Спосіб мікробіологічної оцінки якості бутильованої води

1. Спосіб мікробіологічної оцінки якості бутильованої води, що полягає у проведенні мікробіологічного аналізу бутильованої води за характером росту висіяних мікроорганізмів на живильному середовищі, який відрізняється тим, що попередньо висівають мікробіологічну тесткультуру кишкової палички у суміші з дослідною пробою бутильованої води, вирощують при 37 °С упродовж 18-24 год, і за характером росту бактерій визначають бактеріостатичну і бактерицидну дію дослідної проби. 2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що суміш тест-культури бактерій готують з цільною водою і в розведеннях 1:2,1:4 та 1:8. Винахід стосується мікробіології, санітарії і гігієни, зокрема, комунальної гігієни харчових продуктів, і може бути використаний при здійсненні санітарного контролю та ліцензуванні бутильованих безалкогольних вод і напоїв та їх інгредієнтів. Відомий спосіб мікробіологічної оцінки якості бутильованої води, який полягає у проведенні мікробіологічного аналізу бутильованої води за характером росту висіяних мікроорганізмів на живильному середовищі [1]. За відомим способом проводять мікробіологічний посів дослідної проби води, а за показниками росту кишкової палички на живильних середовищах роблять висновок про мікробіологічну якість води. Недоліком відомого способу є недостатня точність та інформативність, що випливає з неврахування антимікробного впливу бутильованих вод на нормальну мікрофлору кишечника. Без вказаної інформації висновок про шкідливість або нешкідливість бутильованої води залишається недостатньо аргументованим. Так, при виготовленні бутильованих безалкогольних вод і напоїв вже ліцензовану воду із свердловини піддають додатковій технологічній обробці, часто несанкціонованій і нерегламентованій. В результаті, отримують так звану "підготовлену артезіанську воду", "структуровану", "срібну воду", причому використовують інші непередбачені технологічним процесом "покращання" якості води. Саме це може значно змінювати властивості води, надавати їй антимікробних часто неконтрольованих - властивостей. Аналогічна ситуація пов'язана також з додаванням до води консервантів, барвників, інших компонентів, зокрема, імуностимуляторів, які можуть викликати шкідливі явища дисбактеріозу. 82547 (11) UA (19) В основу винаходу поставлено завдання вдосконалити відомий спосіб, в якому шляхом введення додаткового етапу мікробіологічного дослідження, спрямованого на виявлення антимікробної дії дослідної проби бутильованої води на стандартизований мікробіологічний тестоб'єкт досягають підвищення точності та інформативності аналізу. Поставлене завдання вирішують тим, що у відомому способі мікробіологічної оцінки якості бутильованої води, який полягає у проведенні мікробіологічного аналізу бутильованої води за (13) C2 (21) a200602424 (22) 06.03.2006 (24) 25.04.2008 (46) 25.04.2008, Бюл.№ 8, 2008 р. (72) КОВАНОВА ЕЛЬВІРА МИКОЛАЇВНА, UA, КЛИМНЮК СЕРГІЙ ІВАНОВИЧ, UA, ДЕМ'ЯНЕНКО ВАСИЛЬ ВАСИЛЬОВИЧ, UA (73) ТЕРНОПІЛЬСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМЕНІ І.Я.ГОРБАЧЕВСЬКОГО, UA (56) UA 55685 A, 15.04.2003. UA 75711 C2, 17.10.2005. Микробиологический контроль воды, пива и безалкогольных напитков. http://www.millipore.ru/m microb/microb1.htm.30.10.2000. Методические указания. Питьевая вода и водоснабжение населенных мест. Организация внутреннего контроля качесва санитарно 3 82547 характером росту висіяних мікроорганізмів на живильному середовищі, відповідно до винаходу попередньо висівають мікробіологічну тесткультуру кишкової палички у суміші з дослідною пробою бутильованої води, вирощують при 37°С впродовж 18-24 год, і за характером росту бактерій визначають бактеріостатичну і бактерицидну дію дослідної проби, причому суміш тест-культури бактерій готують з цільною водою дослідної проби і в розведеннях 1:2, 1:4 та 1:8. Конкретно спосіб здійснюють таким чином. У ряді пробірок починаючи з 2-ої, готують двократні серійні розведення води у середовищі Ейкмана: 1: 2, 1:4, 1: 8. У першу пробірку наливають 2 мл досліджуваної води, а у 5-ту - 2мл середовища Ейкмана (контроль культури). В усі пробірки додають суспензію тест-культури Е. соїі АТСС 25922 з розрахунку 1000 клітин в 1мл. Посіви інкубують у термостаті при 37°С упродовж 18-24 