення водорозчинних білків та полісахаридів з упареного екстракту останній обробляють 96% етиловим спиртом при співвідношенні 1:1,5. Відокремлення осаду з наступним упарюванням і сушкою над осадової рідини забезпечує належний рівень чистоти кінцевого продукту. Винахід здійснюється наступним чином Подрібнену повітряно суху траву чини весняної, заготовленої у період цвітіння, піддають екстракції 50% етиловим спиртом при співвідношенні 1:7, одержаний комплекс упарюють до 1/7-1/8 об'єму, охолоджують до кімнатної температури. Упарений комплекс обробляють 96%-м етиловим спиртом при співвідношенні 1:1,5 і відокремлюють осад. Надосадову рідину упарюють до 1/5-1/6 попереднього об'єму і висушують. Вихід готового продукту 11,2%. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1 4кг повітряно-сухої, подрібненої до розміру 1-2мм на вальцях трави чини весняної, заготованої в період цвітіння, екстрагували 28л 50% етилового спирту протягом 48 годин. Отриманий спирто-водний комплекс (27л) упарювали під вакуумом до 3,5л, охолоджували до кімнатної температури (20°С) та обробляли упарений комплекс 96% етиловим спиртом (співвідношення 1:1,5), відділяли осад, надосадову рідину випарювали до водного залишку (до 1/3 об'єму), висушували у вакуум-сушильній шафі при температурі 70°С протягом 24 годин, подрібнювали у ступці. Отримали 450г світло-коричневого порошку очищену суму поліфенольних сполук (вихід 11,2%). Приклад 2 Вивчення протизапальної активності комплексу поліфенольних сполук з трави чини весняної, одержаного за заявленим способом (далі: комплексу) проводили на моделі карагенінового набряку стопи щурів. Ефект комплексу оцінювали за здатністю зменшува ти набряк стопи щурів у порівнянні з групою контрольної патології. Водний розчин комплексу вводили одноразово перорально за годину до введення карагеніну в дозах 1; 5; 10мг/кг маси тіла. Як препарат порівняння було обрано диклофенак натрію. Дослідних тварин було поділено на 5 груп: - контрольна патологія; - група тварин, яких лікували препаратом порівняння (диклофенак натрію); - групи тварин, яких лікували комплексом чини в дозах 1; 5; 10мг/кг маси тіла. Результати досліду наведено у таблиці 1. Таблиця 1 Протизапальна активність комплексу чини весняної в дозах 1-10мг/кг у порівнянні з диклофенаком натрію №, Умови досліду Протизапальна активність, % п/п 1 год 2 год 3 год 4 год 5 год 1. Диклофенак натрію (8мг/кг) 38,4* 48,3* 51,8* 49,6* 2. Комплекс (1мг/кг) 27,6 31,8* 37,8* 38,2* 3. Комплекс (5мг/кг) 39,7* 43,3* 40,1* 41,9* 4. Комплекс (10мг/кг) 53,4* 34,6 36,5* 31,5* Примітки: * - відхилення достовірне відносно контрольної патології (р