Спосіб підвищення виходу життєздатних ембріональних плюрипотентних прогенітоорних клітин

Номер патенту: 111106

Опубліковано: 25.10.2016

Автори: Сірман Віктор Мірчович, Радченко Віктор Володимирович

Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Спосіб підвищення виходу життєздатних ембріональних плюрипотентних прогеніторних клітин, що включає забір донорського органа, його подрібнення, промивання, центрифугування, який відрізняється тим, що промивання здійснюють в розчині Хенкса, в який попередньо введений ксенон в кількості до 10 % від об'єму розчину, що застосовується для промивання.

Текст

Реферат: Спосіб підвищення виходу життєздатних ембріональних плюрипотентних прогеніторних клітин включає забір донорського органа, його подрібнення, промивання, центрифугування. Промивання здійснюють в розчині Хенкса, в який попередньо введений ксенон в кількості до 10 % від об'єму розчину, що застосовується для промивання. UA 111106 U (12) UA 111106 U UA 111106 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Дана корисна модель належить до медицини і біотехнології і може бути використана для підвищення кількості життєздатних ембріональних плюрипотентних прогеніторних клітин (ЕППК). Відомий спосіб одержання ендотеліальних клітин із ембріональних стовбурових клітин людини (варіанти) згідно з патентом РФ № 2359030, який передбачає диференціювання ембріональних стовбурових клітин людини на підкладці і в синтетичному середовищі. Недоліком даного методу є незначний відсоток виходу життєздатних клітин. Відомий також спосіб одержання стабільних клітинних культур згідно з патентом РФ № 2392318. До недоліків даного способу також можна віднести незначний відсоток отримання життєздатних клітин. Найбільш близьким до заявлюваного способу є спосіб згідно з патентом РФ № 23769997 С2 "Застосування окису вуглецю для покращення результату тканинної і органної трансплантації і пригнічення апоптозу". Винахід належить до способів трансплантації органів, тканин і індивідуальних клітин, а також до способів підтримки клітин in vitro і підвищення виживання та/або функціональності донорського органа, тканини або клітини після трансплантації. Зазначені способи включають в себе введення окису вуглецю в ефективній кількості, достатній для підвищення виживаності і/або функціональності клітини. Даний спосіб обраний нами як найближчий аналог. Спосіб, що заявляється, і спосіб - найближчий аналог збігаються за ознакою використання газового середовища. В основу корисної моделі, що заявляється, поставлена задача створити спосіб, що дозволяє збільшити вихід життєздатних ЕППК, що важливо при трансплантації органів, тканин і клітин. Поставлена задача вирішена в способі підвищення життєздатних ЕППК, який включає забір донорського органа, його подрібнення, промивання в розчині Хенкса, центрифугування і виділення клітин. Новим в способі, що заявляється є те, що в розчин Хенкса попередньо вводять інертний газ ксенон в кількості до 10 % від об'єму розчину, яким промивають. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю заявлених ознак і результатом, що досягається можна пояснити наступним чином: ксенон в водних розчинах структурує воду в форму клатратів. Найбільша концентрація ксенону утворюється в ліпідах клітинних мембран. Клатрати у водних каналах мембран викликають їх функціональне пригнічення, що знижує процеси пошкодження клітин в процесі їх виділення і, тим самим, сприяє підвищенню виходу життєздатних клітин (Головенко М. Я, Сачура В. О., Гоженко А. І., Ксенон - інертний газ, що має фармакологічну активність // Вісник фармакології та фармації.-2010. - № 9. - С. 2-9; Головенко М.Я., Гоженко А. І. Поєднання інертності та фармакологічної активності в молекулі ксенона // Клінічна та експериментальна фармакологія метаболічних коректорів, органопротеція, доказова медицина: Матер. VI Всеукр. науково-практ. конф-ції з міжнародною участю з клінічної фармакології, присвяченої 90-річчю професора О. О. Столярчука (10-11 листопада 2010 p., м. Вінниця). - Вінниця, 2010. - С. 191193). Спосіб здійснюється таким чином: Для виділення ембріональних прогеніторних клітин вагітних самок вводили в наркоз (натрію етамінал - 40 мг на кг маси тіла) на 11-13 стадіях розвитку ембріону за Астауровим. Після асептичної обробки операційного поля (96° етиловий спирт, йод) виконували серединну лапаротомію по linea alba. Обидва роги матки виводили в операційну рану и розрізали стерильними ножицями поперек (біля ембріонів). Останні вилущували в стерильну чашку Петрі з охолодженим до 4 °C середовищем Хенкса, в який попередньо вводився ксенон в кількості 10 % від загального об'єму розчину. Після потрійної промивки з ембріонів виділяли ембріональні прогеніторні клітини за розробленою нами методикою (ПУ № 72796). Суспензію ембріональних прогеніторних клітин профільтровували через капроновий фільтр (200 мкм). Контроль життєздатності клітин здійснювали шляхом світлової мікроскопії при забарвленні клітин трипановим синім. При цьому кількість життєздатних клітин становило 85-87 % в порівнянні зі способом-найближчим аналогом. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб підвищення виходу життєздатних ембріональних плюрипотентних прогеніторних клітин, що включає забір донорського органа, його подрібнення, промивання, центрифугування, який відрізняється тим, що промивання здійснюють в розчині Хенкса, в який попередньо введений ксенон в кількості до 10 % від об'єму розчину, що застосовується для промивання. 1 UA 111106 U Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2

Дивитися

Додаткова інформація

МПК / Мітки

МПК: C12N 5/00

Мітки: плюрипотентних, клітин, підвищення, ембріональних, прогенітоорних, спосіб, життєздатних, виходу

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/4-111106-sposib-pidvishhennya-vikhodu-zhittehzdatnikh-embrionalnikh-plyuripotentnikh-progenitoornikh-klitin.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб підвищення виходу життєздатних ембріональних плюрипотентних прогенітоорних клітин</a>

Подібні патенти