годин. Мінімальний бактеріостатичний титр (МБсТ) визначають за результатом в останній пробірці з прозорим середовищем при наявності інтенсивного помутніння в контролі. Для визначення бактерицидної дії з кожної пробірки роблять висів на середовище Ендо. За мінімальний бактерицидний титр (МБцТ) приймають те найбільше розведення, посів з якого не супроводжується ростом. За отриманими показниками дають оцінку мікробіологічній якості дослідної проби: при негативному результаті бактеріального росту роблять висновок про низьку мікробіологічну якість дослідженої проби та 4 непридатність води для пиття, а при позитивному результаті - навпаки, про її високу якість і придатність для споживання. Приклад 1. Вибрану для аналізу бутильовану воду "Збручанська" в кількості 2 мл налили у першу пробірку і, починаючи з другої, приготували серійні двократні розведення в середовищі Ейкмана в співвідношенні від 1:2 до 1:8 - включно. В останню, п'яту, пробірку (контроль культури) налили 2мл середовища Ейкмана. В усі пробірки додали суспензію Е. coli ATCC 25922 по 0,2мл із концентрацією мікробних тіл 10000/мл. Після інкубації в термостаті при 37°С упродовж 24 годин спостерігали відсутність помутніння у перших трьох пробірках - з цільною та в розведеннях 1:2 і 1:4 при наявності росту бактерій у 5-й пробірці. Отже, вода «Збручанська» пригнічувала ріст кишкової палички у найбільшому розведенні 1:4 (МБсТ 1:4). Для дослідження бактерицидної активності з усіх пробірок зроблено висів на сектори чашки із середовищем Ендо. Після інкубації у термостаті впродовж 24 годин при 37°С спостерігали інтенсивний характерний ріст кишкової палички червоного кольору з металевим блиском на всіх секторах крім першого. Отже, бутильована вода «Збручанська» проявляла бактеріостатичну і бактерицидну дію. На основі отриманих результатів зроблено висновок про непридатність її2. споживання. Приклад для Запропонованим способом провели дослідження мікробіологічної якості ряду бутильованих вод, зокрема "Доброї води", "Вишнивецької" та "Моршинської". Таблиця 1 Бактеріостатична дія бутильованих безалкогольних вод № п/п Назва води 1 2 3 Добра вода Вишнивецька Моршинська Цільна вода Розведення 1:2 1:4 + + + + + 1:8 + + + Контроль + + + Примітки: «+» - наявність росту, «–» - відсутність росту мікробної тест-культури Як видно з наведених у таблиці 1 даних, у всіх досліджених проб бутильованої води встановлена бактеріостатична дія на кишкову паличку, причому МбсТ для "Доброї води" дорівнював 1:4, що характеризувало її як найменш придатну для пиття, а вода "Вишнивецька" і "Моршинська" пригнічували ріст тест-культури у цільному вигляді, що також характеризує їх як недостньо якісні для споживання. Зроблений висновок підтверджують результати дослідження бактерицидної дії взятих на аналіз видів бутильованої води (табл. 2). Таблиця 2 Бактерицидна дія бутильованих безалкогольних вод № п/п Назва води 1 2 3 Добра вода Вишнивецька Моршинська Цільна вода Розведення 1:2 1:4 + + + + + 4 1:8 + + + Примітки: «+» - наявність росту, «–» - відсутність росту мікробної тест-культури Контроль + + + 5 82547 Високий рівень бактеріостатичної і бактерицидної дії взятих на аналіз видів бутильованої води дозволив зробити висновок про непридатність їх, а саме "Доброї води", "Вишнивецької" і "Моршинської", для вживання як таких що потенційно містять високий ризик виникнення в організмі споживача небезпечних для здоров'я явищ дисбактеріозу. Таким чином, запропонований спосіб забезпечує вищий, порівняно з прототипом, рівень точності та інформативності дослідження мікробіологічної якості бутильованої води, що знайде застосування в санітарно-гігієнічній практиці, насамперед, при вирішенні питань Комп’ютерна верстка В. Клюкін 6 технології виготовлення безпечної для здоров'я масового споживача бутильованої води, у тому числі безалкогольних напоїв і їх інгредієнтів. Впровадження запропонованого способу сприятиме унеможливленню порушень мікробної екології кишечника і загрози виникнення масового дисбактеріозу, пов'язаного із вживанням небезпечної для здоров'я води. Джерело інформації, яке слід взяти до уваги : 1. ДСанПіН. Вода питна. Гігієнічні вимоги до якості води централізованого господарськопитного водопостачання, № 383 від 23.12.1996.11с. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601