Спосіб одержання логаніну та секологаніну

1. Спосіб одержання логаніну та секологаніну шляхом екстракції плодів сніжноягідника органічним розчинником з подальшим концентруванням екстракту, фільтруванням, одержанням сухого залишку фільтрату та хроматографічним виділенням кінцевого продукту на колонці із силікагелем з використанням суміші спирту з малополярним розчинником як елюенту, який відрізняється тим, що екстракцію здійснюють бутанолом-1 при співвідношенні сировина : екстрагент 2:1-1:1 до повного виснаження сировини, а одержаний екстракт концентрують до початку процесу кристалізації. 2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що екстракцію проводять з додаванням сульфату натрію безводного у співвідношенні сировина : сульфат натрію безводний 10:1-10:8. 3. Спосіб за п. 1 або п. 2, який відрізняється тим, що як елюент використовують суміш етилацетату з пропанолом-2 з вмістом останнього 18-24% або суміш хлороформу з метанолом з вмістом метанолу 15-22%, або суміш хлороформу з етанолом з вмістом етанолу 17-25%. (19) UA (21) a200612959 (22) 08.12.2006 (24) 10.10.2008 (46) 10.10.2008, Бюл.№ 19, 2008 р. (72) КОВАЛЕНКО СЕРГІЙ МИКОЛАЙОВИЧ, U A, МАКАРЕВИЧ ІВАН ФОМИЧ, U A, ГУБІН ЮРІЙ ІВАНОВИЧ, UA, ГУСАРОВА ТЕТЯНА ДМИТРІВН А, U A (73) НАЦІОН АЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA (56) "Biomimetic Transformations of the Biogenetic Key Intermediate Secologanin". Lutz F. Tietze, Stephan Henke, Christoph Bartels, Tetrahedron, 44, № 23, p. 7145- 7153, 1988. Studies on the Constituents of Lonicera Species. XVII.1) New Iridoid Glycosides of the Stems and Leaves of Lonicera japonica THUNB Koichi MACHIDA, Hiromi SASAKI, Takeyoshi IIJIMA, and Masao KIKUCHI* Tohoku Pharmaceutical University; 4-4-1 Komatsushima, Aoba-ku, Sendai, Miyagi 9818558, Japan. Received February 21, 2002; accepted April 11, 2002. Studies on the Constituents of Syringa Species. XII.1) New Glycosides from the Leaves of Syringa reticulata (BLUME) HAR A Koichi MACHID A, Eriko UNAGAMI, Hiromi OJIMA, and Masao KIKUCHI* Tohoku Pharmaceutical University; 4-4-1 Komatsushima, Aoba-ku, Sendai, Miyagi 981-8558, Japan. Received February 24, 2003; accepted March 31, 2003. C2 2 (11) 1 3 OH HO HO O 84342 H 3C O OH H OH O H O O CH 3 I OH HO HO O OH H2 C O O H O H O O CH3 II Ці іридоїдні глікозиди відіграють важливу роль у біосинтезі індольних алкалоїдів у рослинах. За хімічною структурою логанін та секологанін мають багато різних реакційно-здатних функціональних груп, тому їх використовують в якості напівпродуктів для синтезу нових БАР для подальшого створення лікарських засобів з різними фармакологічними властивостями. Вивчено протизапальну дію логаніну та антимікробну -секологаніну. Ці сполуки виявляють також помірну протипухлинну активність. Відомий спосіб одержання секологаніну зі свіжих плодів сніжноягідника білого (Symphoricarpos albus (L)) ["Biomimetic Transformations of the Biogenetic Key Intermediate Secologanin". Lutz F. Tietze, Stephan Henke, Christoph Bartels, Tetrahedron, 44, №23, 7145 (1988)], який полягає в екстрагуванні ацетоном подрібнених свіжозібраних плодів сніжноягідника білого. Ацетоновий екстракт центрифугують, концентрують у вакуумі при 30°С, водний залишок досушують за допомогою вакуумної ліофільної сушки. Одержану суміш речовин хроматографують на колонці зі силікагелем з використанням у якості елюенту суміші етилацетат пропанол-2 з вмістом останнього 25%, одержують при цьому секологанін. До недоліків відомого способу можна віднести: - складність відділення ацетонового екстракту від сировини внаслідок утворення стійкої емульсії (при перемішуванні суміші сировина - екстрагент); - екстрагування крім секологаніну великої кількості високополярних екстрактивних речовин, відділення яких вельми ускладнює технологічний