Штам гриба beauveria bassiana, який використовують для виробництва інсектицидного біопрепарату

Штам гриба Beauveria bassiana IMB F-100043, який використовують для виробництва інсектицидного біопрепарату. (19) (21) a200611350 (22) 27.10.2006 (24) 10.10.2008 (46) 10.10.2008, Бюл.№ 19, 2008 р. (72) ВІННІКОВ АЛЬБЕРТ ІВАНОВИЧ, UA, ЧЕРЕВАЧ Н АТАЛІЯ ВАСИЛІВН А, U A, ДРЕГВАЛЬ ОКСАНА АНАТОЛІЇВНА, U A (73) ДНІПРОПЕТРОВСЬКИЙ НАЦІОН АЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA (56) BG 47966, 1990-11-15 SU 1795980 A3, 15.02.1993 3 84325 вані уздовж гіф парами або мутовками; біля основи розширені, звужуються до вершини у вигляді тонкого зигзагоподібного волокна. Конідії формуються на тонких коротких стеригмах і мають кулясту або яйцеподібну форму (розмір 2-3 ´ 1,72,5мкм), одноклітинні, безбарвні. На рідких поживних середовищах в умовах інтенсивного перемішування утворюється цільовий продукт - бластоспори. На сусло-агарі, середовищі Чапека, глюкозокрохмальному середовищі спочатку виростають білі пухнасті колонії, які пізніше стають кремовими та порошковидними; середовище залишається безбарвним. Розмір колоній 1-2см. Штам росте в діапазоні температур 5-35°C, оптимальна температура - 26-27°С. Штам F-6 синтезує екзотоксин (боверіцин) та комплекс ферментів, токсичних для личинок та імаго комах. Штам продукує ліпазу, хі тиназу, протеїназу, амілазу та уреазу. Селекціонований штам F-6 є перспективним для створення на його основі промислового біоінсектицидного препарату, який характеризується високою активністю та широким спектром інсектицидної дії проти комах-шкідників родини Coleoptera та Lepidoptera. Для зберігання активного штаму можна використовувати загиблих уражених грибом комах. Суспензія конідій штаму F-6 може бути ліофільно висушеною. Кращим середовищем для ліофільного висушування спор є 2% желатина в 10% розчині сахарози. Приклад використання штаму для отримання ентомопатогенного препарату. Штам F-6 вирощується на поживному середовищі методом однофа 4 зного культивування на посівному та ферментаційному середовищах (4,5). Склад посівного середовища: 7°Б сусло, рН 6,5. Склад ферментаційного середовища (г/л): к укур удзяний екстракт 20; зелена патока - 25; гумат натрію - 9; NaCl - 1,8; СаСО3 - 0,8; рН 6,5. Інокулят вносять у кількості 5% від общему поживного середовища. Вирощують у колбах на !мікробіологічних качалках (220об/хв) протягом 4-5 діб. Отриману культуральну рідину, яка містить 2,0-4,0´108 спор/мл концентрують центифугуванням. До концентрату, який містить 1,0-2,5´109 спор/г додають 15% карбоксиметилцелюлози (наповнювач), 0,5% тіосечовини (антиоксидант), комплекс солей: KCl - 30%; ZnSO4 - 0,2%, MgSC4 - 0,5%; CuSO4 - 0,07% (стабілізатори) Кількість добавок додають у розрахунку на суху вагу. Інсектицидну активність препарату визначають при зараженні личинок І та II віку та імаго колорадського жука, гусені листовійки всеїдної, американського білого метелика, яблуневої молі. Використовують суспензію препарату з титром 1´107 спор/мл. Експериментальних комах розміщують по 2025 особин у склянки, які закривають марлею. Свіжий корм (3г) зволожують 1мл суспензії бластоспор та вносять у склянки з комахами. Інсектицидну активність штаму визначають по відсотку загиблих комах. Дослід проводять у 3-5 повторах. Інсектидицна активність препарату, одержаного на основі штаму Beauveria bassiana F-6 та прототипу ВКП М-Г-399 наведена у таблиці. Таблиця Інсектидицна активність препарату, одержаного на основі штаму Beauveria bassiana F-6 та прототипу ВКПМ-Г-399 Загибель комах, % (7 доба) личинки коло- імаго колорадсько- личинки листо- личинки американського личинки яблунерадського жука го жука війки всеїдної білого метелика вої молі F-6 100,0 93,0 100,0 79,0 95,0 ВКПМ-Г-399 98,3 86,7 Штам Таким чином, препарат на основі штаму F-6 характеризується більш високою інсектицидною активністю, порівняно з прототипом ВКПМ-Г-399, та має більш широкий спектр ентомоцидної дії. Одержаний штам гриба Beauveria bassiana F-6 депоновано 29 грудня 2005 року у депозитарії Інституту мікробіології і вірусології HAH України, який знаходиться за адресою: ГСП Д 03680, Київ, вул. Заболотного, 154. Реєстраційний номер, наданий штаму мікроорганізму Депозитарієм: Beauveria bassiana IMB F-100043. Список використаних джерел 1. Везер Я. Микробиологические методы борьбы с вредними насекомыми. -M.: Колос.-1972.640с. 2. Гальвидис И.Ю., Кононова Э.В., Дубова В.И., Баласова А.И., Бабаян Е.Ю., наконечная А.В., Коновалова Г.Н. Штамм гриба Beauveria bassiana (BaIs) Vuill для производства инсектицтд ного препарата боверина. СССР А.с. 1688820. Кл. А 01 №63/04, 1991. 3. Garcia-Gutierrez Cipriano, Ochoa-Martiner Luz A., Medrano-Roldan Hiram, Segovia Tagle Veronica Spray dried microencapsulated formulation of Beauveria bassiana for control of Epilachna varivestis mulsant // Southwest Entomol. -2002. - Vol. 27, №1. P. 105-109. 4. Дрегваль О. А., Черевач H. В., Крашевская В. И., Винников А. И. Подбор питательной среды для культивирования энтомопатогенных грибов Beauveria bassiana // Вісник ДНУ "Біологія. Екологія", 2001. - В. 9, - T. 1.-C. 80-83. 5. Дрегваль О.А., Вінніков А.І., Черевач Н.В. Оптимизація живильного середовища для вирощування ентомопатогенних грибів Beauveria bassiana. Тези IV з'їзду грунтознав. та агрохім. України.- Харків, 1994, C. 98. 5 Комп’ютерна в ерстка Л. Купенко 84325 6 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601