процес; - виділення лише однієї речовини - секологаніну, при можливості одержати додатково логанін. - тривалий процес ліофільної сушки великого об'єму водного розчину. Завданням винаходу є створення способу одержання логаніну та секологаніну, який завдяки використанню бутанолу-1 в якості екстрагенту при заявлених параметрах способу дозволяє одержати в індивідуальному стані дві БАР, перспективні 4 для подальшого використання у синтезі широкого спектру нових лікарських субстанцій, підвищити вихід кінцевих продуктів, спростити та здешевити технологічний процес. Поставлене завдання вирішується таким чином, що у способі одержання логаніну та секологаніну шляхом екстракції плодів сніжноягідника органічним розчинником з подальшим концентруванням екстракту, фільтруванням, одержанням сухого залишку фільтрату та хроматографічним виділенням кінцевого продукту на колонці із силікагелем з використанням суміші спирту з малополярним розчинником в якості елюенту, винаходом передбачено, що екстракцію здійснюють бутанолом-1 при співвідношенні сировина : екстрагент 2:1-1:1 до повного виснаження сировини, а одержаний екстракт концентрують до початку процесу кристалізації. Згідно з винаходом екстракцію проводять з додаванням сульфату натрію безводного у співвідношенні сировина : сульфат натрію безводний 10:1-10:8. Винаходом також передбачено, що в якості елюенту використовують суміш етилацетату з пропанолом-2 з вмістом останнього 18-24% або суміш хлороформу з метанолом з вмістом метанолу 15-22% або суміш хлороформу з етанолом з вмістом етанолу 17-25%. Вибір в якості екстрагента бутанолу-1 був здійснений експериментальним шляхом. Переваги запропонованого екстрагента полягають в тому, що він поєднує у собі високу екстрагуючу здатність по відношенню до логаніну та секологаніну, при цьому до нього переходить менша кількість високополярних екстрактивних речовин у порівнянні з ацетоном. Бутанол-1 не утворює стійку емульсію з сировиною, суттєво спрощує те хнологічний процес одержання секологаніну та логаніну. Вибір співвідношення сировина : екстрагент був здійснений експериментальним шляхом. При зменшенні кількості екстрагенту у співвідношенні сировина : екстрагент 2:1 відбувається неповна екстракція логаніну та секологаніну, вихід їх значно зменшується. При збільшенні кількості екстрагенту у співвідношенні сировина : екстрагент 1:1 збільшуються витрати екстрагенту, зростають затрати часу на концентрування екстракту та подовжується загальний час технологічного процесу, але не призводить до збільшення виходу цільових продуктів. Оптимальним є співвідношення сировина : екстрагент 5:3. У заявленому способі передбачено концентрування одержаного екстракту до початку процесу кристалізації. Концентрування введено з метою очищення одержаного екстракту шляхом видалення екстрагенту, зайвої вологи та сполук, які випадають в осад з екстрагента. Таке очищення екстракту дозволяє зменшити кількість супутніх речовин, що впливає на ступінь чистоти кінцевих продуктів логаніну та секологаніну. Екстракцію бажано, але не обов'язково, проводити з додаванням натрію сульфату безводного. Свіжі плоди сніжноягідника містять багато води. Натрію сульфат безводний частково поглинає во 5 84342 ду та в процесі розчинення впливає на збільшення виходу логаніну та секологаніну з сировини. Експериментальним шляхом визначено, що зменшення вмісту натрію сульфату безводного у співвідношенні сировина : натрію сульфат безводний 10:1 останній поглинає незначну кількість води; вихід логаніну та секологаніну зменшується. При збільшенні вмісту натрію сульфату безводного у співвідношенні сировина : натрію сульфат безводний 10:8 збільшуються витрати натрію сульфату безводного, проте не підвищується вихід логаніну та секологаніну. Оптимальним є співвідношення сировина : натрію сульфат безводний 10:2. При хроматографічному розділенні цільових продуктів авторами було досліджено різні варіанти елюентів для здійснення заявленого способу. Експериментально було доведено, що найбільш ефективними для розділення логаніну та секологаніну є наступні композиції елюентів: суміш етилацетату з пропанолом-2 з вмістом останнього 18-24% або суміш хлороформу з метанолом з вмістом метанолу 15-22% або суміш хлороформу з етанолом з вмістом етанолу 17-25%. Було встановлено, що при вмісті спиртів менше зазначених меж робота хроматографічної колонки невиправдано затягується. При більш високому відсотковому вмісті спиртів (у порівнянні із зазначеними межами) погіршується якість розділу речовин; цільові речовини виходять із меншим виходом і гіршою якістю (ступінь чистоти менш 90%). Заявлений спосіб здійснюють наступним чином. Свіжі плоди сніжноягідника подрібнюють, подають у екстрактор, заливають розраховану кількість бутанолу-1, додають сульфат натрію безводний та перемішують. Одержаний екстракт концентрують та фільтрують. Фільтрат упарюють до сухого залишку та хроматографують на колонці зі силікагелем з використанням суміші етилацетату з пропанолом-2 з вмістом останнього 18-24% або суміші хлороформу з метанолом з вмістом метанолу 15-22% або суміші хлороформу з етанолом з вмістом етанолу 17-25%. Одержують логанін та секологанін у вигляді жовтувати х аморфних порошків зі ступенем чистоти 90-92%. Кут обертання секологаніну [ a ]D=-93,6° у метанолі, кут обертання логаніну - [ a ]D=-87,4° у метанолі. Вихід готового продукту 61-65% від вмісту у сировині. Комп’ютерна в ерстка В. Клюкін 6 Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1. Для одержання логаніну та секологаніну за заявленим способом змішували 10кг подрібнених плодів сніжноягідника, 6л бутанолу-1 та 2кг сульфату натрію безводного. Одержаний екстракт фільтрували та концентрували на водяній бані до початку процесу кристалізації. Процес екстракції повторювали до повного виснаження сировини. Одержані екстракти об'єднували та фільтрували. Фільтрат упарювали досуха. Сухий залишок хроматографували на колонці зі силікагелем з використанням елюенту хлороформ - метанол 20%. Роздільно одержували та упарювали досуха фракції з вмістом логаніну та секологаніну. Кінцеві продукти - логанін та секологанін у вигляді аморфних порошків мали ступінь чистоти 91%. Вихід 62% від вмісту у сировині. Приклад 2. Спосіб здійснювали аналогічним чином з прикладом 1 з тією різницею, що у якості елюенту для хроматографування на колонці із силікагелем була використана суміш хлороформу з етанолом з вмістом етанолу 22%. Одержані при цьому аморфні порошки логаніну та секологаніну мали ступінь чистоти 92%. Вихід 61% від вмісту у сировині. Приклад 3. Спосіб здійснювали аналогічним чином з прикладом 1 з тією різницею, що у якості елюенту для хроматографування на колонці із силікагелем була використана суміш етилацетату з пропанолом-2 з вмістом останнього 20%. Одержані при цьому аморфні порошки логаніну та секологаніну мали ступінь чистоти 90%. Вихід 65% від вмісту у сировині. Наведені приклади свідчать про те, що заявлений спосіб дозволяє одержати індивідуальні сполуки логанін та секологанін з чистотою 90-92% та ви ходом 61-65% від вмісту у сировині. Таким чином, заявлено спосіб одержання логаніну та секологаніну, який забезпечує одержання у одному технологічному процесі двох БАР з високим ступенем чистоти і виходом з сировини, перспективних для подальшого одержання шляхом органічного синтезу лікарських субстанцій, які в свою чергу можуть бути використані для одержання лікарських засобів різної фармакологічної активності. Заявлений спосіб може бути здійснений на хіміко-фармацевтичному виробництві з використанням стандартного обладнання. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601